數字PCR在CRISPRCas9基因編輯結果驗證的應用
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Nacia數字PCR在基因表達分析中的應用
華盛頓大學醫學院兒科和加利福尼亞大學圣地亞哥分校醫學院兒科的研究人員建立了一個穩定可靠的基于RNA磁珠提取和數字PCR的方法，可從糞便樣本中檢測與EE（熱帶腸病）關聯的人mRNA，靈敏度可達20拷貝GAPDH mRNA/200mg糞便樣本。已有報道表明病人糞便中存在人mRNA，可作為反應病人消化道病
數字PCR在臨床和預后融合基因檢測的應用
眾所周知，融合基因檢測對臨床診斷及預后指導都具有十分重要的意義。那么究竟什么是融合基因呢？融合基因的發現始于上個世紀60年代，它是指染色體斷裂后又重新拼接。如果恰巧拼接時發生了錯誤，使兩個不同基因互相融合，大多數情況下，它會造成某些序列或功能異常的蛋白表達，亦或者是某些基因表達失調，從而促進腫瘤的發
CRISPR-Cas9基因編輯的兩種不同編輯實驗流程的應用（一）
IDT Alt-R? CRISPR-Cas9基因編輯系統?IDT（Integrated DNA Technologies）作為核酸定制合成領域的知名企業，依托30年來的技術研發，推出了Alt-R?系列CRISPR-Cas9基因編輯產品，通過對gRNA序列、Cas9核酸酶優化，對RNP轉染效率、同
CRISPR-Cas9基因編輯的兩種不同編輯實驗流程的應用（三）
Alt-R? CRISPR-Cas9實例分析1、特別優化的crRNA/tracrRNA/sgRNA長度，提高編輯性能以HPRT基因中的12個位點為靶點，分別使用Alt-R? crRNA:tracrRNA、Alt-R? crRNA XT:tracrRNA、Alt-R? sgRNA，與Alt-R?
CRISPR-Cas9基因編輯的兩種不同編輯實驗流程的應用（二）
【方法二】1、（用IDT工具）設計sgRNA，使其Spacer與DNA靶序列互補，提交給IDT定制合成sgRNA；2、將sgRNA與Cas9蛋白混勻，形成RNP；3、將RNP通過電轉染等導入細胞或細胞核；4、通過sgRNA的Spacer識別DNA靶序列，通過Cas9蛋白識別PAM序列，對DNA進行剪
數字PCR在食品安全檢測的應用
食品安全日益成為一個重要的公共衛生問題, 受到社會及國家的高度重視。食源性疾病、食品原料造假、轉基因食品等逐漸呈現出普遍增長的趨勢。食源性疾病是指通過攝食而進入人體的有毒有害物質等致病因子所造成的疾病。比如常見的食物中毒、腸道傳染病、人畜共患傳染病、寄生蟲病等。食源性疾患的發病率居各類疾病總發病率的
數字PCR在病毒臨床檢測中的應用
概述2015年剛成歷史，2016年已在眼前。就這樣，年復一年間滄海成桑田。生命科學領域，新方法層出不窮，老方法不斷升級，好不熱鬧。也如孔子的感嘆：逝者如斯夫，不舍晝夜。就拿PCR技術來說，熒光定量PCR作為一種進行基因表達分析的技術，截至目前最大的應用市場是病原微生物的核酸體外診斷。展望未來，作為q
基因編輯在腎臟疾病中的應用
英國紐卡斯爾大學的研究人員在細胞和小鼠模型中表明，基因編輯可用于Joubert綜合征，以阻止攜帶CEP290缺陷基因對患者腎臟造成損害。Joubert綜合征是一種腦部疾病，引起不同程度的身體、精神和視覺障礙。大約80000個新生兒中有一個會得這種病，其中的三分之一患者會導致腎衰竭。 并非所有J
數字PCR在精準醫學領域的十大應用
數字PCR是一種新的核酸檢測和定量方法，借助微液滴或微坑，通過單個模板分子的PCR擴增，可實現不依賴于標準曲線和參照樣本的準確、絕對定量。數字PCR使得反應更靈敏、結果更可靠、展示更直觀，尤其適用于微量或痕量DNA檢測與定量。下面我們就目前已經比較明確的數字PCR應用方向做個介紹。基因表達差異研究數
基因編輯工具CRISPR-Cas9遭遇新挫折！
在一項新的研究中，來自德國明斯特大學的研究人員發現，在小鼠進行常規的CRISPR-Cas9基因插入過程中，不必要的DNA重復頻率很高。相關研究結果發表在2020年2月21日的Science Advances期刊上，論文標題為“Pervasive head-to-tail insertions o