RNAi基因沉默方法
大約在十年前，2006年諾貝爾生理/醫學獎得主CraigMello和AndrewFire發現，他們能夠將短RNA 分子插入到線蟲中并沉默特定基因的表達。今天，研究人員也常常使用這種強大的RNA 干擾方法來研究哺乳動物系統中的特定基因功能。為了進行這種基因沉默實驗，研究人員通常需要依賴化學合成的RNA 分子，而這個合成過程是相當昂貴的。本月《冷泉港實驗手冊》（ColdSpringHarborProtocols）上的一篇免費文章就這個問題進行了討論。該文章描述了一種能產生沉默RNA （esiRNA ）以有效靶向哺乳動物細胞中的任何基因的很劃算的方法。這篇文章（http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/16/pdb.prot4824 ,）描述了如何在體外利用酶合成RNA 分子，該方法利用克隆的感興趣基因作為模版。接著，這些RNA 分子被隨機分割成短的片段，純化后用于RN......閱讀全文
著名華人學者聯手北大PNAS發表顛覆性發現
RNAi介導的抗病毒免疫普遍存在于動植物中，主要負責病毒特異性的防御。然而，加州大學和北京大學的科學家們發現，事情并沒有這么簡單。 加州大學Riverside分校的丁守偉教授和北京大學生命科學學院的李毅教授領導研究團隊，在擬南芥中誘導了抗病毒RNAi。他們發現，擬南芥中不僅出現了病毒siRNA
關于RNA干擾的基本信息介紹
RNA干擾（RNA interference，RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA（double-stranded RNA，dsRNA）誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。基因沉默，主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類：TGS是指由于DN
RNA干擾的概念
RNA干擾（RNA interference，RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA（double-stranded RNA，dsRNA）誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。基因沉默，主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類：TGS是指由于DNA修
RANi（RNA干擾）術語表
RNA干擾是最近發現的一種功能工具。當RNA導入一個細胞時，最終會引起細胞內互補mRNA的降解，從而導致基因功能活性的阻斷。PTGS轉錄后基因沉默（posttranscriptionalgenesilencing）；一種首先在植物中確定，然后發現在動物中也存在的現象。盡管PTGS最初被描述作一種病毒
上海生科院發明一種高效安全的新型RNAi載體
10月12日，國際學術期刊Nature Communications 在線發表了中國科學院上海生命科學研究院生物化學與細胞生物學研究所國家蛋白質科學中心（上海）吳立剛研究組的最新研究成果：Ribozyme-enhanced single-stranded Ago2-processed inter
RNAi
1995年，康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲（C. elegans）中的par-1基因時，發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達，而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA（sense RNA）以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果是二者都同樣
RNAi的作用機制及siRNA的合成方法
RNAi的作用機制及siRNA的合成方法RNA干擾(RNA interference，RNAi)是由雙鏈RNA(double strandedRNA， dsRNA)分子在mRNA水平關閉相應序列基因表達或使其沉默的過程。dsRNA可以抑制不同類型細胞的靶向基因表達，用特異性的抗體幾乎檢測不到靶向
吳立剛課題組Nature子刊發布RNAi新工具
來自中科院上海生命科學研究院的研究人員報告稱，他們設計出了一種替代性的小干擾RNA（small interfering RNA，siRNA）前體，將之命名為saiRNA (single-stranded, Argonaute 2 (Ago2)-processed interfering RNA)
RNAi干擾技術及應用進展研究（一）
RNAi是Napoli?CD等在試圖向紫色矮牽牛花轉導色素合成基因，用以增加其花色時發現的。結果出乎預料，轉基因的植株不僅沒有新基因的表達，反而自身的色素合成也減弱了，一些轉基因的花出現了全白色或部分白色。他們把這種導入的基因未表達和植物本身合成色素基因的失活現象命名為共抑制(cosuppressi
RNAi的研究進展（一）
RNA干擾(RNA interference ,RNAi) 現象是一種進化上保守的抵御轉基因或外來病毒侵犯的防御機制。將與靶基因的轉錄產物mRNA 存在同源互補序列的雙鏈RNA(double strand RNA ,dsRNA) 導入細胞后,能特異性地降解該mRNA ,從而產生相應的功能表型缺失
RNA實驗方案和應用（二）
miRNA?模擬物是化學合成的，雙鏈RNA分子（通常長度為18–24個核苷酸），通過轉染到細胞中，模擬成熟的內源性miRNA分子。miRNA抑制劑是單鏈（通常長度為21–25個核苷酸），經過修飾的RNA分子，通過轉染到細胞中，特異性的抑制miRNA的功能。模擬物和抑制劑包含一些化學修飾，以便提高活性
Nucleic－Acids－Research：CRISPR實現可逆的基因沉默
北卡羅萊納州立大學的研究人員利用細菌和古生菌自身的免疫系統，開發了可逆的基因沉默技術。這一成果發表在近期的Nucleic Acids Research雜志上，為相關領域的研究提供了一個強大的工具。 “這一技術不僅能夠加快科研發現，還能幫助我們更好的改造微生物，”文章的資深作者，北卡羅萊納州立大
分子遺傳學詞匯沉默等位基因
中文名稱：沉默等位基因英文名稱：silent allele定 義：通常不表達，但在腫瘤細胞中呈現轉錄活性的基因。應用學科：遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
PNAS驚人發現：基因沉默可持續25代
一百多年以來人們對遺傳的理解還局限于，生物將有助于自身生存和繁殖的基因傳遞給后代。直到近幾年科學家們才意識到遺傳事實上要復雜得多，環境等因素也能導致可世代傳遞的基因沉默。不過目前人們還不太了解這種表觀遺傳的具體機制。 馬里蘭大學UMD的遺傳學家Antony Jose領導團隊，首次闡明了父母將基
Nature：解開基因沉默的十年謎團
最近，瑞士Friedrich Miescher生物醫學研究所（FMI）的Marc Bühler及其研究團隊，闡明了小RNA介導的基因沉默的根本機制，從而解開了十多年來一直困擾著學術界的一個謎團。他們的研究結果，發表三月二十五日出版的《Nature》雜志，有很大的潛力應用于各個研究領域。 早在2
研究人員“沉默”重要的致癌基因
最近，來自北卡羅來納大學（UNC）醫學院和德克薩斯大學MD安德森癌癥中心的研究人員，開發出一種新方法，阻斷KRAS致癌基因——在人類癌癥中最常見的一個突變基因。這項研究，由UNC醫學副教授Chad Pecot帶領，為攻擊KRAS提供了另外一種途徑，這個突變被證明是藥物開發當中一個難懂而令人沮喪的
概述轉錄后基因沉默的基本內容
PTGS在多種生物中有共性，對PTGS的激活和與其相關的RNA降解調控過程有了初步的認識。也發現植物病毒在轉基因植物和非轉基因植物中都能和轉基因一樣誘發轉錄后基因沉默。令人吃驚的是，轉基因植物的共抑制現象（轉基因與同源的內源基因一起失活）、轉基因植物的病毒抗性和非轉基因植物對病毒正常自然侵染的抗
小干擾RNA轉錄后基因沉默的介紹
siRNA誘導的轉錄后基因沉默始于RNA誘導的沉默復合物（RISC）的組裝。該復合物通過切割編碼靶基因的mRNA分子來沉默某些基因表達。為了開始該過程，兩條siRNA鏈中的一條（引導鏈）將被裝載到RISC中，而另一條鏈即過客鏈被降解。某些Dicer酶可能負責將引導鏈加載到RISC中。然后，siR
簡述RNA剪接和基因沉默之間的聯系
為了識別在RNA干涉(RNAi)和微RNA介導的基因表達調控中所涉及的因素，Gary Ruvkun及其同事對86種真核生物進行了系統發生分析，所得到的候選物再用轉錄和蛋白組相互作用數據進行Bayesian分析，來估計它們參與小RNA調控的概率。所識別出的小RNA輔因子中大約一半是RNAi沉默所必
國家納米科學中心基因沉默研究獲進展
近日，中國科學院國家納米科學中心研究員丁寶全課題組在基于核酸自組裝的基因沉默系統用于腫瘤治療研究中取得進展，相關研究成果以Branched Antisense and siRNA Co-assembled Nanoplatform for Combined Gene Silencing and
《癌癥基因治療》－李明遠小組－siRNA基因治療新方法
來自四川大學華西醫學中心微生物學教研室，成都生物制品研究所（Institute of Chengdu Biological Products）的研究人員通過構建質粒pAd-hTR證明了hTR siRNA在HeLa細胞系中有效和特異的端粒酶的敲除，從而指出了這種siRNA表達重組腺病毒系統在癌癥基因治
讓基因沉默提高酵母中的蛋白質產量
通過使基因沉默，研究人員成功地顯著增加了酵母中的蛋白質產量。該方法可為制藥蛋白和工業酶生產工業產出更好的工程化菌株。 來自丹麥科技大學諾和諾德基金會生物可生化性中心、查爾默斯技術大學和KTH皇家理工學院的研究人員已經鑒定出9個基因靶點，通過組合沉默使工程酵母細胞中的蛋白質產量提高了2.2倍。G
RNAi的研究進展（二）
三，RNAi的應用前景RNAi 技術中的相關問題主要涉及以下幾點：(1) dsRNA 序列的選擇dsRNA 主要選自已知的cDNA 的開放閱讀框架(ORF) 中的基因區域。為防止mRNA 調控蛋白對RISC 與靶RNA 結合的干擾,應避免選擇包括:1) 起始密碼子下游或終止密碼的50～100 核
RNAi表達載體構建
近年來的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型, 稱為RNA干擾（RNA interference,RNAi）.siRNA（small interfering RNAs）就是這種短片斷雙鏈RNA分子,能夠
RNAi總結
RNA干涉（RNAi）是指雙鏈RNA分子使基因表達沉寂的現象，是在線蟲中發現的，在 1998年的一篇Nature論文中被公諸于眾。過去幾年中，科研工作者已明確轉錄后基因沉默現象普遍存在于動、植物中，在機體防御病毒入侵和轉座子沉默效應中起著重要作用。近年來的研究表明，將與mRNA對應的正義RNA和反義
RNAi在基因治療領域中的應用
RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領域發展極為迅速。在利用RNAi技術對HⅣ-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，
RNAi在基因治療領域中的應用
RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領域發展極為迅速。在利用RNAi技術對HⅣ-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，
RNAi在探索基因功能中的應用
人類基因組計劃的完成標志著后基因組時代的來臨。闡明人類基因組中功能基因表達產物的生物學作用對醫學發展有著深遠意義。在RNAi技術出現以前，基因敲除（gene knockout）是主要的反向遺傳學（reverse genetics）研究手段，但其技術難度較高、操作復雜、周期長。由于RNAi技術可以利用
RNAi在基因治療領域中的應用
RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領域發展極為迅速。在利用RNAi技術對HⅣ-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，
RNAi在探索基因功能中的應用
人類基因組計劃的完成標志著后基因組時代的來臨。闡明人類基因組中功能基因表達產物的生物學作用對醫學發展有著深遠意義。在RNAi技術出現以前，基因敲除（gene knockout）是主要的反向遺傳學（reverse genetics）研究手段，但其技術難度較高、操作復雜、周期長。由于RNAi技術可以利用