WIKI資訊
1）所需器材：制冰機、標記筆、兩套1.5ml EP管（最好高溫高壓處理）、兩個大冰盒、長滿細胞的培養瓶、10ml離心管、手套、移液槍、吸頭（最好高溫高壓處理）、濾紙、保存于4℃冰箱的PBS（最好高溫高壓處理）、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一種蛋白酶抑制劑，劇毒）、離心機、燒杯、4×SDS凝膠上樣緩沖液、二硫蘇糖醇（DTT）、泡沫板。 2）操作步驟 a.制冰機制冰； b.標記筆將2套EP管做好標記； c.將兩個大冰盒裝上冰，標記筆做好標記的兩套EP管置于一個大冰盒上,帶上另一個大冰盒，取出長滿細胞的培養瓶平放在大冰盒上； d. 戴好手套，將培養瓶細胞懸液吸至10ml離心管，4℃、3000轉離心10分鐘，棄上清，加1ml保存于4℃冰箱的PBS重懸細胞，再轉移細胞懸液至1.5mlEP管中，4℃、3000轉離心10分鐘，棄上清，濾紙盡可能吸干管口殘留液體； e. 取出保存于4℃冰箱的三去污裂解液、保存于-20℃......閱讀全文
1）所需器材：制冰機、標記筆、兩套1.5ml EP管（最好高溫高壓處理）、兩個大冰盒、長滿細胞的培養瓶、10ml離心管、手套、移液槍、吸頭（最好高溫高壓處理）、濾紙、保存于4℃冰箱的PBS（最好高溫高壓處理）、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一種蛋白酶抑制劑，劇毒）、離心機、燒杯、4×SD
懸浮細胞蛋白提取 1）所需器材：制冰機、標記筆、兩套1.5ml EP管（最好高溫高壓處理）、兩個大冰盒、長滿細胞的培養瓶、10ml離心管、手套、移液槍、吸頭（最好高溫高壓處理）、濾紙、保存于4℃冰箱的PBS（最好高溫高壓處理）、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一種蛋白酶抑制劑，劇毒）、離
1）所需器材：制冰機、標記筆、兩套1.5ml EP管（最好高溫高壓處理）、一個大冰盒、一個1.5ml EP管盒、手套、眼科剪（最好高溫高壓處理）、新鮮組織或保存于-80℃冰箱組織、保存于4℃冰箱的PBS（最好高溫高壓處理）、移液槍、吸頭（最好高溫高壓處理）、兩套研磨棒（最好高溫高壓處理）、掌上離
貼壁細胞蛋白提取（細胞蛋白含量一般約為1x10-9mg/細胞） 1）所需器材：制冰機、細胞刮刀、標記筆、兩套1.5ml EP管（最好高溫高壓處理）、兩個大冰盒、手套、長滿細胞的培養瓶、保存于4℃冰箱的PBS、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一種蛋白酶抑制劑，劇毒）、移液槍、吸頭（最好高溫
1）所需器材：制冰機、細胞刮刀、標記筆、兩套1.5ml EP管（最好高溫高壓處理）、兩個大冰盒、手套、長滿細胞的培養瓶、保存于4℃冰箱的PBS、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一種蛋白酶抑制劑，劇毒）、移液槍、吸頭（最好高溫高壓處理）、濾紙、離心機、燒杯、4×SDS凝膠上樣緩沖液、二硫蘇糖
組織蛋白提取 1）所需器材：制冰機、標記筆、兩套1.5ml EP管（最好高溫高壓處理）、一個大冰盒、一個1.5ml EP管盒、手套、眼科剪（最好高溫高壓處理）、新鮮組織或保存于-80℃冰箱組織、保存于4℃冰箱的PBS（最好高溫高壓處理）、移液槍、吸頭（最好高溫高壓處理）、兩套研磨棒（最好高溫高
實驗步驟 操作流程 (1)制備與凝膠大小一致的硝酸纖維素膜一張，吸水濾紙 2 張 (Whatman 3 MM)。 (2) 將凝膠在轉印緩沖液中浸泡 30m in，將轉移膜、濾紙和海綿墊也在同樣的緩沖液浸濕。 (3) 安裝轉印「夾心三明治」。將凝膠放置在玻璃平板上
蛋白質免疫印跡實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟 操作流程 (1)制備與凝膠大小一致的硝酸纖維素膜一張，吸水濾紙 2 張
這是一個建立在 B urnette 實驗方案基礎上的實驗流程，小于 80k D a 的蛋白質的轉移效果很好并且結果穩定, 重復性好。應用這種膜轉移方法，我們利用多克隆抗體在下面的樣本中檢測目的蛋白：哺乳動物細胞和細菌溶解產物、細胞培養上清、組織提取物以及組織液。雖然下列實驗條件是根據我們自己的實驗需
實驗概要免疫印跡是利用聚丙烯酰胺凝膠電泳來檢測樣品或提取物中某種特定蛋白的方法。聚丙烯酰胺凝膠緊貼著膜放置，在電流的作用下蛋白質從凝膠遷移到膜上并且被固定，常用的膜是硝酸纖維素或 PVDF（聚偏乙烯氟化物）。膜是凝膠蛋白質的復制品，然后可以與抗體結合后進行染色。實驗步驟1.?? 樣品準備1)?? 抽