熒光共振能量轉移FRET肽和寡核苷酸熒光標記的應用2
FRET原理 熒光共振能量轉移（FRET）是一種物理現象，在生物醫學研究和藥物發現中已經越來越流行。FRET是能量從供體分子（donor）到受體分子（acceptor）的無熱量傳輸。供體分子是最初吸收能量的熒光基團，而受體是隨后轉移能量的熒光基團，這種共振相互作用發生在大于原子間的距離上，而沒有轉化為熱能并且沒有任何分子碰撞。能量轉移導致供體的熒光強度和激發態壽命的減少，以及受體的發射強度的增加。以發生FRET的方式相互作用的一對分子通常稱為供體/受體對。由于它對距離敏感，FRET被用于觀察分子間相互作用。 圖2. 從供體到受體分子的FRET過程圖。水平線代表每個分子的離散電子能級。能級被標記為單峰態（S）或三重態（T），其下標分別為0，1或......閱讀全文
熒光分光光度計 測量寡核苷酸的熔解溫度
簡介在生物化學領域中，生物材料的熱學性能研究是材料分析的重要組成部分。而熔解溫度（TM）是生物材料中應用zui廣泛的熱學性能。生物材料由許多化學鍵組成，隨著溫度的升高，材料內能增加同時化學鍵斷裂。這種因化學鍵斷裂而導致生物材料結構改變的現象被稱作熱變性。此外，zui活躍時的變性溫度被稱為熔解溫度。熔
熒光PCR原理
1．熒光染料熒光基團通常各自擁有單一的光吸收峰。在光的刺激下，熒光基團吸收光的能量后通常以三種方式釋放出能量：1) 光能 許多熒光基團吸收光能后仍舊以光能形式釋放能量，并且發射光的峰值大于吸收峰。比如熒光染料Fam的光吸收峰為490nm，而發射峰為530nm。?2) 熱能 某些熒光基團吸收光能后，能
綠色熒光蛋白在信號轉導中的應用
新近研究發現，某些突變的 GFP 能夠發生熒光共振能量轉移 (fluorescence resonance energy transfer,FRET）。FRET 是一種從熒光分子的激發狀態到臨近基態接受分子之間量子力學能量轉移的現象。FRET 發生的前提條件是，熒光接受分子必須在熒光提供分子釋放
單克隆抗體的標記(酶標記、熒光素標記、同位素標記和...-2
單克隆抗體的標記(酶標記、熒光素標記、同位素標記和生物素標記)（3）移入透析袋中，在1000ml 0.01mol/L PH9.5碳酸鹽緩沖液中，4℃透析過夜，更換三次緩沖液，注意避光。?（4）吸取上述醛化好的HRP溶液3ml，加入5mg IgG的碳酸鹽緩沖液1ml，室溫輕攪2-3小時，避光；加入5m
免疫熒光標記的應用
半個多世紀以來，經過許多學者不斷改進和發展，使此項技術成為微生物學、免疫學、病理學及免疫組織化學中常用的一種免疫學實驗方法，在臨床上得到了廣泛的應用，使許多疑難腫瘤得到了明確診斷。
GFP 和熒光共振能量轉移技術測定蛋白質相互作用實驗 1
實驗材料 進行轉染的細胞株按第二階段所介紹的方法制備表達了蛋白質探針的細胞試劑、試劑盒 N-二羥乙基甘氨酸消化緩沖液NN-二甲基甲酰胺磷酸鈉磷酸鹽緩沖溶液TE木瓜蛋白酶Cy3 和 Cy5 OSu 單功能硫代吲哚花菁琥珀酰亞胺酯抗體SDS-聚丙烯酰胺凝膠明膠溶液聚-L-賴氨酸質粒 DNAGFP 融合載
一種針對活細胞膜界面膜蛋白動力學測量的高精度方法
細胞膜既是保護細胞的重要屏障，也是細胞與外界物質和信息交換的界面。空間總厚度約為10納米的細胞膜（含突出于細胞膜兩側的膜蛋白結構）可被視為準二維凝聚相體系。磷脂雙層膜及鑲嵌于膜上的眾多蛋白質，整體上具有“多重界面復雜流體”的行為和特征。膜本身的二維流動性和三維起伏漲落為膜蛋白動力學的精密測量造成
新型血糖傳感器！高靈敏性的同時具有極佳的抗干擾性
近幾十年，糖尿病的患病率逐年攀升，糖尿病在世界各地都正成為日益嚴重的公共健康問題。在預防、診斷和治療糖尿病方面，定期監測血糖水平一直被公認為疾病評估和管理的重要手段。在過去的幾年中，對于血糖檢測，大多數研究人員關注的是基于酶的電化學傳感器的開發，然而該方法還需要克服一些缺點：包括復雜的酶凈化過程
詳細解析實時熒光定量PCR探針法技術原理
目前主流的實時熒光定量PCR?（Quantitative Real-time PCR）方法分為染料法和探針法，染料法以SYBR Green法為代表，SYBR Green染料游離時熒光微弱，但但一旦與雙鏈DNA結合后，熒光大大增強，反應管中的熒光強度與反應管中雙鏈DNA的數量成正比例關系，因此熒光定量
如何使用Molecular Devices SpectraMax Paradigm多功能讀扳機進...
如何使用Molecular Devices SpectraMax Paradigm多功能讀扳機進行HTRF人腫瘤壞死因子實驗？本應用記錄了我們如何使用Spectramax Paradigm 多功能讀扳機執行穩定，免洗細胞因子實驗，并具有良好的Z因子。HTRF是由Cisbio試劑公司研發的多功能技術，
蘇州醫工所在糖尿病患者血糖檢測研究中取得進展
近幾十年，糖尿病的患病率逐年攀升，糖尿病在世界各地都正成為日益嚴重的公共健康問題。在預防、診斷和治療糖尿病方面，定期監測血糖水平一直被公認為疾病評估和管理的重要手段。在過去的幾年中，對于血糖檢測，大多數研究人員關注的是基于酶的電化學傳感器的開發，然而該方法還需要克服一些缺點：包括復雜的酶凈化過程
FRET成像在生物醫藥領域中的應用（一）
隨著顯微成像技術的發展，科研工作者對成像分辨率的要求越來越高，為此Leica在最新一代SP8共聚焦顯微鏡的基礎上相繼推出了超高分辨的STED和高分辨的Hyvolution；另一方面，簡單的圖像采集和分辨率的提升已經不能滿足很多科研工作者的需求，他們需要更高級更強大的成像功能與圖像處理功能。LAS
“分子診斷萬花筒”——新型雙向置換熒光探針
隨著化學合成核酸技術的不斷發展，利用核酸探針進行相關研究已成為當今生物和醫學領域常用分子生物學技術之一。核酸熒光探針則是對特定的核酸探針進行熒光基團標記，通過記錄熒光信號的變化來分析和檢測對應目標分子的一種核酸探針形式。作為最常用的信號轉導媒介，核酸熒光探針具備分析靈敏度高、檢測手段簡單和對生物分子
免疫熒光組織（細胞）化學技術——熒光素及其標記抗...-2
免疫熒光組織（細胞）化學技術——熒光素及其標記抗體的方法 2P3（2）Chadwick氏法?試劑和材料：抗體球蛋白溶液、異硫氰酸熒光素、3%重碳酸鈉水溶液、0.01 mol/L pH8.0磷酸鹽緩沖鹽水、1%硫柳汞、離心機及離心管、三角燒瓶(25 ml)、冰槽、無菌吸管及毛細滴管、燒杯(500 ml
分子間相互作用分析：熒光標記VS無標記
同無標記技術相比，利用熒光技術檢測分子間相互作用的實驗成本較低，例如熒光共振能量轉移和凝膠遷移實驗，無需昂貴的儀器便可完成結合分析。然而，基于熒光標記的檢測技術也存在自己的局限性，像凝膠遷移實驗就只能用來檢測蛋白和核酸間的相互作用。那么在具體的實驗中，研究人員該如何選擇合適的檢測技術呢？不要著急，下
qPCR的原理
這一期關注點在qPCR的原理上，我會將每一環節拆開掰碎展示給大家。 上期講過，要對樣本中的靶標進行定量，就要將靶標的數量和一定的信號反饋建立聯系。這一點比較容易理解，比如我們要對一種熒光物質定量，那么一定范圍內熒光信號的強度（吸光度）就與物質的數量成正比；對某種底物定量，那么在酶濃度一定且過
串色問題
當多標樣品用兩種以上的激光掃描時，串色問題在好幾個通道都會觀察到，圖 5（ c）和圖 5(f)顯示了鼠腦的一個厚切片，用 Alexa Fluor488 標記神經絲、用 Alexa Fluor 568 標記神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)，用 DRAQ5 染核。當樣品同時用 3 個激光掃描時（圖 5c
背照式 sCMOS 相機Prime 95B在探索大腦奧秘的應用
隨著科學家稱人類的大腦有著驚人的860億個神經元的家園，每個細胞織帶在每個可能的方向都有幾個聯接，形成了一個控制人類思想、意識、行為的超級巨大的蜂窩網絡。深入研究神經元，也已經成為科學家們探索大腦奧秘的重要手段。傳統了解神經元電信號活動的方法是離體或在體電生理記錄法，到后來發展使用鈣離子熒光成像技術
熒光標記基團的選擇及其在熒光定量PCR中的應用
PCR實驗室產品選擇指南 熒光 ?基團是吸收一定波長的光子后發射特定波長的光波，可以作為抗體等分子的標記物，實時熒光定量PCR中的Taqman探針常用熒光基團FAM標記熒光基團和TAMRA標記。 熒光基團 吸收特定波長的光子后熒光染料(通常稱為“熒光基團”或簡稱為“熒光素”)的化
冷泉港實驗方案關注CLIP
2012年11月，新一期的冷泉港實驗方案《Cold Spring Harbor Protocols》發布。本期主要聚焦了雙光子成像、淋巴管造影以及CLIP技術。 1. CLIP (Cross-Linking and Immunoprecipitation) Identification
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（一）
如何免除活細胞標記中的清洗（washout）步驟？SNAP-tag等標記方法為活細胞顯微成像帶來了革命性的變化，也因此被Nature雜志評為2004年最熱門的科研技術之一。但是傳統的SNAP-tag標記仍然有很大的缺陷。將帶有熒光探針的底物BG加入細胞后需要多次清洗細胞，才能將未結合的BG去除從而消
多功能酶標儀中熒光檢測技術介紹
熒光分析技術是一種強大的分析手段，廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中，是多功能酶標儀的重要應用。 1.概述 室溫下，大多數分子處于基態的zui低振動能級，處于基態的分子吸收能量(光能、化學能、電能或熱能)后躍遷至激發態，激發態不穩定，將很快衰變到基態，以光的形式放出能量
BMG酶標儀利用Invitrogen電壓感應探針技術簡單實現了離...
BMG酶標儀利用Invitrogen電壓感應探針技術簡單實現了離子通道變化檢測離子通道是藥物作用的一個重要目標，因為它在神經、心臟、內分泌和肌肉組織中都扮演關鍵性的角色。在藥物研究中，科學家需要一個高靈敏度的方法去檢測離子通道的變化。Invitrogen的電壓感應探針(Voltage Senso
概述熒光標記物種類及熒光免疫層析技術應用
熒光免疫層析分析方法具有靈敏度高、穩定性好、受自然熒光干擾低等優點，成為食品質量安全快速檢測分析研究的熱點。用于熒光免疫分析的標記物主要包括熒光素、量子點、上轉換納米粒子等。
實時定量PCR技術綜述（原理、熒光標記、TaqMan Probes和...2
下表列出了部分文獻報道的TaqMan Probes技術所使用的酶和其它相關參數。 ? Target P1 P2 Probe Enzyme 退火溫度 延伸溫度 HCV 19
用SpectraMax多功能微孔板讀板機進行cAMP HiRange檢測（一）
簡介在這篇應用文獻中，我們展示了如何用SpectraMax?i3、SpectraMax?Paradigm?和SpectraMax?M5e多功能微孔板讀板機進行可靠的、高通量的HTRF?檢測，并具有完美的Z’因子和高重復性的EC50值。HTRF?是CisbioBioassays公司開發的一項檢測生物分
LSCM的熒光標記
傳統應用于熒光標記的染料如異硫氰酸熒光素(fluorescin isothiocyanate，FITC，ex 490 nm/em520 nm)、四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC，ex 550 nm/em 620 nm)、羅丹明(Rhodamine，ex 560 nm/em 540 ~ 660 nm)
實時熒光定量PCR的研究進展及其應用
多聚集鏈反應（polymerasechainreaction,PCR）技術發明至今已近20年了，在這期間技術得到了不斷的發展，近年來出現的實時熒光定量PCR（real-timequantitativePCR）技術實現了PCR從定性到定量的飛躍，它以其特異性強、靈敏度高、重復性好、定量準確、速度快、全
實時熒光PCR-技術大簡析
實時熒光PCR（real-time PCR）因其全封閉擴增，簡單快速，重復性好，無擴增后處理以及易于自動化等優點，廣受大家歡迎。在分子診斷領域中，實時熒光PCR方法涉及的領域包括感染性疾病、腫瘤、遺傳病等多方面。那么實時熒光PCR技術是如誕生的呢？下面，由小編帶領大家一起了解大牛們是如何經過
實時熒光PCR技術
實時熒光PCR（real-time PCR）因其全封閉擴增，簡單快速，重復性好，無擴增后處理以及易于自動化等優點，廣受大家歡迎。在分子診斷領域中，實時熒光PCR方法涉及的領域包括感染性疾病、腫瘤、遺傳病等多方面。那么實時熒光PCR技術是如誕生的呢？下面，由小編帶領大家一起了解大牛們是如何經過