RNAi技術
DNA芯片檢測siRNA專一性 長片斷的雙鏈RNA (dsRNA) 導入例如植物，真菌，果蠅，線蟲等生物的細胞中會引發同源mRNA的降解——這就是所謂的RNA interference (RNAi)。RNAi分兩個步驟，首先是長片斷雙鏈dsRNAs被核酶Dicer切割成21—25個堿基的small interfering RNAs (siRNAs)。這些siRNA隨后和相關蛋白組合成為RNA-induced silencing complex (RISC) ，這個復合物以同源mRNA為靶摧毀mRNA。兩年前Elbashir and Tuschl用siRNA在哺乳動物細胞中成功引發特異基因的沉默，從此siRNA廣泛應用于這個領域。 siRNA介導的基因沉默通常要求高度的序列專一。Tuschl......閱讀全文
RNAi技術
?DNA芯片檢測siRNA專一性? 長片斷的雙鏈RNA ?(dsRNA)?導入例如植物，真菌，果蠅，線蟲等生物的細胞中會引發同源mRNA的降解——這就是所謂的RNA interference ?(RNAi)。RNAi分兩個步驟，首先是長片斷雙鏈dsRNAs被核酶Dicer切割成21—25個堿基的sm
RNAi技術的應用
5 RNAi技術的應用5.1 功能基因組和遺傳學應用隨著各種模式生物和人類基因組測序的完成，基因功能的研究遠遠落后于大量序列所提供的信息，研究和發現基因功能成為越來越緊迫的任務。長期以來，破壞基因結構或抑制基因表達是研究基因功能的重要方法，如常用的基因敲除技術( gene knock out) 。基
RNAi技術的應用特點
由于使用RNAi技術可以特異性剔除或關閉特定基因的表達，（長度超過三十的dsRNA會引起干擾素毒性）所以該技術已被廣泛用于探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的治療領域。
使用RNAi技術治療腫瘤病
腫瘤病的治療腫瘤是多個基因相互作用的基因網絡調控的結果，傳統技術誘發的單一癌基因的阻斷不可能完全抑制或逆轉腫瘤的生長，而RNAi可以利用同一基因家族的多個基因具有一段同源性很高的保守序列這一特性，設計針對這一區段序列的dsRNA分子，只注射一種dsRNA即可以產生多個基因同時剔除的表現，也可以同時注
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post transcri
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post transcri
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post tran
RNA干擾技術(RNA－interference，RNAi)
1995年，康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲（C. elegans）中的par-1基因時，發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達，而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA（sense RNA）以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果
核糖核酸干擾技術(RNAi技術)介紹
轉錄后基因沉默（PTGS， post- transcriptional gene silencing）-最初被認為僅限于矮牽牛花和其它一些植物中的奇異現象，是目前分子生物學研究中一個最熱門的話題。過去幾年中，科研工作者已明確轉錄后基因沉默現象普遍存在于動、植物中，在機體防御病毒入侵和轉座子沉默效應中
RNAi技術專有名詞(2)
21.Homologous Chromosome：同源染色體一對染色體，分別來自父本和母本，染色體上有著相同的線性基因序列。 22.Recombinant Clone：重組克隆將不同來源的DNA片段合成在一個DNA分子中，這種技術稱為重組，得到的分子為重組克隆。 23.Ribonucleic
RNAi技術專有名詞(1)
1.RNAi：（RNA interference）RNA干擾 一些小的雙鏈RNA可以高效、特異的阻斷體內特定基因表達，促使mRNA降解，誘使細胞表現出特定基因缺失的表型，稱為RNA干擾（RNA interference，RNAi，也譯作RNA干預或者干涉）。它也是體內抵御外在感染的一種重要保護機
反義技術——RNA干擾（RNA－interference，RNAi）
最近由于RNA干擾（RNA interference，RNAi）的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象最早是在秀麗線蟲中發現的（1），是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于最近兩年在RNAi領域取得的進步，已經有許多這方面的綜述發表（2-4）。RNA干擾是由長的雙鏈 RNA
RNAi
1995年，康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲（C. elegans）中的par-1基因時，發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達，而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA（sense RNA）以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果是二者都同樣
哺乳動物RNAi技術－Mammalian－RNA－Interference
Mammalian RNA InterferenceThomas TuschlLaboratory for RNA Molecular BiologyThe Rockefeller University, New York?Excerpted from?RNAi: A Guide To Gene S
RNAi干擾技術及應用進展研究（二）
1.2?RNAi的作用特點?(1)“共抑制”性。RNAi是雙鏈RNA介導的轉錄后基因沉默機制，它的啟動子相當活躍，外源基因可以轉錄，但不能正常積累mRNA；RNAi作用不僅使外源基因在轉錄后水平上失活，同時誘導與其同源的內源基因沉默。 (2) 高效性。試驗證明雙鏈RNA干擾mRNA?翻譯的效率比
RNAi干擾技術及應用進展研究（四）
3.5?轉基因研究在動植物的轉基因試驗中，?經常發生基因沉默。因此，?對轉基因沉默機制的探索可以為在轉基因研究中避免基因沉默提供對策。在轉基因植物研究中避免基因沉默可提高試驗成功率，且節省時間，而在大型動物轉基因研究中避免基因沉默可節約成本，提高產率。?3.6?干細胞研究在干細胞研究方面，在dsRN
RNAi干擾技術及應用進展研究（一）
RNAi是Napoli?CD等在試圖向紫色矮牽牛花轉導色素合成基因，用以增加其花色時發現的。結果出乎預料，轉基因的植株不僅沒有新基因的表達，反而自身的色素合成也減弱了，一些轉基因的花出現了全白色或部分白色。他們把這種導入的基因未表達和植物本身合成色素基因的失活現象命名為共抑制(cosuppressi
RNAi干擾技術及應用進展研究（三）
3.2?基因治療及藥物篩選探索由于RNAi是針對轉錄后階段的基因沉默，相對于傳統基因治療對基因水平上的敲除，整個流程設計更簡便，且作用迅速，效果明顯，為基因治療開辟了新的途徑。 其總體思路是通過加強關鍵基因的RNAi機制，控制疾病中出現異常的蛋白合成進程或外源致病核酸的復制及表達。尤其針對引起一
RNAi技術突破：siRNA體內傳遞機制
小RNAs如何進入哺乳動物細胞？ 一切開始于花：上個世紀90年代挪威的研究人員發現在矮牽牛（petunias）中有一種特殊的基因的額外拷貝可以抑制其活性，而不是如之前假想的增強其活性。幾年之后這種基因研究發現其機制基于細胞中mRNA的降解，最終在90年代末期諾貝爾獲得者Andrew Fire和C
RNAi－protocol
?siRNA protocolsOur current strategy with siRNA is to synthesis relatively small amounts enzymatically and use these to test for efficiency by western
RNAi總結
RNA干涉（RNAi）是指雙鏈RNA分子使基因表達沉寂的現象，是在線蟲中發現的，在 1998年的一篇Nature論文中被公諸于眾。過去幾年中，科研工作者已明確轉錄后基因沉默現象普遍存在于動、植物中，在機體防御病毒入侵和轉座子沉默效應中起著重要作用。近年來的研究表明，將與mRNA對應的正義RNA和反義
哺乳動物RNAi技術全面實驗方法
WHENVIRUSESINFECTEUKARYOTICCELLSdomly integrate into host genomes, double-stranded RNA (dsRNA) is frequently produced from the invading genes, either
最新RNAi技術可媲美轉基因小鼠模型
基因編輯技術一直都是生命科學的熱門研究領域，近來編輯領域出現了可與轉基因小鼠技術相媲美的新RNAi干擾技術，該技術由洛克菲勒大學的研究人員研制出，在全基因組水平上首次對小鼠進行RNAi篩查研究，并在數月內發現了導致表皮腫瘤生長的基因，研究成果發表在《自然》期刊上。 RNAi技術篩查致病基因
使用RNAi技術治療遺傳性疾病
遺傳性疾病的治療美國西北大學的Carthew R W和日本基因研究所的Ishizuka A等人發現RNAi同脆性X染色體綜合征（與FMR-1基因異常有關的導致智力低下的染色體病）之間的關系密切，揭示了與RNAi相關機制的缺陷可能導致人類疾病的病理機制。遺傳性疾病的RNAi治療成為當今研究RNAi的又
RNAi的實驗原理和操作實用技術
? 幾十年來生物學上最重要的進展，也許是關于RNA分子能調節基因表達的發現。RNA干涉（RNAi）是指雙鏈RNA分子使基因表達沉寂的現象，是在線蟲中發現的，在 1998年的一篇Nature論文中被公諸于眾。??? 此后，科學家們明白，RNAi還有其他形式，它既是一種了解基因功能的強大工具，又是很多生
沉默是金:－強大的RNAi篩選技術
在過去，想要發現哺乳動物細胞的重要生理過程，通常需要通過化學突變或將轉座子插入到基因組中對細胞內的基因進行干擾。但是，大約10年前，RNA 干擾(RNAi)技術的出現改變了這種狀態。這項技術的核心是，設計一個短鏈RNA，使其在轉錄過程中與目的基因序列互補結合，從而阻止目的基因翻譯成蛋白。RN
RNAi技術在功能基因組中的應用
在功能基因組研究中，需要對特定基因進行功能喪失或降低突變，以確定其功能。由于RNAi具有高度的序列專一性，可以特異地使特定基因沉默，獲得功能喪失或降低突變，因此RNAi可以作為一種強有力的研究工具，用于功能基因組的研究。將功能未知的基因的編碼區（外顯子）或啟動子區，以反向重復的方式由同一啟動子控制表
哺乳動物細胞的RNAi技術策略(1)
目前RNAi技術已經進入了生物科學研究的許多領域，成為了一種主要的生物學研究工具，發展得相當迅速，并受到了此次諾貝爾獎評審委員會的青睞，獲得2006年諾貝爾獎醫學/生理獎。然而這一才歷經十個年頭的技術依然對于許多研究人員來說還是很陌生的，以下是有關 i技術在哺乳動物細胞中應用的具體設計策略，主要
RNAi的實驗原理和操作實用技術(2)
2.體外轉錄以DNA Oligo為模版，通過體外轉錄合成siRNAs，成本相對化學合成法而言比較低，而且能夠比化學合成法更快的得到siRNAs。不足之處是實驗的規模受到限制，雖然一次體外轉錄合成能提供足夠做數百次轉染的siRNAs，但是反應規模和量始終有一定的限制。而且和化學合成相比，還是需要占
RNAi的實驗原理和操作實用技術(3)
3.DEAE-葡聚糖和polybrene帶正電的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚體復合物和帶負電的DNA分子使得DNA可以結合在細胞表面。通過使用DMSO或甘油獲得的滲透休克將DNA復合體導入。兩種試劑都已成功用于轉染。DEAE-葡聚糖僅限于瞬時轉染。4.機械法轉染技術也包括使用機械的方法，