WIKI資訊
二、噬菌體載體作為細菌寄生物的噬菌體，大多數具有編碼多種蛋白質的基因，能利用宿主細胞的蛋白質合成體系，進行生長和增殖。構建的噬菌體載體，以λ噬菌體、M13和粘粒最為常用。㈠ λ噬菌體載體野生型λDNA是一種基因組為4.8 kb的線性雙鏈DNA，全部序列已知，共編碼50多個基因。其中約一半基因參與了噬菌體的生命周期活動，稱為必需基因；另一部分基因，當被外源基因取代后，并不影響噬菌體的生命功能。另外，在分子兩端各有12個堿基的互補單鏈，是天然的粘性末端，稱cos位點。野生型的λ噬菌體是一種中等大小的溫和噬菌體，即既能進入溶菌性生命周期又能進入溶源性生命周期。λ噬菌體感染細菌后，λDNA通過粘性末端而環化。既可溶菌性生長（裂解），即λDNA在宿主中多次復制并合成大量基因產物，裝配成噬菌體顆粒，最后裂解宿主菌；又可以溶源性生長，即λDNA整合到宿主染色體基因組DNA中，與之一起復制并遺傳給子代，但宿主細胞不被裂解。裂解途徑和溶源途徑......閱讀全文
基因改造（包括敲除和敲進）小鼠已經成為現代生命科學基礎研究和藥物研發領域不可或缺的實驗動物模型，在生命科學、人類醫藥和健康研究領域中發揮著重要的作用。今天呢，就給大家介紹最傳統最穩定的基因改造技術：基于胚胎干細胞的同源重組技術。Capecchi和Smithies早在在1989年根據同源重組（homo
基因敲除可以說是基因組 學、細胞分離培養以及轉基因技術的組合。那么基因敲除的原理是什么呢？ 基因敲除的方法有哪些呢？在此，做個小結，以供大家學習。一.概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子 生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用D
二、重組DNA分子轉入真核細胞1. 根癌農桿菌Ti質粒介導法農桿菌介導的Ti質粒載體轉化法是目前研究最多、機制最清楚、技術方法最成熟的基因轉化途徑。迄今為止約8096的轉基因植株都是利用農桿菌介導轉化系統獲得的。農桿菌是一類土壤習居菌，革蘭氏染色呈陰性，能感染雙子葉植物和裸子植物，而對絕大多數單子葉
同源重組技術原理：基因敲除鼠技術是上世紀80年代中后期基于DNA同源重組的原理發展起來的，Capecchi和Smithies在1987年根據同源重組（homologous recombination）的原理，首次實現了ES的外源基因的定點整合（targeted integration），這一技術稱為
CRISPR-Cas9，這一基因編輯領域“殺手锏”級的工具，其地位近日卻遭遇“挑戰”。 挑戰來自于一家基因編輯領域的后起之秀——Homology Medicines 公司。 Homology Medicines 的總部位于美國馬薩諸塞州貝德福德市，這家創業公司目前已經募集了1.27億美元。H
1．基因轉移方法 （1)特異正常基因的分離與克隆：應用重組DNA和分子克隆技術結合基因定位研究成果，已有不少基因并將會有更多人類基因被分離和克隆，這是基因治療的前提，在當代分子生物技術條件下，一般來說，只要有基因探針和準確的基因定位，任何基因都可被克隆。除此，現在既可人工
借助 CRISPR/Cas 系統介導的 HDR，實現優異等位基因替換和基因定點插入，進而創制農作物新種質，是農作物基因組編輯研究的熱點和重要課題之一。但目前這一技術的廣泛應用仍十分具有挑戰性，主要原因在于：1）CRISPR/Cas系統引起的基因組靶位點DNA序列雙鏈斷裂（Double-stran
科學通報，中國科學C輯:生命科學，這兩份期刊均是由中國科學院和國家自然科學基金委員會共同主辦的，我國學術期刊中的知名品牌，被國內外各主要檢索系統收錄，如國內的《中國科學論文與引文數據庫》(CSTPCD)、《中國科學引文數據庫》(CSCD)等;美國的SCI、CA、EI，英國的SA，日本的《科技文獻
20世紀80年代初，胚胎干細胞分離和體外培養的成功為基因敲除奠定了技術基礎。1985年，首次證實的哺乳動物細胞中同源重組(homology recombination, HR)的存在為基因敲除奠定了理論基礎[2]。為了編輯基因，傳統的靶向特定等位基因的同源重組技術被使用，但是，這個方法在當年來說，存
研究歷史 20世紀80年代初，胚胎干細胞分離和體外培養的成功為基因敲除奠定了技術基礎。1985年，首次證實的哺乳動物細胞中同源重組(homology recombination, HR)的存在為基因敲除奠定了理論基礎[2]。為了編輯基因，傳統的靶向特定等位基因的同源重組技術被使用，但是，這
哈嘍，小伙伴們！走過不要錯過，又到了科普知識的時間了，喜歡做分子實驗的小伙伴一定聽說過Southern blot這門檢測技術，但大家知道為什么叫Southern嗎？今天小編就為大家科普一下這門實驗技術。 Southern Blot是最早出現的blot（印跡）技術，它是檢測DNA的一種方法。
TALEN(Transcription activator-like effector nucleases)系統和CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated pro
初創公司是行業的新鮮血液。讀懂了新銳，也就讀懂了未來。綜合融資、合作伙伴、藥物研發管道、產品以及其它因素，我們結合BioSpace的資料，為諸位讀者整理出了2017年值得關注的20家新興生命科學公司。這些上榜的生命科學公司雖然都在2014年后才成立，但是對醫療健康領域已經產生了影響。可以預見未來
基因組編輯技術(Genome editing)是通過基因工程表達的序列特異的核酸酶對基因組進行切割，實現基因定點敲除、敲入等修飾，在基礎生物學領域的反向遺傳學研究、農業領域的種質改良和醫學領域的基因治療等方面有重要的應用價值。 來自浙江大學生科院的研究人員在 Golden-gate 克隆技術的
來自同濟大學生命科學與技術學院的研究人員利用年輕和年老組小鼠的皮膚細胞誘導成iPS細胞系，發現年老組iPS細胞的基因組穩定性下降，NHEJ修復能力下降，但HR修復能力不變。研究表明對于提高年老組iPS細胞基因組穩定性，重編程起始時聯合運用OSKM和Sirt6將是一個有效可行的方法。這一研究將為利
Nature Methods雜志是Nature出版社旗下的著名期刊之一，也是方法學領域的權威刊物，主要刊載具有創新性的技術進展，在去年之前，大陸學者在此刊物上發表的技術文章僅有3篇。近期來自北京大學生科院，加州大學洛杉磯分校的研究人員在這一著名期刊上發表了題為“TALEN-mediated
圖4. Southern blot鑒定同源重組事件[4]另外，在制備基因敲進和條件性基因敲除模式小鼠過程中，Southern blot檢測是非常重要的一步。在我們以往的工作中，其中一例Cre定點敲進課題（如圖5），Southern blot檢測結果顯示：小鼠1號，有明顯的隨機插入現象。圖5