關于DNA印跡法的基本介紹
Southern印跡法(Southern Blot)是將基因組 DNA經限制性內切酶酶解、瓊脂糖凝膠電泳分離，使DNA片段按分子量大小排列在瓊脂糖凝膠上。經堿處理凝膠使DNA變性（使雙鏈DNA變成單鏈），通過具有一定鹽離子濃度溶液的毛細管作用，將凝膠中變性的單鏈DNA片段原位地吸印到硝酸纖維素濾膜或尼龍膜上，經過干燥或紫外線照射處理。單鏈DNA片段的極性基團與支持膜上的基團結合而使DNA分子牢牢地固定到轉移膜上，轉移后的單鏈DNA分子與32P或35S標記的DNA探針按互補原理進行雜交。經放射自顯影對特定位置上顯現的特異DNA片段進行分析。......閱讀全文
關于DNA印跡法的基本介紹
Southern印跡法(Southern Blot)是將基因組 DNA經限制性內切酶酶解、瓊脂糖凝膠電泳分離，使DNA片段按分子量大小排列在瓊脂糖凝膠上。經堿處理凝膠使DNA變性（使雙鏈DNA變成單鏈），通過具有一定鹽離子濃度溶液的毛細管作用，將凝膠中變性的單鏈DNA片段原位地吸印到硝酸纖維素濾
DNA印跡法的基本原理
這種方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA轉移的方式和復印的過程一樣，比較準確地保持了特異DNA順序在電泳圖譜中的位置，也可將變性的凝膠負壓干燥后與特定的DNA探針進行原位雜交。它把電泳分離和雜交結合起來，不但能檢測出特異的DNA序列片段,而且能進行定位和測定分子量。即先以
DNA印跡法實驗膜處理的介紹
1)剪下一張與凝膠面積相同的硝酸纖維素膜(NCP)或尼龍膜,NL,。注意NCP也要剪去一角且不可用手觸摸,粘有油膩的膜不能被濕潤,也不能結合DNA。同時剪8,10張與NCP等大的干凈濾紙 2)將NCP與3,4張濾紙依次漂浮于盛有雙蒸餾水的帶蓋方盤中,使水自然從NCP的下面向上浸潤,待其完全浸濕
DNA印跡法的注意事項介紹
1、操作時戴手套,嚴禁用手接觸凝膠和硝酸纖維素膜, 2、轉移時,濾紙與膜、膜與凝膠、凝膠與濾紙橋之間均不能有氣泡,否則影響DNA轉移, 3、凝膠易碎,操作時應格外小心, 4、硝酸纖維素膜上的DNA固定非常重要,固定不好時DNA·在雜交過程中會脫落下來,烤膜溫度過高,膜脆性增加,易碎, 5
DNA印跡法的定義
Southern印跡法(Southern Blot)是將基因組 DNA經限制性內切酶酶解、瓊脂糖凝膠電泳分離,使DNA片段按分子量大小排列在瓊脂糖凝膠上。經堿處理凝膠使DNA變性(使雙鏈DNA變成單鏈),通過具有一定鹽離子濃度溶液的毛細管作用,將凝膠中變性的單鏈DNA片段原位地吸印到硝酸纖維素濾膜或
DNA 印跡法的概念
中文名稱DNA 印跡法英文名稱Southern blotting定 義DNA經酶切和凝膠電泳分離后轉移至尼龍膜或硝酸纖維素薄膜上，用探針進行雜交后分析目的DNA片段的方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
DNA印跡法實驗步驟轉移的相關介紹
1)取一個較大的方形瓷盤,放一塊玻璃板于盤上,盤內加轉移液(6×SSC或10×SSC)使液面距離玻璃底面約1,2cm,玻璃板表面蓋兩張預先用轉移液浸潤的Whatman 3M ·濾紙(也可用新華濾紙),濾紙兩端浸入SSC轉移液中,用一玻璃棒將濾紙壓平,濾紙與玻璃板間不得有氣泡, 2)將瓊脂糖凝膠
免疫印跡法的基本操作和介紹
SDS-PAGE和免疫印跡 一：蛋白質的提取 1、取出細胞，倒去培養液，用PBS洗滌細胞一次，充分除去PBS液體，把細胞置于冰上。配置細胞裂解液，細胞裂解液用滅菌水配置，然后按照1：100比例加入PMSF混勻，然后按照細胞的多少加入裂解液于培養瓶中，在冰上放置20min。在此期間每隔3-5m
免疫印跡法的基本原理介紹
與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生
關于蛋白質印跡法的分類介紹
Western Blot顯色的方法主要有以下幾種： 1、放射自顯影 2、底物化學發光ECL 3、底物熒光ECF 4、底物DAB呈色 現常用的有底物化學發光ECL和底物DAB呈色，體同水平和實驗條件的是用第一種方法，發表文章通常是用底物化學發光ECL。只要買現成的試劑盒就行，操作也比較簡