消減探針的原理和應用
......閱讀全文
消減雜交的方法和應用介紹
中文名稱消減雜交英文名稱subtracting hybridization定 義利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性,并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。一般是將一種細胞的互補DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)與第二種細胞cDNA或mRNA相互雜交,其不被雜交
阻抑消減雜交的方法和應用介紹
中文名稱阻抑消減雜交英文名稱suppressive subtraction hybridization;SSH定 義將阻抑性聚合酶鏈反應與消減雜交相結合的實驗方法,能有效地擴增低豐度的差異基因表達序列。一般是將目標互補DNA(cDNA)5′端分別加上兩種人工接頭,用過量的驅動DNA進行兩次雜交,得
消減雜交的概念和意義
消減雜交(subtractive hybridization,扣除雜交) 是指利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性,并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。是差別雜交的改進,用過量的參照細胞的mRNA 或CDNA 與目的細胞的CDNA 或mRNA (目的序列) 雜交,形成的R
抑制消減雜交的概念和意義
抑制消減雜交(suppression subtractive hybridization,SSH) 是建立在抑制PCR 與消運用雜交二級動力學原理,減雜交技術相結合的基礎上的更簡單快速的分離差異基因的方法。即豐度高的單鏈DNA 在退火時產生同源雜交的速度快于豐度低的單鏈DNA,使原來在豐度上有差別的
DNA探針的概念和應用特點
DNA探針(DNA probe)是最常用的核酸探針,為長度在幾十到幾百甚至上千堿基對的單鏈或雙鏈DNA,用特殊示蹤劑(如同位素、酶或有色基團)進行標記;在適當的pH值、溫度和離子強度下,DNA探針利用分子的變性、復性以及堿基互補配對的高度精確性,能與待測樣本中互補的非標記單鏈DNA或RNA以氫鍵結合
俘獲性探針的技術特點和應用
中文名稱俘獲性探針英文名稱capture probe定 義為捕獲目的分子而使用的探針。此類探針常是固相化的。如用結合在磁性顆粒(磁珠)表面的寡核苷酸為探針,從核酸文庫中篩選出特定的核酸克隆;為尋求能與某蛋白質特異結合的多肽序列,以吸附在反應板上的該蛋白質為探針,從重組噬菌體呈現文庫中捕獲特定的噬菌
消減雜交的定義
利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性,并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。一般是將一種細胞的互補DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)與第二種細胞cDNA或mRNA相互雜交,其不被雜交的部分就代表了兩種細胞基因表達的差異,可用于差異表達基因的克隆。差示篩選、消減探針
消減雜交實驗
試劑、試劑盒 稀釋緩沖液雜交緩沖儲存液基三乙基溴化銨礦物油核酸和寡核苷酸 儀器、耗材 熱循環儀 實驗步驟 一、材料 1. 緩沖液、溶液和試劑 稀釋緩沖液(20 mmol/L HEPES>HCl、pH8.3,50 mmol/LNaCl,0.2 mmol/L ED
消減雜交實驗
試劑、試劑盒 稀釋緩沖液雜交緩沖儲存液基三乙基溴化銨礦物油核酸和寡核苷酸儀器、耗材 熱循環儀實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑稀釋緩沖液(20 mmol/L HEPES>HCl、pH8.3,50 mmol/LNaCl,0.2 mmol/L EDTA)4X 雜交緩沖儲存液:4mol/L NaC
消減雜交實驗
消減雜交實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 稀釋緩沖液 雜交緩沖儲存液 基三乙基溴化銨 礦