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灌流色譜(perfusion chromatography)所采用的固定相中存在兩種孔結構:一種是孔徑在600~800mm范圍內的特大孔,稱為通孔或穿透孔( through pore);另一種是孔徑在50~150m范圍內連接特大孔的較小的孔,稱為擴散孔( diffusive pore)。貫通的大孔可以允許流動相直接進入固定相顆粒的內部并貫穿而過。灌流色譜柱可以同時具有高流速、高效率、高樣品負載量和低操作壓力的特點。基于灌流色譜固定相的分離模式在生物大分子分離上表現出獨特的優勢。......閱讀全文
灌流色譜(perfusion chromatography)所采用的固定相中存在兩種孔結構:一種是孔徑在600~800mm范圍內的特大孔,稱為通孔或穿透孔( through pore);另一種是孔徑在50~150m范圍內連接特大孔的較小的孔,稱為擴散孔( diffusive pore)。貫通的大孔可
正相色譜固定相正相色譜法是最常用的HPLC分離方法之一,固定相一般采用硅膠、氧化鋁和極性基團鍵合的硅膠等。正相色譜中,溶質在柱中固定相上不斷進行吸附-解吸循環,根據不同被測物在吸附劑上吸附作用的差異而獲得分離。溶質和固定相間的吸附作用有兩類:①溶質和溶劑分子對吸附劑表面特定位置的競爭作用,這使得溶劑
親和色譜(AFC)是利用生物分子之間特異性相互作用實現分離的液相色譜分離模式親和色譜是一種特異性的分離技術,這種特異性相互作用是活性生物大分子固有的特征,例如酶能與底物、抑制物、輔酶等結合;抗體能與互補的抗原相結合;凝集素能與細胞的表面抗原以及某些糖類相結合;激素能與蛋白及細胞受體形成復合物;基因可
對映異構體的液相色譜分離常用三種方法:(①將對映異構體衍生成為非對映異構體衍生物進行分離:②使用手性流動相添加劑直接拆分;③使用手性固定相( chiral stationary phaseCSP)直接拆分。手性固定相拆分的基礎在于未消旋的手性固定相和手性溶質之間的對映體分子作用力差別。手性固定相分離
離子交換色譜固定相也稱離子交換劑，主要有鍵合硅膠和聚合物兩類。離子交換劑上的活性離子交換基團決定著其性質和功能，表1列出了一些主要的有機離子交換劑的類型和性質。表1 常見有機離子交換劑的類型和性質種類縮寫官能團基質材料類型PKa值陽離子交換劑S—SO3—樹脂強酸性SM—CH2SO3—樹脂強酸性SE—
體積排阻色譜固定相包括具有確定孔徑的有機和無機凝膠兩大類,常用的凝膠包括硅膠、葡聚糖或瓊脂糖凝膠、二乙烯基苯、丙烯酸酯、聚苯乙烯等。不同的凝膠在性能、使用及裝柱方法等方面存在明顯差異。由于聚合物固定相有輕微的交聯,置于溶劑中時會產生1m的有效孔徑。實際上在聚合物和硅膠固定相中,孔徑有著不同的意義:硅
疏水作用色譜(ydrophobic interaction chromatograhy,HIC)是為了適應活性生物大分子特別是蛋白質的分離而發展起來的一種液相色譜方法。分離機理與反相色譜的強疏水性作用類似,但是其分離機制更多地依賴于溶質與固定相表面之間弱的疏水性相互作用。HIC柱固定相的表面具有弱疏
親水作用色譜(HLIC)是具有不同酸堿特性且可電離化合物分離的有效手段。其概念最早由 Alpert于1990年提出。強極性樣品在反相液相固定相上保留很弱,而在正相分離條件下保留過強,難以洗脫。此外,強極性樣品通常在正相色譜中常用的非水相流動相中溶解度極低,不能發展出普適的分析方法。除了對強極性化合物
色譜柱是色譜的心臟，樣品的分離是在色譜柱上完成的。在色譜柱中不能移動而能起分離作用的物質稱為固定相。固定相分兩大類，一類是具有吸附性的多孔固體物質，也稱為吸附劑；另一類是能起分離作用的液體物質稱為固定液。固定液要涂漬在載體上常用的固體吸附固定相有吸附劑、高分子多孔小球和化學鍵合固定相。吸附劑中有
液-固吸附色譜是以固體吸附劑作為固定相，吸附劑通常是些多孔的固體顆粒物質，在它們的表面存在吸附中心。液固色譜實質是根據物質在固定相上的吸附作用不同來進行分離的。 分離原理:當流動相通過固定相(吸附劑)時，吸附劑表面的活性中心就要吸附流動相分子。同時，當試樣分子(X)被流動相帶入柱內，只要它們在