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    免疫組化染色過程中存在的問題、原因分析及其對策2

    2、切片邊緣著色切片邊緣著色也是一種常見的現象,這種現象稱為邊緣效應。產生的原因:(1)組織邊緣與玻片粘貼不牢,邊緣組織松脫漂浮在液體,每次清洗不易將組織下面試劑洗盡所致。解決辦法:制備優質的膠片(APES或多聚賴氨酸),切出盡量薄的組織切片,不厚于4微米,組織的前期處理應規范,盡量避免選用壞死較多的組織。(2)切片上滴加的試劑未充分覆蓋組織,邊緣的試劑容易首先變干,濃度較中心組織高而致染色深。解決辦法:試劑要充分覆蓋組織,應超出組織邊緣 2mm。用DAKO筆畫圈時,為了避免油劑的影響,畫圈應距組織邊緣3-4mm。3、“陰陽臉”著色指組織一半著色一半無著色,形成交界清晰或不甚清晰的兩種染色結果。其成因是試劑僅覆蓋了部分組織而不是全部。如加試劑后未讓試劑流散開而集中在部分組織上。通常應該在加完試劑后,仔細看一遍,是否有的組織未被試劑完全覆蓋,如有這種情況,建議用牙簽而不是用吸頭或試劑瓶口將試劑引流開使之將組織全部覆蓋。另外,染......閱讀全文

    免疫組化實驗原理和步驟

      實驗原理:   抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性,免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來,以此作為抗原或半抗原,通過免疫動物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的,因此還必須借助于組織化學的方法將抗原

    免疫組化技術規范

       歐美國家相繼開展了免疫組化質量控制工作,建立了一套比較完善的質量控制方法和程序。中國病理工作者委員會(CCP)免疫組化研究中心借鑒國外的先進經驗并結合我國當前的實際情況開始探索一種適合我國免疫組化質控的方法,同時,發現和推廣標準化的染色程序,改善和提高免疫組化實驗的可靠性,使免疫組化技術更具標

    免疫組化技術規范(一)

    歐美國家相繼開展了免疫組化質量控制工作,建立了一套比較完善的質量控制方法和程序。中國病理工作者委員會(CCP)免疫組化研究中心借鑒國外的先進經驗并結合我國當前的實際情況開始探索一種適合我國免疫組化質控的方法,同時,發現和推廣標準化的染色程序,改善和提高免疫組化實驗的可靠性,使免疫組化技術更具標準化,

    免疫組化技術規范-1

    歐美國家相繼開展了免疫組化質量控制工作,建立了一套比較完善的質量控制方法和程序。中國病理工作者委員會(CCP)免疫組化研究中心借鑒國外的先進經驗并結合我國當前的實際情況開始探索一種適合我國免疫組化質控的方法,同時,發現和推廣標準化的染色程序,改善和提高免疫組化實驗的可靠性,使免疫組化技術更具標準化,

    免疫組化實驗原理和步驟(三)

    免疫組化技術的關鍵問題1.組織處理恰當的組織處理是做好免疫組化染色的先決條件,也是決定染色成敗的內部因素,在組織細胞材料準備過程中,不僅要求保持組織細胞形態完整,更要保持組織細胞的抗原性不受損戒彌漫,防止組織自溶。如果出現自溶壞死的組織,抗原已經丟失,即使用很靈敏的檢測抗體和高超的技術,也很難檢出所

    免疫組化染色過程中存在的問題、原因分析及其對策

    良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結果的基礎和前提。由于免疫組化染色過程中存在很多步驟或環節,每一個步驟或環節都可能影響到染色的最終結果,因此,要做好一張高質量的免疫組化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技術員和病理醫生密切配合、相互協調、共同努力才能保證做出合格的免疫組化切片。雖然免疫組化染色

    免疫組化實驗原理和步驟(五)

    (6)結果判斷免疫組化的結果判斷有兩種方法:一是對以檢測結果陽性細胞指數來定性(如核抗原的標記),判斷方法是以一個規野中陽性細胞數不總細胞癿百分比,再取10個相同視野算取平均指數。另一種方法以染色陽性強度和陽性檢出率相結合而定,一般陽性細胞數在0-25為陰性,25-50為十,50-75為十十,75以

    免疫組化染色過程中存在的問題、原因分析及其對策-1

    良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結果的基礎和前提。由于免疫組化染色過程中存在很多步驟或環節,每一個步驟或環節都可能影響到染色的最終結果,因此,要做好一張高質量的免疫組化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技術員和病理醫生密切配合、相互協調、共同努力才能保證做出合格的免疫組化切片。雖然免疫組化染色

    免疫組化染色過程中存在的問題、原因分析及對策

     良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結果的基礎和前提。由于免疫組化染色過程中存在很多步驟或環節,每一個步驟或環節都可能影響到染色的最終結果,因此,要做好一張高質量的免疫組化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技術員和病理醫生密切配合、相互協調、共同努力才能保證做出合格的免疫組化切片。雖然

    研究康復訓練對學習記憶和精神行為的影響

    目的:阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)又稱老年性癡呆,是一與年齡老化相關、以認知功能減退為主要臨床表現的神經系統退行性疾病。 我們選擇SAMP8小鼠為研究對象、SAMR1小鼠為正常對照,探討豐富康復訓練對SAMP8學習記憶能力和精神行為的影響及其機制,為應

    電子顯微鏡免疫細胞化學技術-1

    免疫細胞化學技術為在細胞水平上研究免疫反應做出了貢獻,但由于光學分辨率的限制,不可能從細胞超微結構水平觀察和研究免疫反應。因此,Singer于1959年首先提出用電子密度較高的物質鐵蛋白(ferritin)標記抗體的方法,為在細胞超微結構水平研究抗原抗體反應提供了可能。在此基礎上,相繼發展了雜交抗體

    電子顯微鏡免疫細胞化學技術-1

    免疫細胞化學技術為在細胞水平上研究免疫反應做出了貢獻,但由于光學分辨率的限制,不可能從細胞超微結構水平觀察和研究免疫反應。因此,Singer于1959年首先提出用電子密度較高的物質鐵蛋白(ferritin)標記抗體的方法,為在細胞超微結構水平研究抗原抗體反應提供了可能。在此基礎上,相繼發展了雜交抗體

    免疫組化染色過程中存在的問題、原因分析及其對策

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    免疫組化染色過程中存在的問題、原因分析及對策-1

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    熒光免疫染色和DAPI染色實驗步驟

    免疫染色實驗方法和步驟免疫染色(immunol staining)包括免疫熒光(immunol fluorescence)、免疫組化(immunol histochemistry)、免疫細胞化學(immunol cytochemistry)等,可以參考如下步驟進行操作。 1. 樣品準備(S

    免疫組化染色步驟

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    免疫組化染色應該注意的問題

    免疫組化染色方法已不是什么很難的問題,操作步驟簡單也易掌握,但要染好免疫組化,其中方法的技巧將是每位操作者在實際工作中不斷摸索和探討的事,但最基本的應從以下方面加以注意:(1) 去除內源酶及內源性生物素 一般我們進行免疫組化標記的都是一些生物體組織,其中自身含有一定量的內源酶和內源性生物素,而免疫組

    免疫組化實驗原理和步驟(四)

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    電子顯微鏡免疫細胞化學技術概述

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    解析免疫組化染色出現無色片的原因及解決方法

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    兔膀胱平滑肌細胞培養實驗

    酶分離法             實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層

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    兔膀胱平滑肌細胞培養實驗——酶分離法

    兔膀胱平滑肌細胞培養可以:(1)分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞;(2)進行細胞學鑒定研究;(3)用于細胞學其他研究。實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長

    兔膀胱平滑肌細胞培養

    實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長狀況,同時進行細胞爬片H-E染色和透射電鏡等形態學觀察分析,并應用免疫熒光染色平滑肌特有的α-肌動蛋白進行細胞學鑒

    免疫組化實驗過程中的注意事項

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    【一文掌握】免疫檢查點抑制劑治療的預測性生物標記物

      免疫檢查點抑制劑治療開創了治療新時代,隨之的療效預測評價的生物學標記物研究也將帶來更大的益處。  引言  免疫系統對腫瘤細胞監視和清除有重要作用。腫瘤細胞通過各種機制逃避免疫是腫瘤特征之一。Chen和Mellman描述的腫瘤免疫循環是抗腫瘤免疫增強反應策略的基石。包括的步驟有:腫瘤抗原的釋放、樹

    免疫細胞電鏡技術

    免疫細胞化學技術為在細胞水平上研究免疫反應做出了貢獻,但由于光學分辨率的限制,不可能從細胞超微結構水平觀察和研究免疫反應。因此,Singer于1959年首先提出用電子密度較高的物質鐵蛋白(ferritin)標記抗體的方法,為在細胞超微結構水平研究抗原 抗體反應提供了可能。在此基礎上,相繼發

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    二、細胞凋亡的細胞化學測定細胞凋亡的細胞化學測定包括細胞表面(細胞膜)的結構和通透性改變的測定和細胞核DNA改變的測定。根據應用的范圍,又可分為細胞群休和單個細胞測定兩種,以下僅介紹其中幾種較為常用的方法。碘化丙啶(propidium iodide,PI)檢測早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞

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