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FRET原理 熒光共振能量轉移（FRET）是一種物理現象，在生物醫學研究和藥物發現中已經越來越流行。FRET是能量從供體分子（donor）到受體分子（acceptor）的無熱量傳輸。供體分子是最初吸收能量的熒光基團，而受體是隨后轉移能量的熒光基團，這種共振相互作用發生在大于原子間的距離上，而沒有轉化為熱能并且沒有任何分子碰撞。能量轉移導致供體的熒光強度和激發態壽命的減少，以及受體的發射強度的增加。以發生FRET的方式相互作用的一對分子通常稱為供體/受體對。由于它對距離敏感，FRET被用于觀察分子間相互作用。 圖2. 從供體到受體分子的FRET過程圖。水平線代表每個分子的離散電子能級。能級被標記為單峰態（S）或三重態（T），其下標分別為0，1或......閱讀全文
熒光染料標記的肽和寡核苷酸是生化和細胞研究中的重要工具，目前熒光肽和寡核苷酸已廣泛用于所有主要類型的熒光成像中，包括熒光共振能量轉移（FRET），這些標記的生物分子被廣泛用于基于分子信標和其他技術的傳染病診斷。FRET肽和寡核苷酸也已通過熒光相關細胞分選（FA
多聚集鏈反應（polymerase chain reaction,PCR）技術發明至今已近20年了，在這期間技術得到了不斷的發展，近年來出現的實時熒光定量PCR（real-time quantitative PCR）技術實現了PCR從定性到定量的飛躍，它以其特異性強、靈敏度高、重復性好、
熒光和均相性分析理論上，熒光是最靈敏的檢測手段。由于許多分子間和分子內的變化會改變標記物的熒光發射。因此，很早就把它作為均相分析技術可能的新的手段。偏振，淬滅，時間關聯，熒光壽命改變以及熒光共振能量轉移（ FRET）已經被廣泛應用在對分子間作用的研究中 1-5 。然而，在這些應用中，一些技術條件嚴重
五、激光掃描共焦顯微鏡技術的應用定位、定量三維重組動態測量¨ 活細胞或組織內游離Ca2+濃度的測量¨ 活細胞內H+濃度（ pH值）的測量¨ 自由基的檢測¨ 藥物進入細胞的動態過程、定位分布及定量 應用：細胞膜電位的測量 熒光漂白恢復（FRA
一、基于分子雜交的分子診斷技術 上世紀60年代至80年代是分子雜交技術發展最為迅猛的20年，由于當時尚無法對樣本中靶基因進行人為擴增，人們只能通過已知基因序列的探針對靶序列進行捕獲檢測。其中液相和固相雜交基礎理論、探針固定包被技術與cDNA探針人工合成的出現，為基于分子雜交的體外診斷方法進行了
基于分子構象的分子診斷技術 (一)變性梯度凝膠電泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)與單鏈構象多態性(single strand conformation polymorphism,SSCP) 1970~1980年間,Fischer等
四、定量PCR(quantitative PCR，qPCR) 相比于其他分子診斷檢測技術，qPCR具有2項優勢，即核酸擴增和檢測在同一個封閉體系中通過熒光信號進行，杜絕了PCR后開蓋處理所帶來擴增產物的污染；同時通過動態監測熒光信號，可對低拷貝模板進行定量。正是由于上述技術優勢，qPCR已經成
Real Time PCR實時熒光定量PCR 其定量的基本原理是在 PCR 反應體系中加入非特異性的熒光染料（如： SYBR GREEN I ）或特異性的熒光探針（如： Taqman 探針），實時檢測熒光量的變化，獲得不同樣品達到一定的熒光信號（閾值）時所
所有的生物芯片技術都包含四個基本要點：芯片的制作、雜交或反應、測定或掃描、數據處理。生物芯片的技術核心是芯片的制備及反應信號的檢測。 1、芯片制備技術 目前制備芯片的方法基本上可分為兩大類：一類是原位合成(in situ Synthesis)；一類是合成后交聯(post-synthesis at
定量PCR 定義 以參照物為標準對PCR終產物進行分析或對PCR過程的進行監測，來評估樣本中靶基因的拷貝數，稱為定量PCR相對定量→絕對定量， 手工操作→自動化檢測， 靈敏度與特異性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 特定的待擴增基因片段 起始含量越大，則指
除了為克隆基因、預測編碼蛋白而需要研究基因的構成外，當前在基因組學上的努力也包括對基因組構成的研究，以分析具有結構和調控因子插入的基因。近源物種分析成為比較基因組學的主要內容，被認為是研究進化、基因功能和人類疾病的重要方法。 利用該方法分析微生物，特別是細菌的基因組，早在 1996 年就已開始
多聚集鏈反應（polymerasechainreaction,PCR）技術發明至今已近20年了，在這期間技術得到了不斷的發展，近年來出現的實時熒光定量PCR（real-timequantitativePCR）技術實現了PCR從定性到定量的飛躍，它以其特異性強、靈敏度高、重復性好、定量準確、速度快、全
劉向國 謝國明 (重慶醫科大 重慶市 400016)摘 要 熒光定量PCR儀技術是一種新的核酸定量技術，該技木在PCR儀反應系統中引人了熒光標記探針，具有可實時監測，高靈敏性，高特異性和高精確性的特點，極大地克服了原有PCR儀技術的不足，擴大了PCR儀的應用范圍。關鍵詞 定量pcr；熒光；基因Flu
除了為克隆基因、預測編碼蛋白而需要研究基因的構成外，當前在基因組學上的努力也包括對基因組構成的研究，以分析具有結構和調控因子插入的基因。近源物種分析成為比較基因組學的主要內容，被認為是研究進化、基因功能和人類疾病的重要方法。利用該方法分析微生物，特別是細菌的基因組，早在 1996 年就已開始識別出細
眾所周知，PCR（聚合酶鏈反應）技術自從1985年問世以來，經過十幾年的發展，已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段，是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法，核酸診斷是分子水平上的診斷技術，可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷，比如，核酸診斷能直接揭示病原體的存在，
實時熒光PCR檢測技術眾所周知，PCR（聚合酶鏈反應）技術自從1985年問世以來，經過十幾年的發展，已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段，是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法，核酸診斷是分子水平上的診斷技術，可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷，比如，核酸診斷能
聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction, PCR）自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測核酸分子的定性方法，而且也是一個能對核酸分子進行精確定量的有力工具[1]。隨著分子生物學技術研究的不斷進展，定量PCR技術取得了突飛猛進的發展，不僅建立了一系
最近需要做成骨細胞培養的實驗，師兄給個建議，說是可以做激光共聚焦顯微鏡 檢測。關于這個我還真不知道該如何下手設計這個實驗，網上搜集了一些資料，分享給大家，供參考。激光掃描共聚焦顯微鏡(laser scanning confocal microscope LSCM )是20世紀80年代發展起
文獻解讀：分層組裝的DNA線框納米結構，可用于癌癥高效成像和靶向治療疏水小分子化療藥物的系統分布和非靶向細胞毒性導致副作用和療效降低，阻礙了其在癌癥治療中的廣泛應用。由于包括有機聚合物、無機納米顆粒、脂質體等藥物載體的快速發展，許多靶向給藥策略已經建立起來，以克服這些缺點。然而，這些合成材料的生物相