核酸分子診斷三大技術：qPCR、二代測序NGS和數字PCR
分子診斷是將分子生物學技術應用于疾病診斷的醫學分支學科，利用分子生物學技術研究人體內源性或外源性生物分子的存在、結構或表達調控變化，為疾病的預防、預測、診斷、治療、預后和轉歸提供信息和決策依據。精準醫療的發展，將持續推動分子診斷的進步。目前常見核酸分子診斷技術涉及三個技術：熒光定量PCR技術（qPCR）、高通量測序技術（NGS）和數字PCR。如何選擇，我們作一下簡要介紹。qPCR在1983年，美國人Mullis發明了聚合酶鏈反應技術(polymerase chain reaction, PCR),這一技術將DNA的變性原理以及復性原理加以利用，采用適溫延伸、高溫變性以及低溫復性，讓核酸片段實現了體外擴增，可將極微量的目標DNA特異地擴增上百萬倍，從而提高對DNA分子的分析和檢測，因為PCR有著很高的靈敏度以及特異性，而且簡便快速，所以這種技術已經成為目前臨床基因擴增實驗室接受程度最高的技術。qPCR通過熒光染料或熒光特異......閱讀全文
FDA批準首個基于二代測序（NGS）的伴隨診斷試劑盒
2016年12月19日，美國食品和藥物管理局（FDA）批準了Foundation Medicine公司的FoundationFocus CDxBRCA產品，成為市場上第一個基于二代測序的伴隨診斷試劑盒。 該產品被批準用于鑒定攜帶BRCA突變的晚期卵巢癌患者，這些患者更易對Clovis Onco
分子診斷技術大盤點
分子診斷技術盤點分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料，用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常，從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。分子診斷技術為疾病的預測、診斷、預防、治療和轉歸提供了信息和決策依據，已廣泛應用于傳染病的診斷、流行病的調查、食品衛生檢查、腫瘤和遺傳病的早期診斷及法醫
數字PCR簡介
1985年美國科學家Kary Mullis發明PCR方法以后，PCR已經成為生命科學研究領域中最常規的實驗方法之一。PCR是用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，可看作是生物體外的特殊DNA復制。PCR的最大特點，是能將微量DNA大量擴增。最傳統的一代PCR采用瓊脂糖電泳的方式對PCR產物進
核酸突變分析方法抉擇：PCR、雜交、NGS？
日前，以“精細管理、精準醫療”為主題的2016屆CSCO學術年會在廈門落下帷幕，精準檢測作為臨床實踐中實施精準醫學的第一步，成為本屆CSCO學術年會的熱點話題。來自不同企業的分子診斷技術百花齊放百家爭鳴，面對新技術與成熟技術的較量，在“精準醫學”時代下，如何選擇合適的檢測技術，實現精準治療成為新醫學
盤點：分子診斷常用技術（二）
(?五 )?生物芯片1991年Affymetrix公司的Fordor利用其所研發的光蝕刻技術制備了首個以玻片為載體的微陣列，標志著生物芯片正式成為可實際應用的分子生物學技術。時至今日，芯片技術已經得到了長足的發展，如果按結構對其進行分類，基本可分為基于微陣列( microarray)?的雜交芯片
體外診斷IVD基因測序技術概述（T16）
? ? ?分子診斷的主要技術有核酸分子雜交(FISH)、聚合酶鏈反應（PCR）、基因測序技術和生物芯片技術（gene chip）。? ? ? 基因測序是通過血液、其他體液或細胞對 DNA 分子信息做檢測,從而檢查 DNA 序列有無缺陷，找到基因層面的發病原因，同時還可預知身體患疾病的風險。一、發展歷
數字PCR應用（一）
一． PCR的發展歷史 PCR技術自問世以來，在遺傳病、病原體、癌基因等分子診斷領域和法醫鑒定等方面發揮了巨大作用。第一代 PCR在進行擴增后通過凝膠電泳進行定性分析。 隨著生物分子熒光技術的發展，1992年實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 應運
數字PCR的原理
數字 PCR 的工作原理在于將 DNA 或 cDNA 樣品分割為許多單獨、平行的 PCR 反應，部分這些反應包含了靶標分子（陽性），而其他不包含（陰性）。 單個分子可以被擴增一百萬倍或更多。 在擴增期間，TaqMan? 化學試劑及染料標記探針可用于檢測特定序列的靶標。 當不存在任何靶標序列時，沒有信
數字PCR的原理
數字 PCR 的工作原理在于將 DNA 或 cDNA 樣品分割為許多單獨、平行的 PCR 反應，部分這些反應包含了靶標分子（陽性），而其他不包含（陰性）。 單個分子可以被擴增一百萬倍或更多。 在擴增期間，TaqMan? 化學試劑及染料標記探針可用于檢測特定序列的靶標。 當不存在任何靶標序列時，沒有信
神通廣大的數字PCR，到底有多厲害？
什么是數字PCR？ 提起PCR，在生物及其相關行業內可謂無人不知無人不曉，半個世紀以來分子診斷的高速發展離不開分子生物學技術特別是PCR技術日新月異的進步。1983年由美國Mullis首先提出設想，1985年發明了聚合酶鏈反應，即簡易DNA擴增法，標志著PCR技術的真正誕生。1999 年，美
解讀《腫瘤個體化治療檢測技術指南》：9大檢測技術
腫瘤的個體化治療基因檢測已在臨床廣泛應用，實現腫瘤個體化用藥基因檢測標準化和規范化，是一項意義重大的緊迫任務。 為進一步提高腫瘤個體化用藥基因檢測技術的規范化水平，7月31日，國家衛生計生委個體化醫學檢測技術專家委員會，在廣泛征求意見的基礎上，制訂了《腫瘤個體化治療檢測技術指南（試行）》。
臨床應用研究中指示性生物的檢測方法有哪些？
在臨床應用研究中，常見的指示性生物的檢測方法包括：免疫測定法酶聯免疫吸附測定（ELISA）：利用抗體與抗原的特異性結合，通過酶催化底物顯色來定量檢測目標生物標志物。化學發光免疫分析（CLIA）：基于化學發光反應測量免疫復合物的量，具有較高的靈敏度。免疫熒光法：使用熒光標記的抗體來檢測目標生物標志物，
第二代測序技術（NGS）推動個性化腫瘤學發展
目前，腫瘤學已經上升到基因組分析的前沿，它可以被用于識別驅動突變和其他標記， 臨床醫生也可以借此設計療法，監測病人的反應，而突變和標記可以通過NGS技術（第二代測序技術，一個生成gigabases數據的大規模平行測序技術）顯現出來。 何為NGS？它面臨著哪些問題？ NGS已經成為一個研究平臺
新聞中的新冠病毒核酸檢測方法到底是什么？
國務院聯防聯控機制于2月17日召開新聞發布會。對于目前核酸檢測試劑檢測率不穩定的問題，北大一院主任醫師王貴強解釋，核酸檢測本身的穩定性是很好的。出現一些所謂檢不出的情況或者假陰性的情況，主要原因是任何檢測方法都有一個敏感性的問題。 核酸檢測，是指通過特殊的技術手段檢測臨床樣本中是否存在特定的病
數字PCR新應用：基于S1PFGEddPCR技術的質粒介導耐藥基...
病原細菌產生耐藥性，能夠降低細菌感染后的藥物治療效果，并增加細菌感染和傳播的風險，是造成食品安全問題和健康威脅的重要因素。細菌耐藥性可分為固有耐藥（intrinsic resistance）和獲得性耐藥（acquired resistance）兩種。在獲得性耐藥中，攜帶耐藥基因的質粒可導至耐
分子診斷IVD設備的發展史（一）
分子診斷在臨床診斷中的技術主要包括PCR技術、芯片技術和測序技術。臨床檢測中，分子診斷越來越受到重視，但市場占比與生化診斷、免疫診斷相比，還存在一定的差距。目前分子診斷在體外診斷中的主要的應用領域，包括對病毒、細菌等微生物的篩查及定性定量檢測，藥物篩選及用藥分析以及基因早期的分析。在微生物檢驗檢測方
二代測序技術
人們常說“事后諸葛亮”，可見“料事如神”是一個讓人艷羨的能力。現代科技的發展讓人們無限接近這種能力，天氣預報就是現代人諸多“料事如神”本領中的一種，不斷進步中切實提高了生活品質與舒適度。個人體會進步主要體現在兩個方面：1.越來越說人話。印象里小時候聽天氣預報感覺聽的是中文，但是這些中國話想表達什么聽
Illumina－測序技術原理概述
基因的變異類型有多種（點擊查看），對應的分子檢測方法亦有多種，針對不同的需求，都有對應的理想檢測方法，每個檢測平臺都有著自己的優勢，比如：操作簡單：PCR，ARMS-PCR，HRM等時間快速：ARMS-PCR，HRM等成本低：PCR，PCR-RFLP，MassARRAY等準確：Sanger等通量高：
算法輔助的超多重PCR引物設計實現超低的引物二聚體水平
近日，專注于核酸分子雜交底層技術研發和應用轉化的創新型分子診斷公司閱爾基因與同濟大學附屬上海肺科醫院任勝祥教授合作在Nature Communications再次發表重磅研究，介紹了一種多重PCR引物設計的核心算法SADDLE，在大型擴增子法測序panel中首次實現了超低的引物二聚體水平。SADDL
基于數字PCR的單分子DNA定量技術研究進展（一）
摘要 數字PCR是一項針對單分子目標DNA的絕對定量技術。該技術是將含有DNA模板的反應溶液分配到大量獨立的反應室中并且發生擴增反應，通過統計反應室中的陽性信號來定量DNA的拷貝數。DNA樣品在反應室中隨機和獨立分布是單分子成功擴增和準確定量D NA拷貝數的關鍵因素。本文綜述了數字PCR的發展歷
數字PCR在癌癥早篩和微小殘留病灶檢測的應用
最近幾十年的大量研究表明，在許多血液系統惡性腫瘤中，微小殘留病灶（MRD）與臨床結果及預后顯著相關。癌癥中MRD是指癌癥治療達到完全緩解后，用常規的形態學檢測方法不能檢測到明顯的癌病灶，而此時體內仍存在的少量癌細胞。微小殘留病灶是腫瘤復發的直接原因。目前應用最廣泛最精確的MRD檢測手段是通過取患者的
腫瘤個體化治療檢測技術指南
個體化治療檢測技術指南（試行）》包括什么內容？《腫瘤個體化治療檢測技術指南（試行）》主要內容包括腫瘤個體化治療檢測分析前、分析中和分析后質量保證規范，從而使臨床醫生能夠了解所開展檢測項目的臨床目的、理解檢測結果的臨床意義及對治療的作用，并指導臨床個體化治療，提高療效，減輕不良反應，促進醫療資源的合理
生命科學儀器市場將迎來爆發性增長－生物育種市場現狀
20世紀80年代初，曾經有人預言：“21世紀將是生物學的世紀”。這一預言如今已經成為現實，美國《科學》周刊評選的2014年全世界十大科技突破中，一半的成果都來自生命科學領域。2014年，科學家們在衰老研究、生物進化、遺傳疾病基因分析、干細胞、腦和神經細胞研究領域取得了眾多突破，有助于人
賽默飛在2022年AACR年會上展示癌癥研究工作流程解決方案
賽默飛世爾科技在 4 月 8 日至 13 日于美國新奧爾良舉行的美國癌癥研究協會 (AACR) 2022 年年會上重點介紹了一系列分子技術和工作流程，以推進癌癥研究。 該公司分享了其在下一代細胞分析、使用數字 PCR (dPCR) 的精確腫瘤分析、用于癌癥變異分析的快速下一代測序 (NGS)
基因檢測：NGS在病原微生物檢測中的應用
文章導讀 感染性疾病是當今世界嚴重威脅人類健康的重大疾病。目前，全球感染性疾病的發病率有所上升，病原體呈現多樣化和復雜化的發展趨勢。近年來快速發展的NGS技術因其不依賴于已知核酸序列，無需特殊探針設計，可直接對未知病原微生物進行檢測，打破了傳統微生物檢驗的局限性，在臨床微生物領域展現了廣闊的前景。
IVD領域的7大技術創新：都有哪些顛覆？
IVD領域是一個一直有創新，一直有機會的領域，所有的創新萬變不離其宗，均是在提升檢測的精準度、便利性和效率，從而推動該領域的發展。√?檢測精準度：精準包括特異性和敏感性。特異性的提升依賴于新指標的發現以及多指標的聯合（例如流式液相芯片）；敏感性的提升有賴于信號系統以及檢測方法的創新（例如單分子檢測技
IVD領域的7大技術創新
IVD領域是一個一直有創新，一直有機會的領域，所有的創新萬變不離其宗，均是在提升檢測的精準度、便利性和效率，從而推動該領域的發展。檢測精準度：精準包括特異性和敏感性。特異性的提升依賴于新指標的發現以及多指標的聯合（例如流式液相芯片）；敏感性的提升有賴于信號系統以及檢測方法的創新（例如單分子檢測技術、
基因測序技術發展史
在我心中，近100年生物技術最大的突破就是測序技術，正是由于測序技術的不斷進步才使得人類可以破解生命的密碼。但是一直以來由于成本較高加之技術復雜，大多數檢測實驗室始終無法將測序作為常規檢測方法。近年來來隨著納米孔測序的興起，使得大多數實驗室使用測序作為常規檢測的時代不再遙遠！本文將從檢測的角度來
診斷性二代測序指南
?? 通過二代測序（next-generation sequencing，NGS）能夠快速地對某個個體患者的數千個甚至數百萬個DNA堿基對進行測序。這一技術快速出現并且獲得成功，這預示著一個遺傳學診斷的新的時代的到來。但是，新技術也帶來了新的挑戰，一方面是技術層面上的，即數據處理問題，另一方
Digital－PCR－技術的發展與應用（二）
液滴數字PCR數字PCR源于乳液PCR(emulsion PCR)技術 ，利用微滴發生器可以一次生成數萬乃至數百萬個納升甚至皮升級別的單個油包水微滴,作為數字PCR的樣品分散載體，PCR反應結束后檢測每個微滴的熒光信號。目前Bio-Rad公司的QX100系統、 QX200系統均為采用液滴技術