反向引物的概念
反向引物(下游引物)是沿著正鏈進行延長的。體外擴增DNA,雙螺旋是部分或完全打開的,不存在岡崎片段,也不會一段段延長,理論上正反引物都是不間斷延長的,和體內DNA自我復制是有區別的。......閱讀全文
反向引物的概念
反向引物(下游引物)是沿著正鏈進行延長的。體外擴增DNA,雙螺旋是部分或完全打開的,不存在岡崎片段,也不會一段段延長,理論上正反引物都是不間斷延長的,和體內DNA自我復制是有區別的。
PCR中正向引物和反向引物的概念和具體作用
正向引物和反向引物是相對的,通常以一個雙鏈DNA(上面的那條鏈)的上游結合部位稱為正向引物,是從左到右的方向,也就是5-3的方向,而下面那條互補鏈的下游結合部位稱為反向引物。其方向是從右到左的,因為下面的鏈的方面從左到右是3-5,從右到左就是5-3了,PCR的擴增的確是一條引物就可以擴增了。反向引物
反向PCR引物設計的原理
可以這樣來說吧,首先你應該有一條已知的序列,反向引物設計時在序列的5'方向找一段序列然后反向互補作為反向引物,在3'方向直接找一段序列作為正向引物。這樣就OK了,這是引物的設計,至于其他條件可以參考相關文獻.
反向透析的概念
中文名稱反向透析英文名稱reverse dialysis定 義將樣品置于透析袋內,再將透析袋放到具有強吸水性的高分子多聚物粉末或濃溶液中,即可將袋內水分吸出的一種大分子溶液濃縮方法。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
反向信號傳送的概念
反向信號傳送即反向信號傳遞,反向信號傳遞(reverse signaling)現象正逐漸受到人們的關注。簡言之,即可溶性受體或膜表面受體與表達在細胞膜表面的相應配體結合后,傳遞信號至配體細胞內,并引發相應的生物學效應。由于與傳統的正向信號相反,故而得名。
簡并引物的概念
簡并引物是指代表編碼單個氨基酸所有不同堿基序列可能性引物的混合物。PCR為了增加特異性,可以參考密碼子使用表,根據不同生物的堿基使用偏好,減少簡并性。簡并度越低,產物特異性越強,設計引物時應盡量選擇簡并性小的氨基酸,并避免引物3’末端簡并。
引物修補的概念
中文名稱引物修補英文名稱primer repair定 義當DNA模板受損時,可根據其損傷情況,以一套或幾套引物借助核酸聚合酶的作用合成新的互補核酸鏈,以修復損傷形成的錯誤序列的方法。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
引物延伸的概念
中文名稱引物延伸英文名稱primer extension定 義從與模板(RNA或DNA)結合的引物3′-OH端開始,在核酸聚合酶的作用下,按照堿基配對的原則,逐個連上核苷酸,由5′→3′方向合成與模板互補鏈的過程。該反應可用于聚合酶鏈反應、單核苷酸多態性檢測等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學
正向引物的概念
中文名稱正向引物英文名稱forward primer定 義處于DNA雙鏈上游的引物。如用于測序,則從5′向3′方向讀出DNA正鏈的序列。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
反向PCR引物設計需要同源臂嗎
需要。用pcr擴的時候就把同源重組片段引入,vector酶切后5端選15nt,3'端選15nt分別加到正向引物和反向引物上,就做成了同源臂。同源序列是指在同一物種不同個體間或不同物種間相同或相似的DNA序列,而同源臂是指一段同源序列,類似于trna氨基酸臂的結構,所謂臂,指的是手臂樣結構。引
反向間接凝集反應的概念
反向間接凝集反應,利用抗體致敏顆粒檢測可溶性的抗原。
反向間接凝集反應的概念
反向間接凝集反應,利用抗體致敏顆粒檢測可溶性的抗原。
引物步移的概念
中文名稱引物步移英文名稱primer walking定 義一種長鏈DNA測序的策略。根據已測出的序列結構設計測序引物,按第一輪測序得出的新序列,再設計引物進行第二輪測序,如此重復,直至獲得全序列。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
巢式引物的概念
中文名稱巢式引物英文名稱nested primer定 義為巢式聚合酶鏈反應所設計的引物,第二組引物是在第一組引物擴增得到的產物序列范圍內設計的。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
通用引物的概念和作用
通用引物是一般和載體多克隆位點兩旁的序列匹配,或者是與載體里面的一些啟動、終止元件匹配。這樣不管載體插入什么DNA片段,都可以用通用引物擴出來。通用引物可以用來測序,但是只是“通用”,也不是萬能的。
隨機引物的概念和用途
隨機引物是指當特定mRNA由于含有使逆轉錄酶終止的序列而難于拷貝其全長序列時,可采用隨機六聚體這一不特異的引物來拷貝全長mRNA。用此種方法時,體系中所有RNA分子全部充當了cDNA第一鏈模板,PCR引物在擴增過程中所需要的特異性通常用此引物合成的cDNA。
序列特異性引物的概念
中文名稱序列特異性引物英文名稱sequence specific primer;SSP定 義一種測定基因突變的方法。即利用針對點突變的2個等位特異性寡核苷酸(ASO)引物(A、B標記其中之一)與另一共同引物(C)組成引物系統;在引物延伸時,A與B同時競爭靶序列上同一復性位點,擴增反應后,經凝膠電泳
序列特異性引物的概念
中文名稱序列特異性引物英文名稱sequence specific primer;SSP定 義一種測定基因突變的方法。即利用針對點突變的2個等位特異性寡核苷酸(ASO)引物(A、B標記其中之一)與另一共同引物(C)組成引物系統;在引物延伸時,A與B同時競爭靶序列上同一復性位點,擴增反應后,經凝膠電泳
什么是反向-PCR?反向-PCR的特點
常規 PCR 是擴增兩引物之間的 DNA 片段,反向 PCR(reverse PCR)是用引物來擴增兩引物以外的 DNA 片段。一般先用限制性內切酶酶解 DNA(目的基因中不存在該酶的酶切位點,且片段應短于2~3kb),然后用連接酶使帶有黏性末端的靶片段自身環化,最后用一對反向引物進行 PCR,得到
反向PCR
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 標準 PCR 技術應用于定位在兩個引物之間(指向內部)的一段 DNA 片段的擴增。與此相反,反向 PCR (inverse PCR) 應用于擴增和克隆與已知 DNA 序列某一個末端相鄰的側翼的未知 DNA 序列,這種未知
反向PCR
主要內容如下:·?????????RT-PCR·?????????Competitive and Quantative RT-PCR·?????????In Situ RT-PCR·?????????RL-PCR·?????????DNA Contamination·?????????RT-PCR
反向PCR
實驗方法原理?標準 PCR 技術應用于定位在兩個引物之間(指向內部)的一段 DNA 片段的擴增。與此相反,反向 PCR (inverse PCR) 應用于擴增和克隆與已知 DNA 序列某一個末端相鄰的側翼的未知 DNA 序列,這種未知序列沒有引物可以利用。該項技術由幾個研究小組開發(Ochm
反向PCR
標準 PCR 技術應用于定位在兩個引物之間(指向內部)的一段 DNA 片段的擴增。與此相反,反向 PCR (inverse PCR) 應用于擴增和克隆與已知 DNA 序列某一個末端相鄰的側翼的未知 DNA 序列,這種未知序列沒有引物可以利用。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原
反向調節的定義
反向調節(Restroregulation):下游基因對上游基因活性的反饋調節作用。
反向透析的定義
中文名稱反向透析英文名稱reverse dialysis定 義將樣品置于透析袋內,再將透析袋放到具有強吸水性的高分子多聚物粉末或濃溶液中,即可將袋內水分吸出的一種大分子溶液濃縮方法。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
反向PCR的原理
反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色體序列,因此又可稱為染色體緩移或染色體步移。這時選擇的引物雖然與核心DNA區兩末端序列互補,但兩引物3’端是相互反向的。擴增前先用限制性內切酶酶切樣品DNA,然后用DNA連接酶連接成一個環狀DNA分子,通過反向PCR擴增引物的上游片段和下游片段;現
反向pcr的原理
反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色體序列,因此又可稱為染色體緩移或染色體步移。這時選擇的引物雖然與核心DNA區兩末端序列互補,但兩引物3’端是相互反向的。擴增前先用限制性內切酶酶切樣品DNA,然后用DNA連接酶連接成一個環狀DNA分子,通過反向PCR擴增引物的上游片段和下游片段;現
反向PCR的原理
反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色體序列,因此又可稱為染色體緩移或染色體步移。這時選擇的引物雖然與核心DNA區兩末端序列互補,但兩引物3’端是相互反向的。擴增前先用限制性內切酶酶切樣品DNA,然后用DNA連接酶連接成一個環狀DNA分子,通過反向PCR擴增引物的上游片段和下游片段;現
反向PCR的原理
反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色體序列,因此又可稱為染色體緩移或染色體步移。這時選擇的引物雖然與核心DNA區兩末端序列互補,但兩引物3’端是相互反向的。擴增前先用限制性內切酶酶切樣品DNA,然后用DNA連接酶連接成一個環狀DNA分子,通過反向PCR擴增引物的上游片段和下游片段;現
反向層析的原理
擴散定律 擴散速度跟分子量的平方根成反比 因為分子量不同 所以擴散速度不通 根據這個可以層析一些物質