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  • 關于HLA分型的DNA分型方法介紹

    DNA分型主要分為兩種方法:基于核酸序列識別的方法和基于序列分子構型的方法,常用的方法大致可分為大類: ①限制性片段長度多態性分析(restriction fragment length polymorphism,RFP)。其原理是不同的DNA膜板山于序列的差異在限制性內切酶作用下將被切成大小不同的片段,其電泳遷移率也發生差異,經電泳分離、印跡、探針雜交等一系列技術處理來分析目的基因。 ②聚合酶鏈式反應寡核苷酸探針雜交方法PCR-SSO(sequence specifie oligonucleotide,SSO)。原理是PCR基因片段擴增后利用序列特異性寡核苷酸探針,通過雜交的方法進行擴增片段的分析鑒定。 ③聚合酶鏈式反應單鏈構象多態性分析(PCR -single strand conformational polymorphism,PCR-SSCP)。PCR產物經變性為DNA單鏈,用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離,只有一個核......閱讀全文

    關于HLA分型的DNA分型方法介紹

      DNA分型主要分為兩種方法:基于核酸序列識別的方法和基于序列分子構型的方法,常用的方法大致可分為大類:  ①限制性片段長度多態性分析(restriction fragment length polymorphism,RFP)。其原理是不同的DNA膜板山于序列的差異在限制性內切酶作用下將被切成大小

    HLA分型方法

    1.淋巴細胞毒試驗 為HLA抗原分型常用方法。2.混合淋巴細胞培養試驗本方法多用于組織相容性方面的研究,臨床上主要用于器官移植。3.分子生物學技術一類是PCR為基礎的基因分型。另一類是以測序為基礎的基因分型。

    關于HLA分型高分辨分型應用的介紹

      1、地中海貧血治療  2、造血干細胞移植異基因造血干細胞移植是現能根治重型Β地貧的方法。如有HLA相配的造血干細胞供者,應作為治療重型Β地貧的首選方法。  3、急性白血病,骨髓移植。  4、對ANLL療效較好。  ①同基因骨髓移植,供者為同卵孿生子。  ②同種異基因骨髓移植,供者為患者的兄弟姐妹

    HLA的分型方法

     HLA的分型方法是檢驗主管技師考試要求掌握的內容,醫學教育網搜集整理相關內容供大家參考。   1.淋巴細胞毒試驗:為HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴細胞膜上的HLA抗原與相應抗體結合后,在補體作用下,細胞膜損傷,細胞溶解破裂被染色,計算顯微鏡下觀察著色細胞的百分率(>20%為陽性反應)。Ⅰ類抗原

    HLA分型的方法

    ①淋巴細胞毒試驗:為HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴細胞膜上的HLA抗原與相應抗體結合后,在補體作用下,細胞膜損傷,細胞溶解破裂被染色,計算顯微鏡下觀察著色細胞的百分率(>20%為陽性反應)。Ⅰ類抗原分型時可用T淋巴細胞或外周血淋巴細胞;進行Ⅱ類抗原分型時需用B淋巴細胞。②混合淋巴細胞培養試驗:多

    關于HLA高分辨分型的介紹

      過去治療白血病通常是通過骨髓移植進行的,由于必須在麻醉狀態下抽取骨髓捐獻者的部分骨髓,整個過程對捐獻者產生非常大的心理壓力。現隨著科學進步,只需抽取若干毫升靜脈血,分離出干細胞,再輸入患者體內即可。首先抽取患者和捐獻者的靜脈血樣本,提取DNA,測出各自DNA堿基的順序,最后通過軟件比對分析得出H

    HLA分型技術

    HLA分型技術主要組織相容性復合物(MHC)是脊椎動物體內最復雜且具有高度多態性的基因群。1984年George Snell 首次發現小鼠MHC即H-2,1958年Dausset 發現了人的MHC即HLA基因。MHC的表達產物稱為主要組織相容性抗原,MHC抗原是有核細胞表面膜蛋白分子,對抗原遞呈和免

    HLA有哪些分型方法?

    ①淋巴細胞毒試驗:為HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴細胞膜上的HLA抗原與相應抗體結合后,在補體作用下,細胞膜損傷,細胞溶解破裂被染色,計算顯微鏡下觀察著色細胞的百分率(>20%為陽性反應)。Ⅰ類抗原分型時可用T淋巴細胞或外周血淋巴細胞;進行Ⅱ類抗原分型時需用B淋巴細胞。②混合淋巴細胞培養試驗:多

    HLA的分型方法有什么?

      ①淋巴細胞毒試驗:為HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴細胞膜上的HLA抗原與相應抗體結合后,在補體作用下,細胞膜損傷,細胞溶解破裂被染色,計算顯微鏡下觀察著色細胞的百分率(>20%為陽性反應)。Ⅰ類抗原分型時可用T淋巴細胞或外周血淋巴細胞;進行Ⅱ類抗原分型時需用B淋巴細胞。  ②混合淋巴細胞培養

    關于HLA分型的基本信息介紹

      HLA分型 (HUMAN LEUCOCYTE ANTIGEN),即人類白細胞抗原)是一個由一系列緊密連鎖的基因座位所組成的具有高度多態性的復合體。主要組織相容性復合體(major histocompatibility complex,MHC)是由染色體上一組編碼與細胞間識別和抗原呈遞相關蛋白的高

    關于HLA分型的技術發展介紹

      HLA系統研究從70年代到80年代末期主要是血清學研究,90年代以來,HLA進入了分子水平研究階段。HLA分型技術同樣走過了這一歷程。建立于60年代的血清學及細胞學分型技術主要側重于分析HLA產物特異性。1991年第11屆國際HLA專題討論上提出了HLA的DNA分型方法,隨著測序技術的突飛猛進,

    關于HLA高分辨分型優勢的介紹

      HLA高分辨分型技術與過去的低分辨相比配型速度更快,配型更精確,使得移植排斥反應更小,手術成功率和術后存活率更高。  隨著醫學的發展,像白血病、地中海貧血等能用最新的基因技術進行分型檢測,再尋找合適的供體進行移植治療。現通過HLA高分辨分型的外周血干細胞移植技術能大大提高配型效果,使患者的康復更

    HLA分型的血清學方法介紹

      1964Terasaki建立了HLA微量淋巴胞毒實驗方法來分析受試者的HLA型別,其主要過程是從全血或淋巴組織中分離出淋巴細胞,與HLA-特異性抗體包被的微孔板孵育,加入補體,使能與淋巴細胞表面HA抗原結合的特異性抗體通過經典途徑激活補體,導致靶細胞水解(淋巴細胞毒性)。多年來這種血清學方法是確

    HLA分型技術(二)

    ? (二)PCR/SSO技術  此法乃用人工合成的HLA型別特異的寡核苷酸序列作為探針,與待檢細胞經PCR擴增的HLA基因片段雜交,從而確定HLA型別,PCR技術可將HLA復合體上指定基因片段特異性地擴增5~6個數量級;而專門設計的SSO(序列特異的寡核苷酸sequencedpecific ol

    HLA分型技術(一)

    ? HLA分型并不只是一種應用性的臨床檢測指標,免疫遺傳學研究的發展,很大程度上依賴于以分型為主要手段的HLA多態性分析。60年代建立的并不斷完善的血清學及細胞學分型技術主要側重于分析HLA產物特異性;80年代起建立的DNA分型方法則側重于基因的分型。  一、血清學分型技術  (一)HLA-Ⅰ類抗原

    HLA基因分型方法:RFLP法

    RFLP法1)常規制備DNA鹽析法1.用淋巴細胞分離液從抗凝血中分離出白細胞。2.每3ml細胞懸液加10ml紅細胞裂解液溶解紅細胞兩次,再加2ml白細胞裂解液溶解白細胞。3.加50μl 10%?SDS和70μl蛋白酶K消化蛋白質,37℃過夜或55℃?3h。4.加0.25體積飽和醋酸鈉溶液,劇烈搖動1

    HLA細胞法分型試驗介紹

    HLA細胞法分型試驗介紹:HLA-D和DP位點的抗原須用細胞法分型進行鑒定,所以又稱LD抗原,其鑒定方法普遍采用混合淋巴細胞培養,也稱混合淋巴細胞反應。1.試驗方法將分離的反應細胞(通常是患者的淋巴細胞)與刺激細胞(通常是供者或已知的標準淋巴細胞)配制成1×106/ml濃度的懸液,各加0.2ml到反

    HLA細胞法分型試驗介紹

    HLA細胞法分型試驗介紹: HLA-D和DP位點的抗原須用細胞法分型進行鑒定,所以又稱LD抗原,其鑒定方法普遍采用混合淋巴細胞培養,也稱混合淋巴細胞反應。 1.試驗方法將分離的反應細胞(通常是患者的淋巴細胞)與刺激細胞(通常是供者或已知的標準淋巴細胞)配制成1×106/ml濃度的懸液,各加0.

    HLA分型的常用方法有哪些?

    1.分子生物學技術: 一類是PCR為基礎的基因分型,一類是以測序為基礎的基因分型。2.淋巴細胞毒試驗: 為HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴細胞膜上的HLA抗原與相應抗體結合后,在補體作用下,細胞膜損傷,細胞溶解破裂被染色,計算顯微鏡下觀察著色細胞的百分率(>20%為陽性反應)。Ⅰ類抗原分型時可用T

    HLA分型的基本信息介紹

      HLA(humanleucocyteantigen)復合體是人類多態性最豐富的遺傳系統,定位于第6號染色體短臂6P21.31區,長3600kb。1999年已完成全部序列分析及基因定位,在此區域內共確認了224個基因座位中128個為功能性基因,其中39.8%和免疫功能相關。HLA基因根據其編碼分子

    關于HLA基因復合體的分型技術介紹

      HLAⅠ類抗原的DQ、DR用血清學檢測法進行分型,因此在方法學上稱為血清學鑒定的抗原(serologicallydefinedantigen,SD抗原);DP和D特性需用細胞學方法進行檢測,因此稱為淋巴細胞鑒定的抗原(lymphocytedefinedantigen,LD抗原)。雖然HLA的基因

    HLA基因分型方法:PCR-SSCP法

    PCR-SSCP法1)提取DNA同前RFLP法?2)PCR擴增同前PCR-RFLP,也可加入1μCi32P-dCTP標記產物。?3)非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳1.取PCR的擴增產物,加凝膠加樣液3μl,95℃加熱變性2min,冰浴驟冷。同位素摻入的DNA取1μl稀釋10倍,加樣3μl。2.取樣品用微量

    HLA基因分型方法:PCR-RFLP法

    PCR-RFLP法1)提取細胞總DNA方法同前。?2)PCR擴增引物的設計1.引物長度一般為15~30bp,G+C含量應在45%~55%之間。2.應避免連續出現4個以上的單一堿基。3.不能含有自身互補序列。4.兩個引物之間不應有多于4個的互補或同源堿基,不然會形成引物二聚體。5.與非特異擴增序列的同

    HLA基因分型方法:PCR-SSP法

    PCR-SSP法1)提取DNA同前RFLP法?2)PCR擴增操作方法基本同PCR-RFLP,但引物是根據各等位基因的核苷酸序列設計的特異性引物,主要是針對第二外顯子區域的多態性,用SSP擴增出來的產物具等位基因特異性。?3)凝膠電泳取PCR擴增的產物與上樣緩沖液混合,加入2%瓊脂糖凝膠加樣孔中,其內

    HLA細胞法分型試驗簡介

    HLA-D和DP位點的抗原須用細胞法分型進行鑒定,所以又稱LD抗原(lymphocytedefinedantigen),其鑒定方法普遍采用混合淋巴細胞培養(mixedlymphocyteculture,MLC),也稱混合淋巴細胞反應(mixedlymphocytereaction,MLR)。1.試驗

    HLA細胞法分型試驗簡介

    HLA-D和DP位點的抗原須用細胞法分型進行鑒定,所以又稱LD抗原(lymphocytedefinedantigen),其鑒定方法普遍采用混合淋巴細胞培養(mixedlymphocyteculture,MLC),也稱混合淋巴細胞反應(mixedlymphocytereaction,MLR)。

    簡述HLA低分辨分型的內容

      采用序列特異性引物擴增HLA等位基因的特異性片段,經電泳分離,根據PCR結果的反應格局具判斷被測標本的HLA等位基因型,具有通量大、正確性好的特點。反映了HLA抗原水平的等位基因類型,用于骨髓、器官移植組織配型的初篩。

    關于唇裂的分型介紹

      1.唇裂按裂隙部位可分為  (1)單側唇裂 分為不完全型和完全型。  (2)雙側唇裂 不完全型、完全型和混合型即一側完全一則不完全型。  2.按裂隙程度分為  (1)Ⅰ度 唇裂只限于紅唇裂開。  (2)Ⅱ度 唇裂為上唇部分裂,未裂至鼻底。淺Ⅱ度為裂隙未超過唇高的1/2;深Ⅱ度為裂隙超過唇高的1/

    關于貼附型細胞的分型的介紹

      1.成纖維型細胞:(fibroblast) 來自中胚層  特點:與體內成纖維細胞形態相似,胞體梭型或不規則三角形,中央有圓形核,胞質向外伸出2~3個長短不同的突起。細胞在生長時呈放射狀,漩渦或火焰狀走行。  起源:細胞來自中胚層間充質組織。  除真正的成纖維細胞、心肌、平滑肌、成骨細胞、血管內皮

    HP分型檢測的分型

      幽門螺桿菌(Hp)可以分泌毒素損壞人體細胞,引起炎癥、潰瘍及腫瘤等。依據其分泌毒素的情況不同,可以將其分為產細胞毒素和非產細胞毒素兩大類;能產生毒素的為I型,不能產生毒素的是II型。  不同類型的幽門螺桿菌毒力  Ⅰ型HP由于產生細胞毒素,因此有較強的毒性,與胃十二指腸潰瘍、MALT淋巴瘤及胃癌

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