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    PCR實驗中的污染預防及處理(一)

    一.污染的預防 進行PCR 操作時,操作人員應該嚴格遵守一些操作規程,最大程度地降低可能出現的PCR 污染或杜絕污染的出現。 (一)劃分操作區:目前,普通PCR 尚不能做到單人單管,實現完全閉管操作,但無論是否能夠達到單人單管,均要求實驗操作在三個不同的區域內進行,PCR 的前處理和后處理要在不同的隔離區內進行: 1. 標本處理區,包括擴增摸板的制備; 2. PCR 擴增區,包括反應液的配制和PCR 擴增; 3. ......閱讀全文

    PCR技術 PCR技術的應用

    一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合

    PCR實驗污染與對策

    PCR反應的zui大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產生。一、污染原因1、標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍

    核酸檢測中涉及PCR污染的預防和處理原則

    一、適用范圍: 本原則適用于涉及PCR方法進行食品安全檢測的實驗室 本原則適用于PCR實驗室污染的預防和處理。 二、污染來源: (1)樣品間的交叉污染:樣品污染主要是由于樣品在運輸、儲存、放置過程中處置不當造成的污染。樣品核酸模板在提取過程中,由于操作不當也會導致樣品間的污染。 (2)試劑

    PCR簡介及污染的處理

    PCR技術簡介  前言 一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reacti

    PCR簡介及污染的處理 高速離心機

    何謂PCR,簡單的說,PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內 In Vitro 的大量合成。基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制.目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。 PCR的要素基本的PCR須具備1.要被復制的DNA模板 Template 2

    PCR污染及解決對策

     聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA片段的方法,在微生物感染的診斷中具有重要的價值。在PCR擴增過程中,擴增的DNA產量是呈指數上升的,經過n個循環的擴增,一個DNA分子的產量便達到2n個拷貝。PCR產物一般為10

    PCR檢測方法

    PCR反應的zui大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產生。污染原因一、標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染

    核酸檢測中涉及PCR污染的預防和處理原則

    一、適用范圍:本原則適用于涉及PCR方法進行食品安全檢測的實驗室本原則適用于PCR實驗室污染的預防和處理。二、污染來源:(1)樣品間的交叉污染:樣品污染主要是由于樣品在運輸、儲存、放置過程中處置不當造成的污染。樣品核酸模板在提取過程中,由于操作不當也會導致樣品間的污染。(2)試劑的污染:由于操作不當

    PCR污染與對策

    PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產生. 一、污染原因 1、標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣

    PCR技術綜述

    前言      一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Po

    PCR檢測方法(一)

    PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產生。污染原因一、標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致

    PCR檢測方法(二)

    3.實驗操作注意事項:盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進行擴增反應是謹慎認真,在樣品的收集、抽提和擴增的所有環節都應該注意:(1)戴一次性手套,若不小心濺上反應液,立即更換手套。(2)使用一次性吸頭,嚴禁與PCR產物分析室的吸頭混用,吸頭不

    PCR污染的處理(二)

    PCR污染及解決對策 PCR檢測微量感染因子時,一定要注意產物殘留污染的問題。 一. 污染的預防進行PCR操作時,操作人員應該嚴格遵守一些操作規程,最大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。(一)劃分操作區:目前,普通PCR尚不能做到單人單管,實現完全閉管操作

    『PCR實驗污染』的解決辦法!

    PCR污染是每個實驗室都多多少少會遇到的問題。原因在于,PCR是非常靈敏的一項檢測,100個拷貝之內的靶序列就足以產生陽性擴增,從而容易出現DNA污染導致的假陽性。那么,怎樣遠離PCR的污染呢?   圖 PCR污染之一瞥   首先,要辨別PCR污染的來源。設立陰陽性對照,有利于檢

    PCR核酸檢測實驗室建設標準

      能將微量的DNA大幅增加,是分子生物學研究和實驗的常規方法,PCR實驗室廣泛應用于生物醫學各個領域,例如:艾滋病檢測,乙型肝炎,禽疫病,癌基因的檢測和診斷,DNA指紋,個體識別,親子鑒定及法醫物證等等。   標準的PCR 實驗室分為四個區域,分別為:   n1.試劑配制區;   n2.樣品

    PCR核酸檢測實驗室建設標準

      能將微量的DNA大幅增加,是分子生物學研究和實驗的常規方法,PCR實驗室廣泛應用于生物醫學各個領域,例如:艾滋病檢測,乙型肝炎,禽疫病,癌基因的檢測和診斷,DNA指紋,個體識別,親子鑒定及法醫物證等等。   標準的PCR 實驗室分為四個區域,分別為:   n1.試劑配制區;   n2.樣品

    臨床基因擴增檢驗實驗室工作規范(三)

    (七)污染 在實際工作中,常見有以下幾種污染類型:擴增片段的污染(產物污染);天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標本間交叉污染(如氣溶膠從一個陽性標本擴散到原本陰性的標本)。臨床基因擴增檢驗實驗室中污染的最主要來源是擴增產物的污染。由于一旦發生污染后,再圍繞實驗室來尋找污染源不僅

    臨床基因擴增檢驗實驗室工作規范(三)

    (七)污染 在實際工作中,常見有以下幾種污染類型:擴增片段的污染(產物污染);天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標本間交叉污染(如氣溶膠從一個陽性標本擴散到原本陰性的標本)。臨床基因擴增檢驗實驗室中污染的最主要來源是擴增產物的污染。由于一旦發生污染后,再圍繞實驗室來尋找污染源不僅

    如何建設標準的PCR 實驗室

      PCR實驗室廣泛應用于生物醫學各個領域。   例如:艾滋病檢測,乙型肝炎,禽疫病,癌基因的檢測和診斷,DNA指紋,個體識別,親子鑒定及法醫物證等等。   標準的PCR 實驗室分為四個區域,分別為:   n1.試劑配制區;   n2.樣品處理區;   n3.核酸擴增區;   n4.產物

    PCR核酸檢測實驗室建設標準

    能將微量的DNA大幅增加,是分子生物學研究和實驗的常規方法,PCR實驗室廣泛應用于生物醫學各個領域,例如:艾滋病檢測,乙型肝炎,禽疫病,癌基因的檢測和診斷,DNA指紋,個體識別,親子鑒定及法醫物證等等。標準的PCR 實驗室分為四個區域,分別為:n1.試劑配制區;n2.樣品處理區;n3.核酸擴增區;n

    PCR實驗室建設你了解多少?

    臨床基因擴增實驗又稱 PCR實驗,是專門用來檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內所含的基因進行擴增的方法,測出一些病毒含量不高的感染者體內是否含有特定的病毒。由于該檢測方法可以測出普通檢驗難以檢測出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求

    Real-time PCR實驗注意事項

    實驗中的一些好習慣加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時間長了濃度不均移液槍用完之后要歸到最大計量的位置,防止久而久之彈簧失去彈性一定要記著關水浴箱,切記切記多和大家討論,同時多關注別人討論的經驗,這幾乎是最快提高的捷徑了所有的試劑都自己配,出了問題才好找原因防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器

    PCR實驗室分區

    目前PCR實驗室建設要求至少應該分為三個區域,即試劑準備區、核酸制備區和PCR擴增區,如果要對擴增產物進行開放性鑒定,如雜交、電泳等操作,原則需要增加第四個區。實驗室分區的主要目的是避免純化核酸和擴增產物逆向污染前一個區域,但多年的經驗表明,無論是三區還是四區的設置,似乎都沒有完全杜絕實驗室污染的發

    Real-time PCR實驗注意事項

    Real-time PCR實驗注意事項實驗中的一些好習慣加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時間長了濃度不均移液槍用完之后要歸到zui大計量的位置,防止久而久之彈簧失去彈性一定要記著關水浴箱,切記切記多和大家討論,同時多關注別人討論的經驗,這幾乎是zui快提高的捷徑了所有的試劑都自己配,出了問題才好

    PCR污染與對策

    PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產生.污染原因  (一)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污

    PCR實驗室的設計

    1 PCR實驗室平面布局 PCR擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區域:試劑貯存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。為避免交叉污染,進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。

    細胞培養污染的途徑、危害及預防措施(二)

    3 生物性污染的來源、危害及預防 外界的微生物如昆蟲、節肢動物、原蟲、霉菌、病毒、細菌、無細胞壁的微生物(通常指支原體)和其它類型的細胞都可能侵入培養環境引起污染。只要在一個開放的環境中進行培養,都難以避免發生污染。發生污染的可能性取決于操作方法、培養室的無菌環境以及實驗室的規章制度。生物性污染對細

    PCR實驗室設計要求

    一、PCR實驗室平面布局PCR實驗室布局圖PCR實驗室原則上分為四個單獨的工作區域:試劑貯存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配置和擴增區、擴增產物分析區,為了避免交叉污染,進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區,

    PCR實驗中的污染預防及處理

      一.污染的預防        進行PCR 操作時,操作人員應該嚴格遵守一些操作規程,最大程度地降低可能出現的PCR 污染或杜絕污染的出現。        (一)劃分操

    支原體污染對細胞培養的影響與解決方法

    很多科研小伙伴在細胞培養的過程中,總是出現各種各樣的情況和問題,比如,細胞漏液、不貼壁、細胞有黑點、支原體污染、不增殖、細胞老化變形、復蘇存活率低等等,這些問題對于參與細胞實驗的小伙伴來說,是急需解決的大問題,好不容易買來的細胞,剛剛進行培養傳代,就出現了以上的各種問題,這樣的情況通常都會令小伙伴們

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