酶活性單位
1．酶活性單位 20世紀50年代以前通常用慣用單位，即用先報道某種酶測定方法的臨床酶學家的姓氏來命名其單位。例如，測定AMY的Somogyi單位，轉氨酶的賴氏單位（Reitman-Frankel）等。不僅酶不同，單位不同，即使是同一種酶也因方法不同而可有數種活性單位，參考值差別也很大，給臨床實際工作帶來很大不便。 1963年國際生化協會酶學委員會推薦采用國際單位（IU）來統一表示酶活性的大小。1976年對酶活性單位定義為：在特定的條件下，1 min能轉化1mmol底物的酶量，即1IU=1mmol.min。目前國內外大多數臨床實驗室常省略國際二字，即將IU簡寫為U。 1979年國際生物化學協會為了使酶活性單位與國際單位制（SI）的反應速率相一致，推薦用Katal單位（也稱催量，Kat）。即在規定條件下，每秒（s）鐘催化轉化1 mol底物的酶量，即1katal=1mol.s。我國法定計量單位制中，酶催化活性單位為......閱讀全文
關于溶酶體酶活性的測定方法介紹
溶酶體貯積癥的診斷是通過酶活性測定或測代謝產物進行的。過去測酶活性的方法與步驟比較復雜，底物用量較大。1980年后荷蘭 Erasmus大學遺傳代謝病試驗室應用微量酶活性測定法獲得成功。它使用了新的人工合成底物，提高了實驗的靈敏度及準確性, 簡化了實驗步驟。1990年中國醫學科學院基礎醫學研究所醫
酶活性測定樣品的貯存與處理
如果在測定活性之前所貯的樣品酶活性有了降低，無論所用的儀器如何先進，也不能獲得準確的結果。在適當的條件下酶會失活，因而必須強調在收集樣品之后應盡可能快速測試酶活性，最好當天進行測定。關于酶樣品的貯存與處理應注意以下幾點： 1.酶活力測定最常用的樣品是血清或血漿。制備血漿所用的抗凝劑可抑制某些酶的活
尿海藻糖酶的酶活性的測定
1. 原理利用海藻糖酶水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，然后測定生成的葡萄糖濃度作為海藻糖酶的活性濃度。2. 步驟將尿液標本0.5mL通過5mmol/LpH為6.2的磷酸鹽緩沖液平衡的SephadexG-25柱，以除去內源性葡萄糖。收集含蛋白的部分，將體積調整到1.5ml。將洗脫下來的標本0.9mI
硝酸還原酶活性的測定實驗
實驗方法原理?硝酸還原酶是植物氮素代謝作用中的關鍵酶，與作物吸收和利用硝態氮的能力相關。它催化NO3－還原為NO2－的反應：NO3－+NADH+H+→NO2－+NAD++H2O反應產生的NO2－可從組織內滲透到外界溶液中，定時測定一定的反應溶液中NO2－含量的變化情況則可了解此酶的活性大小。NO2－
鈣調蛋白參與調控靶酶活性
Ca2+-CaM復合體具有結合并調控下游靶酶的功能。現已確定的靶酶有磷酸化酶激酶、鳥苷酸環化酶、磷脂酶A2、肌球蛋白輕鏈激酶、磷酸二酯酶、鈣調蛋白激酶（CaMK）等。Ca2+-CaM復合體形成后，下游的靶酶活力會有不同程度的增加。在動物中，鈣調蛋白在腎上腺和腦中 cAMP的合成與降解的過程中扮演
酶活性測定樣品的貯存及處理
1.酶活力測定最常用的樣品是血清或血漿。制備血漿所用的抗凝劑可抑制某些酶的活性，如EDTA能抑制ALP，草酸鹽抑制LDH，肝素對CK及某些其他酶有輕微的抑制作用，故一般樣品以血清為佳 2.多數血清酶以較高濃度存在于紅細胞、白細胞或血小板中。因此分離血清時應注意避免溶血。 3.光照對CK活性有
酶活性測定條件的選擇和限定
僅在一定條件下酶反應速度v才和酶量成正比例。一定條件是什么？這些條件之間有無主次關系？如何選擇合適的測定條件？這些都是實驗室工作者在設計或選擇測酶活性濃度方法時必須面對的問題。 首先可從理論上探討在什么特定情況下的反應速度才可能與酶量成正比例。酶的整個反應過程可簡化如下： 式中Kp可看成為ES的
限制酶在各種NEBuffer中的活性
限制酶在各種NEBuffer 中的活性 (NEBuffer Activity Chart for Restriction Enzymes) 對應每一種限制性內切酶，New England Biolabs 均提供彩色蓋子的10X NEBuffer，以保
脂肪酶的活性測定方法介紹
方法：⒈粗酶液的制備用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g， 用蒸餾水溶解并定容至100 mL， 配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉實驗設計本實驗以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度、反應時間為因素，通過酸價的測定選定其水解的最
酶的活性調節與數量如何調節？
酶的直接生物功能是催化反應。但對于生物體來說，酶的作用并不是簡單的加速反應，而是協調控制每一個代謝反應的速度，從而決定各個代謝途徑的相對流量，最終使整體代謝狀況與生理需求相一致。例如，在運動時，骨骼肌中糖原分解相關的酶活性升高，糖原合成相關的酶活性降低，總體表現為糖原分解；運動后休息恢復時則相反，總
固定化α淀粉酶及活性測定
一、實驗目的和原理目的：學會交聯法制備固定化酶的操作技術內容：制備固定化酶的方法很多，利用雙功能試劑或多功能試劑在酶分子間，酶分子與惰性蛋白間，或酶分子與載體間進行交聯反應，以共價鍵制備固定化酶的方法稱為交聯法，本實驗即采用這種方法。交聯劑為戊二醛，載體為甲殼素。 二、實驗器材 1．恒
逆轉錄酶的活性介紹
①RNA指導的DNA聚合酶活性；以RNA為模板，催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物，多為色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3′→5′外切酶活性，因此沒有校正功能，所以由反轉錄酶催化合成的DNA出錯率比較高 。②RNase H活性；
pH影響酶活性的主要原因
過酸、過堿影響了酶分子的結構，甚至使酶變性失活。應該注意的是，酶在試管中的最適pH與它在正常細胞中的生理pH值并不一定完全相同。這是因為一個細胞內可能會有幾百種酶，不同的酶對此細胞內的生理pH的敏感性不同；也就是說此pH對一些酶是最適pH，而對另一些酶則不是，不同的酶表現出不同的活性。這種不同對于控
端粒酶活性檢測操作必知
近幾年來端粒酶由于與長壽、癌癥等的研究相關聯而備受關注，而端粒酶活性檢測具體方法又有那些呢?小編整理了端粒酶活性檢測的原理、基本操作技巧 、結果判斷、擴增片段檢測等方面內容，以饗讀者。端粒酶 (Telomerase)是由RNA和蛋白質組成的一種核糖核蛋白酶。人端粒酶RNA組分(hTR)于1995年被
酶的活性及濃度的調節方式
調節酶的濃度酶濃度的調節主要有兩種方式，一種是誘導或抑制劑的合成;一種是調節酶的降解。調節酶的活性激素通過與細胞膜或細胞內受體相結合而引起一系列生物學效應，以此來調節酶活性。反饋抑制調節許多小分子物質的合成是由一連串的反應組成的，催化此物質生成的第一步的酶，往往被它們的終端產物抑制。這種抑制叫反饋抑
逆轉錄酶的活性特點
①DNA聚合酶活性；以RNA為模板，催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物，多為賴氨酸的tRNA，在引物tRNA 3'－末端以5'→3'方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3'→5'外切酶活性，因此沒有校正功能，所以由反轉錄酶催化合成的DNA出錯率比
吲哚乙酸氧化酶活性的測定
原理 ? 吲哚乙酸在吲哚乙酸氧化酶的作用下，被氧化破壞失去活性。植物體內吲哚乙酸氧化酶活力的大小，對調節體內吲哚乙酸的水平，起著重要的作用，而影響植物的生長。酶活力的大小可以其破壞吲哚乙酸的速度表示之。吲哚乙酸的含量可用比色法測定。 ? 儀器藥品 ? 721型分光光度
酶的提取、分離、純化及其活性測定
? 原理 ? 酶是植物體內具有催化作用的蛋白質，植物體內的生化反應，一般都是在酶的作用下進行的，沒有酶的催化反應，植物的生命也就停止了，因此對酶的研究是闡明生命現象本質中十分重要的部分。 為要研究酶首先要將酶從組織中提取出來，加以分離、純化，不同的研究目的對酶制劑的純度要求也
硝酸還原酶活性的測定實驗
實驗方法原理：硝酸還原酶是植物氮素代謝作用中的關鍵酶，與作物吸收和利用硝態氮的能力相關。它催化NO3－還原為NO2－的反應：NO3－+NADH+H+→NO2－+NAD++H2O反應產生的NO2－可從組織內滲透到外界溶液中，定時測定一定的反應溶液中NO2－含量的變化情況則可了解此酶的活性大小。NO2－
土壤纖維素酶活性測定
一、原理? 纖維素是植物殘體進入土壤的碳水化合物的重要組分之一。在纖維素酶作用下，它的初水解產物是纖維二糖，在纖二糖酶作用下，纖維二糖分解成葡萄糖。所以，纖維素酶是碳素循環中的一個重要的酶。纖維素酶解所生成的還原糖與?3,5-?二硝基水楊酸反應而生成橙色的3-氨基-5-硝基水楊酸。顏色深度與還
酶活性測定的常見方法總結
（1）定時法：（兩點法）通過測定酶反應開始后某一時間段內（t1到t2）產物或底物濃度的總變化量來求取酶反應初速度的方法。其中t1往往取反應開始的時間。酶與底物在一定溫度下作用一段固定的時間，通過加入強酸、強堿、蛋白醫學教育網整理沉淀劑等，使反應完全停止（也叫中止反應法）。加入試劑進入化學反應呈色測出
聚合酶35外切酶活性──校對作用的介紹
這種酶活性的主要功能是從3'→5'方向識別和切除不配對的DNA生長鏈末端的核苷酸。當反應體系中沒有反應底物dNTP時，由于沒有聚合作用而出現暫時的游離現象，從而被3'→5'外切酶活性所降解。如果提高反應體系的溫度可以促進這種作用，這表明溫度升高使DNA生長鏈3&#
雙酶切反應酶活性分析及雙酶切建議緩沖液
同步雙酶切是一種省時省力的常用方法。選擇能讓兩種酶同時作用的最佳緩沖液是非常重要的一步。NEB每一種酶都隨酶提供相應的最佳 NEBuffer，以保證100%的酶活性。NEBuffer的組成及內切酶在不同緩沖液中的活性見《內切酶在不同緩沖液里的活性表》及每支酶的說明書。能在最大程度上保證兩種酶活性
超氧化物歧化酶同工酶活性測定
實驗材料 人血試劑、試劑盒 PBS聚乙二醇NaN3氯化血紅素雙蒸水ABEI葡萄糖凝膠G-25明膠氫氧化鈉儀器、耗材 透析袋離心機離心管滴定光結合管冰箱發光測試儀培養箱
酶的活性部位在酶的催化機制中的作用
酶的活性部位在酶的催化機制中的作用:由于酶的活性部位與底物結合后，能使底物作用濃度相對增加，易于反應(稱為鄰近效應，Proximity);或使底物功能基團受酶影響，作定向轉移 (Orientation)，更有利于催化作用發生;或活性部位內的催化基團提供質子或吸收質子，呈現酸堿催化劑的作用;或形成一個
抗性酶活性測定需要的緩沖液
放在CO2箱中培養吧。維持PH最好了。
分子“GPS”可定位酶的活性中心
在日常生活中，全球定位系統（GPS）能可靠定位一輛車在行駛途中的即時位置。最近，德國波恩大學科學家開發出一種分子“GPS”，用這種“分子定位系統”能可靠確定金屬離子在酶里面的位置，這些離子在新陳代謝和生物產品合成中都扮演著重要角色。相關論文發表在最近的《應用化學》雜志上。 如果沒有酶，地球上
溶血、黃疸對酶活性測定的影響實驗
實驗方法原理L－丙氨酸＋α－酮戊二酸ALT丙酮酸＋L－谷氨酸丙酮酸＋NADH＋H＋→L－乳酸＋NAD+實驗材料黃疸血清試劑、試劑盒ALT／GPT試劑儀器、耗材半自動生化分析儀試管加樣器實驗步驟1、稀釋試劑．2、開機預溫達37度．3、選取測定程序．4、測試：5、結果分析：
溶血、黃疸對酶活性測定的影響實驗
實驗方法原理 L－丙氨酸＋α－酮戊二酸ALT丙酮酸＋L－谷氨酸丙酮酸＋NADH＋H＋→L－乳酸＋NAD+實驗材料 黃疸血清試劑、試劑盒 ALT／GPT試劑儀器、耗材 半自動生化分析儀試管 加樣器實驗步驟 1、稀釋試劑．2、開機預溫達37度．3、選取測定程序．4、測試：5、結果分析：
苯胺4羥化酶活性的測定
實驗材料 肝微粒體蛋白試劑、試劑盒 鹽酸苯胺苯胺蒸餾水三氯醋酸酚碳酸鈉4-氨基酚TCA儀器、耗材 試管試管架水浴鍋培養箱制冰機冰盒燒杯紫外風光光度計