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（2）擴增結果差，條帶模糊或難以辨認。――更換Taq聚合酶緩沖液。――檢查引物（使用另外一個引物，或者將引物末端標記，在 16% 6mol/L尿素聚丙烯酰胺膠上電泳檢測）。――檢查Taq聚合酶活性（與不同批量的酶作比較）。――改變DNA濃度。（3）高相對分子質量產物彌散狀分布>4kb。――降低DNA濃度。――降低Taq聚合酶濃度。――減少凝膠上樣量。―― 可能是由于循環數過多的結果（Bell和Demarini 1991），減少循環數。――確認是否使用正確的緩沖液（不是水！）制備凝膠。―― 在較低的電壓下電泳。（4）在對照和所有檢測樣品中均為一條很強的單一帶。――確認引物序列不是回文結構。這可能是引物多聚體造成的結果。使用不同的引物。（5）帶譜不可重復。――DNA過多或過少。把基因組DNA濃度控制在10～100ng范圍之內，DNA量太少時，“真正”靶序列與引物的結合效率低，因此引物擴增會產生假的條帶，這就稱為引物偽跡；DNA......閱讀全文
第三節 RAPD技術一、 材料不同來源的DNA(50ng/ul)。二、設備PCR儀，PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管，電泳裝置。三、試劑1、隨機引物(10mer) (5umol/L)：購買成品。2、Taq酶：購買成品。3、10xPCR 緩沖液：配方見第八章。4、MgCl2 ：25mm
摘要：綜述了RAPD技術的一些理論性問題，包括RAPD與其它分子標記技術相比的優點，影響結果重復性的因素，顯性標記產生的原因，條帶取舍的標準等。提出在實驗中解決這些問題的一些方法：嚴格控制反應條件，采用單倍體和單劑量標記，系統學研究中要結合其它方法進行分析，定位基因時要選用合適的群體等。
RAPD分析技術 實驗方法原理 RAPD作為單引物的PCR擴增產物，其產生機理是引物首先結合到模
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
聚合酶鏈式反應（PCR）以其優越性極大地影響到了分子生物學的幾乎所有領域，并以其基本程序和DGGE，開發出多種檢測核苷酸變異的方法。RAPD（Random Amplifed Polymorphic DNA）是其中一種，可用于（1）遺傳圖譜的構建（2）系統學研究（3）目的基因的標記和定位（4）純度和外
遺傳標記在遺傳學的建立和發展過程中有著舉足輕重的作用，隨著遺傳學的進一步發展和分子生物學的異軍突起，遺傳標記先后相應地經歷了形態標記、細胞學標記、生化標記和DNA分子標記四個發展階段。前三種標記都是以基因表達的結果為基礎的，是對基因的間接反映；而DNA分子標記則是DNA水平遺傳變異的直接反映，它具有
1 目的分子標記是一類建立在分子水平上的遺傳標記，它同樣具有遺傳標記的兩個特點，即可遺傳性和可識別性。廣義的分子標記包括同工酶和DNA分子標記兩類，狹義的分子標記則僅指后者。DNA分子標記通常是一些小分子量的DNA片段（幾十到2000bp左右），它們大量存在于真核生物的基因組內，能夠通過特定的技術和
RAPD（Randomly Amplified Polymorphic DNA），意為隨機擴增多態性DNA，是利用PCR技術進行隨機擴增，把擴增的DNA片段進行瓊脂糖凝膠電泳，根據DNA條帶的多態性來反應模板DNA序列上的多態性。RAPD同AFLP、SSR等分子標記一樣都基于PCR擴增，只
現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解，并且導致了免疫新策略的產生，免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。 一、GST pull-down實驗 GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶，GST pull-down實驗是一個行之有效的驗
在新世紀之初，由于全球人增地減、資源匱乏，人類對環境的依賴性愈來愈強烈。隨著人類的生活要求和工農業生產的迅速發展，大量人工合成的并難以被天然微生物迅速降解轉化的污染性化合物進入到自然環境中，成為嚴重威脅人類及其他生物正常生存發展的土壤污染區，污染還導致資源環境中生物重組，使物種的分布與
在新世紀之初,由于全球人增地減、資源匱乏,人類對環境的依賴性愈來愈強烈.隨著人類的生活要求和工農業生產的迅速發展,大量人工合成的并難以被天然微生物迅速降解轉化的污染性化合物進入到自然環境中,成為嚴重威脅人類及其他生物正常生存發展的土壤污染區,污染還導致資源環境中生物重組,使物種的分布與多度均發生深刻
第一節 概 述DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism，限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種（個體）基因組的限制性內切
RFLP和RAPD技術概 述 DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種
一、核酸提取技術的改進進行分子生物學研究的前提是取得高數量和高質量的核酸，即DNA和RNA。由于隱球菌細胞壁外有一層厚厚的莢膜，為破除真菌細胞壁造成很大困難。可靠地提取隱球菌DNA的方法建立于20世紀80年代后期，研究者先后建立了玻璃珠方法、超聲粉碎、液氮冷凍研磨等破壁技術。后來，發展酶學方法取代物
第七章 RFLP和RAPD技術第一節 概 述 DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同
內容：一、遺傳標記 二、DNA分子標記 三、染色體原位雜交 四、DNA分子標記的應用 長期以來，植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的，當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時，表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀，如
原理：DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種（個體）基因組的限制性內切酶的酶切位點
作為科研生產中最重要的基礎性資源—菌毒種,其收集、保藏及相關的研究工作在我國正處于整理、整合以及全方面逐步正規化階段.2003年7月23日,科技部在北京召開了“國家科技基礎條件平臺建設”部際聯席會和專家顧問組成立大會,正式啟動了國家科技基礎條件平臺建設工作.國家自然科技資源共享平臺建設作為其中的一個
4．2 SSR(Simple sequence repeat，簡單序列重復標記)由Moore等于1991年創立。SSR即微衛星DNA，是一類由幾個(多為1～5個)堿基組成的基序(motif)串聯重復而成的DNA串聯重復序列，其長度一般較短，廣泛分布于基因組的不同位置，如(cA)n、(AT)n、(GG
多態性（polymorphism）是指處于隨機婚配的群體中，同一基因位點可存在2種以上的基因型。在人群中，個體間基因的核苷酸序列存在著差異性稱為基因（DNA）的多態性(gene polymorphism)。這種多態性可以分為兩類，即DNA位點多態性(site polymorphism)和長度多態性
多態性（polymorphism）是指處于隨機婚配的群體中，同一基因位點可存在2種以上的基因型。在人群中，個體間基因的核苷酸序列存在著差異性稱為基因（DNA）的多態性(gene polymorphism)。這種多態性可以分為兩類，即DNA位點多態性(site polymorphism)和長度多態性
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為 RAPD(Random amplified polymorphic DNA ，隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的
[摘 要]本文以生物檢測技術為例，通過闡述其在食品檢測中的意義，介紹了生物檢測技術的主要內容，并分析了生物檢測技術在食品檢驗中的應用。 引言 食品安全及質量與人們生活健康息息相關，也是影響食品工業發展及對外貿易的重要因素。近些年發展的生物技術檢測方法因其特異的生物識別
作為科研生產中最重要的基礎性資源—菌毒種,其收集、保藏及相關的研究工作在我國正處于整理、整合以及全方面逐步正規化階段.2003年7月23日,科技部在北京召開了“國家科技基礎條件平臺建設”部際聯席會和專家顧問組成立大會,正式啟動了國家科技基礎條件平臺建設工作.國家自然科技資源共享平臺建設作為其中的一個
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(Random amplified polymorphic DNA ，隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的方式以及快
一. 實驗目的1. 掌握DNA指紋圖譜技術的概念、原理和基本操作過程2. 學習DNA的限制性酶切的基本技術3. 掌握瓊脂糖凝膠電泳的基本操作技術，學習利用瓊脂糖凝膠電泳測定DNA片段的長度，并能對實驗結果進行分析。二. 實驗原理1984年英國萊斯特大學的遺傳學家Jefferys及其合作者首次將分離的
DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(Random amplified polymorphic DNA ，隨機擴增的多態性DNA)。盡管RAPD技術誕生的時間很短, 但由于其獨特的檢測DNA多態性的方式以及快
一. 實驗目的1. 掌握DNA指紋圖譜技術的概念、原理和基本操作過程2. 學習DNA的限制性酶切的基本技術3. 掌握瓊脂糖凝膠電泳的基本操作技術，學習利用瓊脂糖凝膠電泳測定DNA片段的長度，并能對實驗結果進行分析。二. 實驗原理1984年英國萊斯特大學的遺傳學家Jefferys及其合作者首次將分離的
我們培養雙歧桿菌是在厭氧培養箱中進行培養,如果沒有的話,用厭氧瓶或厭氧缸都可以.培養基你用的是怎么改良的呢?我們是在MRS里面加入了L-半胱氨酸,不過這都是培養用的培養基,如果你需要區分菌落可以用X-GAL改良MRS可以起到鑒別做用,具體文獻名稱為<混合制劑中快速計數雙歧桿菌
（一）常用的分子生物學技術1.核酸雜交 常用的雜交技術有：斑點雜交、southern印跡、原位雜交、Northern印跡等。探針的種類有全染色體DNA探針、染色體克隆片段DNA探針、質粒DNA探針、rRNA基因探針、寡核苷酸探針等醫`學教育網搜集整理。2.核酸擴增技術 核酸擴增技術是分子生物學中最具