動態監控果蠅翻譯過程，揭示空間異質性
mRNA翻譯成蛋白質的過程涉及到的因子已經有大量的研究，但是在活的多細胞生物體中多步驟的翻譯過程是如何進行的還未可知。為了回答該問題，法國蒙彼利埃大學Mounia Lagha研究組與Jeremy Dufourt（第一作者）合作在Science發文，題為Imaging translation dynamics in live embryos reveals spatial heterogeneities，通過對果蠅卵中翻譯過程的動態監控揭示出翻譯的空間異質性。 60多年前，大家開始了解mRNA翻譯成蛋白質的過程。然而，研究表明，一個給定的mRNA的水平和它編碼的蛋白質的數量并不直接相關。這種共線性的缺失可能是由于mRNA靶向亞細胞隔室中的翻譯差異造成的。為了對mRNA與初生蛋白質之間相關性進行定量和比較，對于此過程的可視化實驗方法的需求呼之欲出。mRNA的活體成像最早差不多可以追溯到1998年，但那時只能夠在培養的細胞中......閱讀全文
mRNA的轉運和翻譯
mRNA的轉運真核生物和原核生物之間的另一個區別是mRNA的轉運。由于真核轉錄和翻譯是在不同的細胞器內進行的，真核mRNA必須從細胞核輸出到細胞質。 這一過程可能受不同信號通路的調節。成熟的mRNA通過其加工的修飾被識別，在結合帽結合蛋白CBP20和CBP80及轉錄/輸出復合物（TREX）后通過核孔
mRNA的轉運和翻譯介紹
mRNA的轉運 真核生物和原核生物之間的另一個區別是mRNA的轉運。由于真核轉錄和翻譯是在不同的細胞器內進行的，真核mRNA必須從細胞核輸出到細胞質。 這一過程可能受不同信號通路的調節。成熟的mRNA通過其加工的修飾被識別，在結合帽結合蛋白CBP20和CBP80及轉錄/輸出復合物（TREX）后
外無細胞體系翻譯病毒－mRNA
? ? ? ? ? ? 實驗材料 ATP GTP 質粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 膠 肌酸磷酸激酶 ? 核酸酶
外無細胞體系翻譯病毒－mRNA
實驗材料 ATP GTP 質粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 膠肌酸磷酸激酶 核酸酶 tRNAHeLaS3 細胞 TgSVA 細胞 Lx 細胞來源于表達人脊髓灰質炎病毒受體的 Ltk 細胞 NS20Y 細胞 人肝癌來源的 HepG2 細胞試劑、試劑盒 HEPES-KOH Tris-HCl 等滲
動態監控果蠅翻譯過程，揭示空間異質性
mRNA翻譯成蛋白質的過程涉及到的因子已經有大量的研究，但是在活的多細胞生物體中多步驟的翻譯過程是如何進行的還未可知。為了回答該問題，法國蒙彼利埃大學Mounia Lagha研究組與Jeremy Dufourt（第一作者）合作在Science發文，題為Imaging translation dy
試管內成功再現抑制mRNA翻譯的過程
??? 生命是根據基因的設計圖被制作出來的蛋白質起作用而延續的。蛋白質的合成首先是DNA信息被一部分mRNA轉錄，接著mRNA與蛋白質的合成工場“核糖體”會合，核糖體按照mRNA的信息去與氨基酸連接(叫做“翻譯”)。這就是生物的基本結構。 ???? 近年，人們知道了僅僅20幾個堿基連接的“mic
4.6－外無細胞體系翻譯病毒－mRNA
用哺乳動物細胞 S10 抽提物翻譯脊髓灰質炎病毒和丙型肝炎病毒 mRNA 的技術。實驗材料ATPGTP質粒 DNA肌酸磷酸激酶10%SDS 膠肌酸磷酸激酶核酸酶tRNAHeLaS3 細胞TgSVA 細胞Lx 細胞來源于表達人脊髓灰質炎病毒受體的 Ltk 細胞NS20Y 細胞人肝癌來源的 HepG2
清華學者揭示新的mRNA翻譯終止機制
2016年12月1日，清華大學生命科學學院、結構生物學高精尖創新中心高寧課題組和合作者在《Nature》在線發表題為Mechanistic insights into the alternative translation termination by ArfA and RF2的研究論文。該論
mRNA－在麥胚提取物中的翻譯
? ? ? ? ? ? 實驗材料 精胺或4.0?8.Ommol L亞精胺 肌氨酸激酶 新鮮麥胚 沙粒 試劑、試劑盒
mRNA－在麥胚提取物中的翻譯
實驗材料 精胺或4.0?8.Ommol L亞精胺肌氨酸激酶新鮮麥胚 沙粒試劑、試劑盒 提取緩沖液 平衡緩沖液 DEFC 10X能量緩沖液 乙酸鉀 DTT LHEPES mRNA [3 H] 或 [35S] 標記的 L-氨基酸 三氯乙酸（TCA)。儀器、耗材 SephatkxG-25(粗級）高溫烘箱
mRNA－在網織紅細胞裂解液中的翻譯
實驗材料 家兔胰核糖核酸酶 小球菌核酸酶 I 型磷酸肌酸激酶試劑、試劑盒 乙酰苯肼溶液 A 溶液 B 滅菌重蒸水 CaCl2 EGTA 氯高鐵血紅素儲存液 亞精胺 磷酸肌酸 氨基酸 DTT HEPES 水 KCl 乙酸鎂 [35S] 甲硫氨酸.儀器、耗材 電泳裝置干酪包布離心機實驗步驟 一、材料與設
mRNA－在網織紅細胞裂解液中的翻譯
? ? ? ? ? ? 實驗材料 家兔 胰核糖核酸酶 小球菌核酸酶 ? I 型磷酸肌酸激酶 試劑、試劑盒
4.2－mRNA－在麥胚提取物中的翻譯
麥胚提取物體外翻譯系統可用于病毒和真核細胞中 mRNA 在異種無細胞體系中的有效的翻譯實驗材料精胺或4.0?8.Ommol L亞精胺肌氨酸激酶新鮮麥胚沙粒試劑、試劑盒提取緩沖液平衡緩沖液DEFC10X能量緩沖液乙酸鉀DTTLHEPESmRNA[3 H] 或 [35S] 標記的 L-氨基酸三氯乙酸（T
4.1－mRNA－在網織紅細胞裂解液中的翻譯
從哺乳動物細胞中提取的 mRNA 或通過克隆化 DNA 在體外轉錄產生的 mRNA 在無細胞提取液中能被翻譯而合成蛋白質,這些蛋白質可用于免疫沉淀試驗或進行生物學活性測定。實驗材料家兔胰核糖核酸酶小球菌核酸酶I 型磷酸肌酸激酶試劑、試劑盒乙酰苯肼溶液 A溶液 B滅菌重蒸水CaCl2EGTA氯高鐵血紅
Science：蛋白質翻譯的真相
Yeshiva大學的科學家們開發了一個新熒光標記技術，首次確定了蛋白質合成的時間和地點。該技術允許研究者在活細胞中直接觀察mRNA分子翻譯成蛋白質的過程，有助于揭示蛋白質合成異常引發人類疾病的具體機制。這項研究發表在三月二十日的Science雜志上。 “過去我們一直沒能確切查明mRNA翻譯成蛋
eLife：“通讀”終止密碼子非常普遍
基因意味著開放性閱讀框。在翻譯特定基因的mRNA轉錄本時，從起始密碼子AUG開始，以三個堿基為單位進行，直到核糖體遇到終止密碼子，才完成蛋白質的延伸。以上這些都是生物教科書里的規則。 不過，人們常說“規則就是用來打破的”，核糖體也不例外。科學家們已經發現了一些“通讀”(Read-throu
關于顆粒狀細胞器—核糖體的mRNA的翻譯功能介紹
核糖體的主要功能是將遺傳密碼轉換成氨基酸序列并從氨基酸單體構建蛋白質聚合物。mRNA包含一系列密碼子，被核糖體解碼以產生蛋白質。核糖體以mRNA作為模板，核糖體通過移動穿過mRNA的每個密碼子（3個核苷酸），將其與氨酰基-tRNA提供的適當氨基酸配對。氨基酰基-tRNA的一端含有與密碼子互補的反
Nature子刊：華中農大發現轉座子可抑制mRNA翻譯
來自華中農業大學生命科學學院，作物遺傳改良國家重點實驗室的研究人員發現水稻中的一類DNA轉座子具有翻譯抑制功能，這揭示了微小反向重復轉座元件的新功能，對研究其他重復序列的功能提供了借鑒意義，同時也拓寬了對于轉座子的認識。 這一研究成果公布在3月3日的Nature Communications雜
Science：神經元突起中，單核糖體偏好性地翻譯突觸mRNA
RNA測序和原位雜交揭示了神經元樹突和軸突中存在意想不到的大量RNA種類，而且許多研究已經記錄了蛋白在這些區室中的局部翻譯。在信使RNA（mRNA）的翻譯過程中，多個核糖體可以同時占據單個mRNA（一種稱為多核糖體的復合物），從而導致編碼蛋白的多個拷貝產生。多核糖體通常在電子顯微鏡圖片中被識別為
生物物理所果蠅生殖發育關鍵蛋白質與RNA研究獲進展
mRNA的時空定位是mRNA轉錄后調控的重要步驟之一，在生殖細胞發育以及身體非對稱性的形成中發揮著重要作用。一個典型的例子是oskarmRNA的定位與翻譯的位置決定了果蠅生殖質組裝的位置。 oskarmRNA在滋養細胞中轉錄，并通過微管等細胞骨架運輸到卵母細胞的后極。新轉錄的mRNA通常不翻譯
科研中的“新星”技術——MicroRNA熒光定量PCR
Micro RNA簡介微小RNA(microRNA，簡稱miRNA)是生物體內源長度約為20－23個核苷酸的非編碼單鏈小分子RNA，通過與靶mRNA的互補配對而在轉錄后水平上對基因的表達進行負調控，導致mRNA的降解或翻譯抑制。是由具有發夾結構的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經過Dicer酶
miRNA的特征、功能及識別方法等詳解（三）
2) miRNA的靶基因預測方法?miRNA的研究意義之重大是毋庸置疑的。然而，與新的miRNA的頻頻發現相比，miRNA的功能研究相對緩慢。到目前為止，在發現的4449多個miRNA中，確定功能的miRNA僅有幾十個。導致miRNA功能研究進展緩慢的非常重要的原因是miRNA的作用靶標難以確定。事
Core－RISC的概念
Core RISC：是介導目標mRNA切割過程或者翻譯抑制的最小的RNA-蛋白質復合物。在人和果蠅身上發現的分子量少于200kDa的RISCs可能就是core RISC的重要代表。AGO蛋白質和Core RISC密切相關。
Core－RISC的概念
Core RISC：是介導目標mRNA切割過程或者翻譯抑制的最小的RNA-蛋白質復合物。在人和果蠅身上發現的分子量少于200kDa的RISCs可能就是core RISC的重要代表。AGO蛋白質和Core RISC密切相關。
RNA干擾相關知識Core－RISC
Core RISC：是介導目標mRNA切割過程或者翻譯抑制的最小的RNA-蛋白質復合物。在人和果蠅身上發現的分子量少于200kDa的RISCs可能就是core RISC的重要代表。AGO蛋白質和Core RISC密切相關。
關于體外翻譯翻譯系統的選擇介紹
雖然不是必須，但一般說，選用真核系統來翻譯真核序列，選用原核系統來翻譯原核序列。 如果一個系統存在功能上或抗原的交叉反應，就得選擇另一個系統。使用微粒體膜進行翻譯后修飾或加工一般只與兔網織紅細胞系統兼容。僅在某些特定條件下麥胚芽翻譯系統才與微粒體膜兼容。
果蠅實驗技術
一、實驗原理?果蠅（fruit fly）是雙翅目（Diptera）昆蟲，屬果蠅屬（genus Drosophila），約有2500個種。通常用作遺傳學實驗材料的是黑腹果蠅（Drosophila melanogaster）。果蠅優點：?1. 飼養容易。在常溫下，以玉米粉等作飼料就可以生長，繁殖。?2.
小分子RNA
RNA一度被認為僅僅是DNA和蛋白質之間的“過渡”，但越來越多的證據清楚的表明，RNA在生命的進程中扮演的角色遠比我們早前設想的更為重要。RNA 干擾（RNA interference）的發現使得人們對RNA調控基因表達的功能有了全新的認識，更因為可以簡化/替代基因敲除而成為研究基因功能的有力工具，
miRNA的特征、功能及識別方法等詳解（一）
什么是miRNAMicroRNAs (miRNAs)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子RNA，是由具有發夾結構的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經過Dicer酶加工后生成，不同于siRNA（雙鏈）但是和siRNA密切相關。據推測，這些非編碼小分子RNA（miRNAs）參與調控基因表達
關于調節子的分類介紹
一些核糖核酸調節子通過與其他RNA簡單的反義相互作用發揮功能。依據基因組來源，內源的反義RNA大致可以分為兩類： ①反式反義RNA(trans-antisenseRNA)，該反義RNA轉錄自推測的靶特定位點； ②順式反義RNA(cis-antisenseRNA)，該反義RNA由靶RNA同一基