microRNA檢測的引物設計中頸環法同polyA加尾法有何區別？
行使功能的microRNA成熟形式一般僅18——25nt，因此在逆轉錄環節通過特定引物增加其長度，以便于qPCR過程正常進行。頸環法中的逆轉錄引物由自身可形成頸環結構的通用序列加上目的microRNA 3’端堿基的反向互補序列；polyA加尾法即在逆轉錄前先加polyA尾，然后通過oligo(dT)引物進行逆轉錄。方法設計及實驗成本均高于加尾法，但在檢測靈敏度及特異性方面具有優勢。......閱讀全文
microRNA檢測的引物設計中頸環法同polyA加尾法有何區別？
行使功能的microRNA成熟形式一般僅18——25nt，因此在逆轉錄環節通過特定引物增加其長度，以便于qPCR過程正常進行。頸環法中的逆轉錄引物由自身可形成頸環結構的通用序列加上目的microRNA 3’端堿基的反向互補序列；polyA加尾法即在逆轉錄前先加polyA尾，然后通過oligo(dT)
做miRNA的PCR的方法介紹
加尾法和莖環法加尾法，是指把miRNA再人工加一個polyA的尾巴，這樣它的結構就變長，有點象是典型的mRNA結構。很多公司提供有現成的miRNA加尾法逆轉錄試劑盒。按常規方法提取總RNA，用于逆轉錄。做完逆轉錄后，可參考的方法去做PCR。注意，這時的PCR需要的上下游引物，一般是上游引物就直接用m
干濕氧法濕度儀和阻容法濕度儀的有何區別
干濕氧法濕度儀和阻容法濕度儀的有何區別 干濕氧法濕度儀和阻容法濕度儀的有何區別：上海久尹科技研發生產的煙氣濕度儀有電容式（阻容法）和陶瓷感濕（干濕氧），本文主要講講干濕氧法濕度儀和阻容法濕度儀的有何區別？ 阻容法濕度儀：一體化設計，安裝方便，減少外部干擾對測量值的影響；高精度的
熒光分析法與吸光光度法有何區別
恰好這也是我的儀器分析作業，剛剛寫好了。1.原理方面：相同點：吸光光度法和熒光分析法都是分子光譜。不同點：吸光光度法是由分子對輻射能選擇性吸收由基態或較低能級躍遷到較高能級產生的分子光譜，是分子吸收光譜；而熒光分析法是由分子對輻射能選擇性吸收由基態躍遷到單重激發態，當由其第一激發單重態的最低振動能級
容量法和庫侖法卡爾費休滴定之間有何區別？
滴定劑(主要是活性物質碘)既可以通過一個滴定管直接添加到被測樣品中(容量法),也可以在滴定杯中通過電化學電解產生(電量法/庫侖法)。卡爾費休庫侖法滴定儀主要應用于根據卡爾費休方法測定含水量很低的水分含量,如小于50-100 ppm(0.005-0.01%)的含水量。
熒光分析法與吸光光度法有何區別
1.原理方面：相同點：吸光光度法和熒光分析法都是分子光譜。不同點：吸光光度法是由分子對輻射能選擇性吸收由基態或較低能級躍遷到較高能級產生的分子光譜，是分子吸收光譜；而熒光分析法是由分子對輻射能選擇性吸收由基態躍遷到單重激發態，當由其第一激發單重態的最低振動能級回到基態各振動能級間的躍遷所產生的分子光
qpcr原理及流程
一、QPCR原理“qpcr原理是一種在DNA擴增反應中，以熒光化學物質測每次聚合酶鏈式反應（PCR）循環后產物總量的方法；應用于對PCR進程進行實時檢測。檢測方法：加尾法和頸環法miRNA很短，用mRNA的反轉錄方法無法得到足以定量的cDNA。所以，miRNA的反轉要求將miRNA序列進行延長，目前
反相與正相色譜法有何區別
反相還是正相，是根據流動相相對于固定相的極性而言的。 流動相極性強于固定相的，稱作反相色譜；流動相極性弱于固定相的，稱作正相色譜。反相色譜流動相的極性強，容易帶著極性分子走，而留下非極性分子。這主要用于非極性樣品的分離。常用的高壓液相色譜都是這種，也有人喜歡說反相液相色譜，其實是一個意思，就是顯得博
物理氣相沉積法與化學氣相沉積法有何區別
物理氣相沉積法可以看作是物理過程，實現物質的轉移，最終沉積到靶材上面。化學氣相沉積法是在一定條件下通過化學反應，形成所需物質沉積在靶材或者基材表面。
物理氣相沉積法與化學氣相沉積法有何區別
物理氣相沉積法與化學氣相沉積法有3點不同，相關介紹具體如下：一、兩者的特點不同：1、物理氣相沉積法的特點：物理氣相沉積法的沉積粒子能量可調節，反應活性高。通過等離子體或離子束介人，可以獲得所需的沉積粒子能量進行鍍膜，提高膜層質量。通過等離子體的非平衡過程提高反應活性。2、化學氣相沉積法的特點：能得到
物理氣相沉積法與化學氣相沉積法有何區別
物理氣相沉積法與化學氣相沉積法有3點不同，相關介紹具體如下：一、兩者的特點不同：1、物理氣相沉積法的特點：物理氣相沉積法的沉積粒子能量可調節，反應活性高。通過等離子體或離子束介人，可以獲得所需的沉積粒子能量進行鍍膜，提高膜層質量。通過等離子體的非平衡過程提高反應活性。2、化學氣相沉積法的特點：能得到
氣相色譜儀的內標法和外標法有何區別？
??氣相色譜儀的內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質，它可被色譜拄所分離，又不受試樣中其它組分峰的干擾，只要測定內標物和待測組分的峰面積與相對響應值，即可求出待測組分在樣品中的百分含量。采用內標法定量時，內標物的選擇是一項十分重要的工作。理想地說，內
內標法有何優點
內標法和外表法比較各有什么特點？如何應用？答：內標法的優點是測定的結果較為準確，由于內標物與被測組分的峰面積的比值不受進樣量波動影響，因而在一定程度上消除了操作條件等的變化所引起的誤差。內標法的缺點是操作程序相對煩瑣，每次分析時內標物和試樣都要準確稱量，有時尋找合適的內標物也有困難。外標法簡便，但要
內標法有何優點
內標法和外表法比較各有什么特點？如何應用？答：內標法的優點是測定的結果較為準確，由于內標物與被測組分的峰面積的比值不受進樣量波動影響，因而在一定程度上消除了操作條件等的變化所引起的誤差。內標法的缺點是操作程序相對煩瑣，每次分析時內標物和試樣都要準確稱量，有時尋找合適的內標物也有困難。外標法簡便，但要
吸光光度法和分光光度法有何區別
吸光光度法原來特指現在的分光光度法，因為那時剛有分光光度計，把分辨程度較低的目視比色用儀器進行，更科學更精細。而分光光度法，其實紅外和紫外也在分析時對光源來的光線進行分光，由于都是后來出現的，所以就把分光光度法這個現在看來頗有些籠統的稱呼指給了儀器比色法，其它的都加上其性質為定語做區別。吸光光度法其
染料法與探針有何區別及優劣勢？
? ? 染料法以SYBR Green熒光強度的大小為指標來檢測DNA的擴增，不需探針法中設計合成熒光標記探針，因此染料法實驗周期及成本都得以降低。染料法可能會檢測出引物二聚體等非特異擴增產物，需要通過進行融解曲線分析來確認反應產物是否特異性擴增，同時在引物設計及反應條件方面都需注意優化。探針法相對較
普通pcr引物設計和熒光定量pcr引物設計的區別
一、方法不同1、普通pcr引物設計：引物的優劣直接關系到PCR的特異性與成功與否。2、熒光定量pcr引物設計：通過熒光染料或熒光標記的特異性探針，標記跟蹤PCR產物進行實時監測反應，利用與之相適應的軟件對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度二、原理不同1、普通pcr引物設計：為了找到一對合適的核
同聚物加尾法的概念
所謂同聚物加尾法就是利用末端轉移酶在載體及外源雙鏈DNA的3’端各加上一段寡聚核苷酸，制成人工黏性末端，外源DNA和載體DNA分子要分別加上不同的寡聚核苷酸，如dA(dG)和dT(dC),然后在DNA連接酶的作用下連接成為重組的DNA。
隨機引物法
此法系可用于從低熔點瓊脂糖凝膠中回收 DNA 的放射性標記 ( Feinberg 和 Vogelstein 1983，1984)。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理此法系可用于從低熔點瓊脂糖凝膠中回收 DNA 的放射性標記 ( Feinberg 和 Vogelstein 1
同聚物加尾法的方法核心
這種方法的核心是利用末端轉移酶的功能，將核苷酸轉移到雙鏈DNA分子的突出或隱蔽的3'-OH上。以Mg作為輔助因子，該酶可以在突出的3'-OH端逐個添加單核苷酸，如果用Co作輔助因子則可在隱蔽的或平末端的3'-OH端逐個添加單個核苷酸。
分光光度法和紫外分光光度法有何區別
分光光度法是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內的光吸收度，對該物質進行定性和定量分析的方法。 1. 基本原理 單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，即朗伯 - 比爾定律，這是吸收光譜法定量的理論依據，其關系式如式 3-1 ： A = E
引物設計的引物設計原則
1、引物長度一般為15-30bp，常用的為18-27bp，但不能大于38bp；2、引物GC含量一般為40%-60%，以45-55%為宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近；3、引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之間，Tm值曲線以選取72度附近為佳，5'到 3
引物設計的引物設計原則
1、長度：15—30bp，其有效長度[Ln=2(G十C)十(A十T)]一般不大于38，否則PCR的最適延伸溫度會超過Taq酶的最佳作用溫度(74度)，從而降低產物的特異性。2、G十C含量：應在40%一60%之間，PCR擴增中的復性溫度一般較Tm值低等于引物的Tm值減去5—10度。引物長度小于20時，
引物設計的引物設計原則
1、引物長度一般為15-30bp，常用的為18-27bp，但不能大于38bp；2、引物GC含量一般為40%-60%，以45-55%為宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近；3、引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之間，Tm值曲線以選取72度附近為佳，5'到 3
引物設計的引物設計原則
1、引物長度一般為15-30bp，常用的為18-27bp，但不能大于38bp；2、引物GC含量一般為40%-60%，以45-55%為宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近；3、引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之間，Tm值曲線以選取72度附近為佳，5'到 3
引物設計和探針設計有什么區別
引物設計和探針設計（即熒光探針）有3點不同，相關介紹具體如下：一、兩者的用途不同：1、引物設計的用途：用于PCR擴增技術。2、探針設計的用途：用于標記待定的核苷酸片斷，用與特異性地、定量地檢測核酸的量。二、兩者的實質不同：1、引物設計的實質：一小段單鏈DNA或RNA，在核酸合成反應時，作為每個多核苷
Realtime同電泳檢測產物的PCR有何優勢？
?Real-time qPCR通過熒光信號在每個反應循環終點檢測，反應指數增長期，可以真實監測模板起始量，線性范圍可達5——7個數量級；而終點法重復性不佳、線性范圍較窄，且產物電泳檢測受限于片段大小和凝膠分辨率、膠染料靈敏度等因素，線性范圍在100-fold左右。
同聚物加尾法的方法優缺點
同聚物加尾法優點:?1)首先不易自身環化.?2)因為載體和外源片段的末端是互補的黏性末端，所以連接效率較高.3)用任何一種方法制備的DNA都可以用這種方法進行連接.缺點：(1)方法繁瑣；(2)外源片段難以回收。由于添加了許多同聚物的尾巴，可能會影響外源基因的表達.重組連接后往往會產生某種限制性內切核
原子熒光法和原子吸收法有何異同
異：原子熒光法是利用基態原子吸收輻射至高能態，再產生的熒光來判斷元素組成，原子吸收法是利用原子吸收特定頻率的光輻射判斷元素組成。同：都是利用原子的光譜判斷。
原子熒光法和原子吸收法有何異同
原子吸收分光光度法是基于基態原子對共振光的吸收：而原子熒光光度是處于激發態原子向基態躍遷，并以光輻射形式失去能量而回到基態。而且這個激發態是基態原子對共振光吸收而躍遷得來的。因此，原子熒光包含了兩個過程：吸收和發射。色散系統：較之原子吸收熒光譜線更少，光譜干擾也少，所以可以用低分辨力的分光系統甚至于