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機械法主要是通過機械切力的作用使組織細胞破碎,有以下幾種裝置和方法可用于組織細胞的破碎。①高速組織搗碎機 由調速器、支架、馬達、帶桿刀葉、有機玻璃管(筒口加蓋)等部分組成,操作時將樣品配成稀糊狀液,放置于筒內(約占1/3體積),固定筒上的蓋子,將調速器撥至最慢處,開動馬達后逐步加速至所需速度,一般市售商品轉速最高可達20000r/min。高速組織搗碎機適宜于動物內臟組織、植物肉質種子、柔嫩的葉和菜籽材料的破碎。②玻璃勻漿器 由一個內壁經過磨砂處理的玻璃管和一根一端為球狀(表面經過磨砂)的桿組成。操作時,先把絞碎的組織置于管內,再套入研磨桿,手工來回研磨,或把桿裝在電動攪拌器上,用手握住玻璃管上下移動,即可將細胞研碎。勻漿器的內桿球體與管壁之間一般只有十分之幾毫米,細胞破碎程度比高速組織搗碎機高,機械切力對生物大分子破壞較少。制造勻漿器的材料除玻璃外,也可是不銹鋼、硬質塑料等。③研......閱讀全文
機械法主要是通過機械切力的作用使組織細胞破碎,有以下幾種裝置和方法可用于組織細胞的破碎。 ①高速組織搗碎機? ?由調速器、支架、馬達、帶桿刀葉、有機玻璃管(筒口加蓋)等部分組成,操作時將樣品配成稀糊狀液,放置于筒內(約占1/3體積),固定筒上的蓋子,將調速器撥至最慢處,開動馬達后逐步加速至所需
物理法主要通過各種物理因素的作用使組織細胞破碎,常用的有以下一些方法。 ①反復凍融法? ? 把待破碎樣品冷至20-15℃使之凍固,然后緩慢融化,如此反復操作,大部分動物細胞及細胞內的顆粒可被破碎。 ②冷熱交替法? ? 在細菌或病毒中提取蛋白質和核酸時可使用此法。操作時,將材料放入沸水中,在9
通過改變細胞膜透性,破壞蛋白質與脂類的結合,也可達到破壞細胞的目的,有利于蛋白質、酶等物質的分離提取。 這方面應用較多的有真空干燥和用丙酮處理制成丙酮粉的方法。在酶的制備中,用丙酮干燥,不僅是使細胞膜破碎的有效方法,而且可做成具有酶活力的干粉長時間保存,作為一個很方便的原料樣品在需要分析測定時以
當待測組分(主要是各種多肽激素、各種酶以及各種基因工程的產物如胰島素、生長激素等)存在于生物體細胞內及多細胞生物組織中時,需在分析測定之前將細胞和組織破碎,使這些待測組分充分釋放到溶液中去,不同的生物體或同一生物體的不同組織,其細胞破碎的難易程度不一樣,使用的方法也不完全相同。如動物胰臟、肝臟、腦
主要是通過化學試劑或酶破壞細胞壁而使細胞破碎,常用的有如下一些方法。①自溶法? ?將待破碎的新鮮生物樣品存放在一定pH值和適當的溫度下,利用組織細胞中自身的酶系將細胞破壞,使細胞內含物釋放出來的方法。自溶的溫度,動物樣品常選在0~4℃,微生物材料則多在室溫下進行。自溶時,需加少量防腐劑如甲苯、氯仿等
細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁，使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術，由于細菌、酵母、真菌、植物都有細胞壁，但成分不同，且同類細胞結成的網狀結構不同，因此其細胞壁的堅固程度不同，總體呈現遞增態勢。動物細胞雖沒有細胞壁，但具有細胞膜，也需要一定的細胞破碎方法來破膜，達到提取產物
細胞破碎儀的破碎技術是怎樣的？ 在生物產物的分離提取中，如果目標物質為胞外產物（如霉菌產生的糖化酶等），其提取過程較簡單，只需直接進行固液分離，獲得澄清的濾液，再進行分離純化操作；如果目標物質為胞內產物或多細胞生物組織中的各種生物分子（如堿性磷酸酶等胞內酶、部分外源基因表達產業或植物細胞產物等）
用0.14mol/L氯化鈉溶液將組織作勻漿并反復提取細胞質中的核蛋白,而留下含有DNA的細胞核物質,然后用10%乙酸調至pH4.2沉淀,離心棄去上清液,先用0.5mol/L氯化鈉溶液沉淀后用水洗滌沉淀,得核糖核蛋白后溶解于0.5mol/L碳酸氫鈉溶液中,離心,取上清液,調至pH4.2沉淀,以0.5
DNA主要存在于細胞核中,絕大數以脫氧核糖核蛋白形式存在。以1mol/L氯化鈉溶液提取,將得到的脫氧核苷酸核蛋白黏液與含少量辛醇和戊醇的氯仿一起搖蕩,除去蛋白質。
超聲波是一種頻率高于20000赫茲的聲波，它的方向性好，穿透能力強，易于獲得較集中的聲能，在水中傳播距離遠，可用于測距、測速、清洗、焊接、碎石、殺菌消毒等。在醫學、軍事、工業、農業上有很多的應用。超聲波效應：當超聲波在介質中傳播時，由于超聲波與介質的相互作用，使介質發生物理的和化學的變化，從而產生一