小環狀干擾RNA(sciRNA)作為基因沉默的有效治療平臺
為了實現由RNA干擾(RNAi)途徑介導的有效的治療性基因沉默，小干擾RNA (sirna)必須經過化學修飾。一些具有在代謝上穩定sirna潛力的超rna結構已被評估其誘導基因沉默的能力，但所有這些結構都有局限性或尚未在治療相關的背景下進行探索。共價閉合環狀RNA轉錄本普遍存在于真核生物中，有潛力作為生物標志物和疾病靶點，環狀RNA模擬正在被探索用于治療。 本文報道了小環狀干擾rna (sciRNAs)的合成和評價。為了合成scirna，將三價n -乙酰半乳糖胺(GalNAc)配體功能化并經click化學環化的sense鏈退火成反義鏈。這一策略用于small circles的合成，但也可以用于合成更大的環狀RNA模擬物。作者在體內和體外評估了各種sciRNA設計。作者觀察到在循環和脫靶效應被消除后，感覺鏈的代謝穩定性得到了改善。反義鏈的5 -(E)-乙烯基膦酸酯修飾導致galna -scirna在治療相關劑量的......閱讀全文
小環狀干擾 RNA (sciRNA) 作為基因沉默的有效治療平臺
為了實現由RNA干擾(RNAi)途徑介導的有效的治療性基因沉默，小干擾RNA (sirna)必須經過化學修飾。一些具有在代謝上穩定sirna潛力的超rna結構已被評估其誘導基因沉默的能力，但所有這些結構都有局限性或尚未在治療相關的背景下進行探索。共價閉合環狀RNA轉錄本普遍存在于真核生物中，有潛
RNA干擾（轉錄后基因沉默）實驗
RNA干擾（RNA interference, RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA（double-stranded RNA，dsRNA）誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。目前主要用于（1）特異性剔除或關閉特定基因的表達 （2）探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的治療 （3）使
RNA干擾（轉錄后基因沉默）實驗
RNA干擾 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsR
基因敲除，rna干擾，基因沉默有什么關系
基因敲除一般指永久的、不可逆轉的敲除/失活靶基因，目前其中一種熱門的，常見的基因敲除方法是CRISPR/Cas9，利用gRNA靶向靶基因并指導cas9切割基因雙鏈，形成移碼突變或片段敲除來完成基因敲除。基因沉默與基因敲除不同的地方在于，沉默可以是暫時性的、可逆轉的失活基因/抑制基因表達，基因可以是存
RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料pGEM-T 載體DNA 模板試劑、試劑盒dNTP 混合物DNA 聚合酶（Sigma) 及配套緩沖液限制酶儀器、耗材PCR 純化試劑盒或柱子實驗步驟一、篩選目的基因片段的參數1. 序列( 1 ) 構建一個指定的 RNA 沉默載體首先要進行生物信息學分析。根據目的基因對應的已知 cDNA 序列
RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料pGEM-T 載體 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DNA 模板 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒d
RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料 pGEM-T 載體DNA 模板試劑、試劑盒 dNTP 混合物DNA 聚合酶（Sigma) 及配套緩沖液限制酶儀器、耗材 PCR 純化試劑盒或柱子實驗步驟 一、篩選目的基因片段的參數1. 序列( 1 ) 構建一個指定的 RNA 沉默載體首先要進行生物信息學分析。根據目的基因對應的已知 c
小干擾RNA的概念和作用
在后生生物中，由Dicer產生的小干擾RNA（siRNA）被整合到稱為RNA誘導沉默復合物（RISC）。該復合物含有內切核酸酶，切割與siRNA結合的完全互補的mRNA，產生的片段然后被核酸外切酶降解。 siRNA通常用于實驗室細胞培養中阻斷基因的功能。SiRNA被認為是病毒先天免疫系統的一部分，可
RNA剪接和基因沉默之間的聯系
為了識別在RNA干涉(RNAi)和微RNA介導的基因表達調控中所涉及的因素，Gary Ruvkun及其同事對86種真核生物進行了系統發生分析，所得到的候選物再用轉錄和蛋白組相互作用數據進行Bayesian分析，來估計它們參與小RNA調控的概率。所識別出的小RNA輔因子中大約一半是RNAi沉默所必需的
RNA剪接和基因沉默之間的聯系
為了識別在RNA干涉(RNAi)和微RNA介導的基因表達調控中所涉及的因素,Gary Ruvkun及其同事對86種真核生物進行了系統發生分析,所得到的候選物再用轉錄和蛋白組相互作用數據進行Bayesian分析,來估計它們參與小RNA調控的概率。所識別出的小RNA輔因子中大約一半是RNAi沉默所必需的