長春應化所設計合成新型稀土基磁性親和材料
蛋白質的可逆磷酸化修飾是生物體內普遍存在的信息轉導調節方式，幾乎參與生命活動的所有過程，在細胞的增殖、發育和分化，細胞信號轉導、轉錄和翻譯，細胞的周期調控、蛋白降解和新陳代謝，細胞生存、細胞凋亡和腫瘤發生等方面發揮著重要的作用。目前已知許多人類疾病的發生都與異常的蛋白質磷酸化修飾有關，而且一些疾病也會導致一些異常的磷酸化修飾。因此，通過探索生理和病理狀態下蛋白質磷酸化規律對于闡述生命本質和疾病發生機制具有十分重要的意義。 由于蛋白質磷酸化是一種動態過程，磷酸化蛋白的豐度很低，化學計量比十分小、非磷酸化肽質譜信號強烈抑制磷酸化肽質譜信號，因而難以用質譜直接檢測。此外，由于磷酸根帶負電，其離子化效率較低，使得磷酸化肽的質譜檢測變得更加困難。因此，在檢測前，進行富集，提高其相對含量，改善質譜對磷酸肽的信號響應是十分必要的。盡管目前有多種富集方法可以選擇，但都存在不少問題，如抗體需要量較大、費用昂貴、富集效率不高，......閱讀全文
蛋白質磷酸化
Tyrosine Kinase Assay Using Synthetic Peptides?(T. Miller)Small synthetic peptide substrates are especially well suited for applications such as assay
蛋白質磷酸化的測定實驗
代謝標記 X射線片放射自顯影檢測32P標記的蛋白質 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
蛋白質磷酸化位點怎么確定
鑒定了磷酸化肽后,還要進一步確定磷酸化肽中修飾了磷酸化位點的哪個殘基.用于確定磷酸化肽中磷酸化位點的質譜方法基于兩種不同原理,第一種方法取決于磷酸酯鍵的化學穩定性,如在ESI質譜儀的碰撞室或離子源中,或在MALDI-MS的PSD過程中.磷酸化肽可通過磷酸酯鍵斷裂產生的碎片離子鑒定.第二種方法基于肽段
蛋白質磷酸化位點怎么確定
鑒定了磷酸化肽后,還要進一步確定磷酸化肽中修飾了磷酸化位點的哪個殘基.用于確定磷酸化肽中磷酸化位點的質譜方法基于兩種不同原理,第一種方法取決于磷酸酯鍵的化學穩定性,如在ESI質譜儀的碰撞室或離子源中,或在MALDI-MS的PSD過程中.磷酸化肽可通過磷酸酯鍵斷裂產生的碎片離子鑒定.第二種方法基于肽段
蛋白質磷酸化位點怎么確定
鑒定了磷酸化肽后,還要進一步確定磷酸化肽中修飾了磷酸化位點的哪個殘基.用于確定磷酸化肽中磷酸化位點的質譜方法基于兩種不同原理,第一種方法取決于磷酸酯鍵的化學穩定性,如在ESI質譜儀的碰撞室或離子源中,或在MALDI-MS的PSD過程中.磷酸化肽可通過磷酸酯鍵斷裂產生的碎片離子鑒定.第二種方法基于肽段
蛋白質磷酸化最重要的機制
蛋白質磷酸化是調節和控制蛋白質活力和功能的最基本、最普遍，也是最重要的機制。蛋白質磷酸化主要發生在兩種氨基酸上，一種是絲氨酸(包括蘇氨酸)，另一種是酪氨酸。這兩類酸磷酸化的酶不一樣，功能也不一樣，但也有少數雙功能的酶可以同時作用于這兩類氨基酸，如MEK(促絲裂原活化蛋白激酶激酶mitogen-a
Western Blot蛋白質磷酸化操作小貼士
WB 是檢測和定量磷酸化蛋白質的重要實驗方法，然而大家一直都說磷酸化蛋白 WB 不好做！WB 磷酸化蛋白曝不出條帶的時候，會特別沮喪。在此給大家列出幾點小建議，希望能幫助您改善一下實驗結果。1、樣本是否表達：查閱資料或通過預實驗確定。2、對照設置：陽性和陰性對照。總蛋白抗體對照，對于特定時間的特定樣
Western Blot蛋白質磷酸化操作小貼士
WB 是檢測和定量磷酸化蛋白質的重要實驗方法，然而大家一直都說磷酸化蛋白 WB 不好做！WB 磷酸化蛋白曝不出條帶的時候，會特別沮喪。 Azure君在此給大家列出幾點小建議，希望能幫助您改善一下實驗結果。 1、樣本是否表達： 查閱資料或通過預實驗確定。 2、對照設置：
磷酸化蛋白質組學研究獲進展
中科院大連化物所生物技術部1809組封順、葉明亮、鄒漢法等人關于新型金屬離子固定化親和色譜固定相應用于磷酸化蛋白質組學的研究成果(Immobilized Zirconium Ion Affinity Chromatography for Specific Enrichment of Phosphop
蛋白質磷酸化的測定實驗—代謝標記
實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶實驗步驟1. 用 60 mm 或 100 mm 培養瓶，在完全培養基中培養細胞至所希望的密度。2. 用預熱的低磷酸培養基（無放射性磷酸鹽）沖洗兩次，然后加入含 0.5~1 mCi32P/ml 的低磷酸培養基（50~100 μmol/L 無機磷酸）。3. 培養結束后，回收?