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    消減雜交實驗

    試劑、試劑盒稀釋緩沖液雜交緩沖儲存液基三乙基溴化銨礦物油核酸和寡核苷酸儀器、耗材熱循環儀實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑稀釋緩沖液(20 mmol/L HEPES>HCl、pH8.3,50 mmol/LNaCl,0.2 mmol/L EDTA)4X 雜交緩沖儲存液:4mol/L NaCl,200 mmol/L HEPES、pH8.3,4 mmol/L 十六烷基三乙基溴化銨(CTAB)。最終的 1X 雜交緩沖液,用稀釋緩沖液稀釋。礦物油2. 核酸和寡核苷酸連接 Ad1 的檢測者 1-1(方案 1 第 4 階段第 8 步)連接 Ad2R 的檢測者 1-2(方案 1 第 4 階段第 8 步)驅動 DNA(方案 1 第 3 階段第 5 步)Rsa I 消化的驅動 DNA(方案 1 第 3 階段第 5 步)3. 專用設備兩臺熱循環儀(見第 11 步和第 12 步)二、方法1. 第一次雜交(1)按照下面的順序,將每個檢測者樣品......閱讀全文

    SSH抑制性消減雜交文庫構建方法介紹

    SSH是一項可以快速獲取兩個不同生物材料中差異表達基因的分子生物學技術,是快速篩選差異表達基因的有效方法,也是尋找新基因的重要手段。該技術尤其適合以genome尚不完全清晰的物種或者以特殊材料為研究對象的科研工作者。是基因芯片技術的有效補充。基本流程:通過差減文庫構建,文庫驗證和篩選(逆向斑點雜交)

    基因組印記

    這是根據我寫的一個PPT摘錄的,希望能有朋友討論這方面的問題。并拓寬這個領域,討論epigenetics更廣泛的問題。畢竟epigenetics是現在動物功能基因組研究的主流和一個重要方向。1. 印跡基因的概念及重要意義概念:基因組印跡是特指來源于親本的等位基因進行不對稱后成修飾后而導致的單等位基因

    基因表達輪廓(gene expressed profile)技術-2

    經過這輪RDA過程,Tester中的目的DNA將得到第一次富集。將第一輪產物更換新接頭,進行第二輪RDA過程,目的DNA可得到進一步的富集。該技術假陽性很低。但仍不能解決個體mRNA在豐度上存在巨大差異的問題,當靶序列濃度較低時,其富集受抑制。3:抑制消減雜交(suppression subtrac

    北大CancerRes獲腫瘤特異性抗原篩選新方法

      來自北京大學醫學部的研究人員與美國貝勒醫學院等單位合作,在篩選鑒定腫瘤特異性抗原方面取得重要進展,其主要研究成果發表在最新一期的國際著名雜志《癌癥研究》(Cancer Research)上。   腫瘤特異性抗原是一類在腫瘤組織中特異性高表達,而在所有或者大多數正常組織中不表達或低表達的蛋白

    盤點:31項與免疫學有關的分子生物學實驗技術

      現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。  一、GST pull-down實驗  GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗

    消減雜交實驗

    消減雜交實驗             試劑、試劑盒 稀釋緩沖液 雜交緩沖儲

    基因表達輪廓(gene expressed profile)技術-1

    基因表達譜或基因表達輪廓(gene expressed profile)技術就是利用mRNA提取、cDNA合成、酶切、連接、PCR及分子雜交等分子生物學基礎操作技術,將某一生物材料在某一特定階段表達的基因全部展示出來,通過測序及與數據庫比較或通過目標和對照樣品中所表達基因的比較,可以找出特異表達

    基于 PCR 的 DNA 斑點印跡實驗

    實驗方法原理 dNTP ,PCR 緩沖液,聚合酶混合液,嵌套引物,LB-氨芐液體培養基,溶液NaOH,SSC,Tris-HCl,PCR 產物微量滴定板,尼龍膜,紫外交聯裝置,96 孔或 384 孔復制器,熱循環儀,PCR 管或反應板試劑、試劑盒 dNTP PCR 緩沖液聚合酶混合液嵌套引物LB-氨芐

    基于 PCR 的 DNA 斑點印跡實驗

                實驗方法原理 dNTP ,PCR 緩沖液,聚合酶混合液,嵌套引物,LB-氨芐液體培養基,溶液NaOH,SSC,Tris-HCl,PCR 產物微量滴定板,尼龍膜,紫外交聯裝置,96 孔

    基于 PCR 的 DNA 斑點印跡實驗

    對于高通量的篩選,推薦使用幾個熱循環儀廠家提供的 96 孔或 384 孔 PCR 板,或者使用單個的管子。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。實驗方法原理dNTP ,PCR 緩沖液,聚合酶混合液,嵌套引物,LB-氨芐液體培養基,溶液NaOH,SSC,Tris-HCl,PCR

    EST技術及其在基因全長cDNA克隆上的應用策略

    第二軍醫大學細胞生物學教研室;上海200433 何志穎;姚玉成(綜述);胡以平(審校)關鍵詞:EST技術;“電子”基因克隆;生物信息學;基因摘要: 隨著人類基因組計劃的順利進行,EST技術被廣泛應用于基因識別、繪制基因表達圖譜、尋找新基因等研究領域。利用人類基因組研究不斷產生的數據,從ES

    比較基因組雜交芯片介紹

      比較基因組雜交芯片(Comparative Genomic Hybridization Array)、基于芯片的比較基因組雜交(Microarray-based comparative genomic hybridization)或者陣列比較基因組雜交技術(array comparative g

    比較基因組雜交芯片介紹

    比較基因組雜交芯片(Comparative Genomic Hybridization Array)、基于芯片的比較基因組雜交(Microarray-based comparative genomic hybridization)或者陣列比較基因組雜交技術(array comparative gen

    消減 cDNA 或基因組 DNA 文庫的制備實驗

    試劑、試劑盒 緩沖液、溶液和試劑酶和酶緩沖液核酸和寡核苷酸放射性化合物酚儀器、耗材 熱循環儀水浴箱瓊脂糖凝膠電泳所需的試劑與設備實驗步驟 第1階段:RNA和DNA的分離一次雙向消減,需要總量為2ug的基因組DNA或cDNA。大多數分離RNA和基因組DNA的方法都適用于本實驗(Sambrooketal

    消減 cDNA 或基因組 DNA 文庫的制備實驗

    一次雙向消減,需要總量為 2ug 的基因組 DNA 或 cDNA。大多數分離 RNA 和基因組DNA 的方法都適用于本實驗(Sambrooketal.1989;ChomczynskiandSacchi1987;Farrell1993)。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試

    消減 cDNA 或基因組 DNA 文庫的制備實驗

                試劑、試劑盒 緩沖液、溶液和試劑 酶和酶緩沖液 核酸和寡核苷酸 放射性化合物 酚

    用檢測和驅動 DNA 探針進行差異雜交實驗

    試劑、試劑盒 洗滌緩沖液SDSSSCBlocking 溶液經過剪切的鮭魚精 DNA探針儀器、耗材 沸水浴雜交爐實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑高嚴格性洗滌緩沖液(0.2XSSC,5 g/LSDS),預熱到 68°C(可選,見第 9 步)低嚴格性洗滌緩沖液(2XSSC,5 g/LSDS),預

    用檢測和驅動 DNA 探針進行差異雜交實驗

                試劑、試劑盒 洗滌緩沖液 SDS SSC Blocking 溶液 經過剪切的鮭魚精

    染色質免疫沉淀技術的應用

    隨著人類基因組測序工作的基本完成,功能基因組學逐漸成為研究的熱點。而基因表達的調控又是功能基因組學的一個重要研究領域,要想提供蛋白因子直接調控的證據,需要直接檢測蛋白質-DNA的相互作用,而染色質免疫沉淀技術(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)就是一種研

    染色質免疫沉淀(ChIP)技術的難點及應用-1

    序言隨著人類基因組測序工作的基本完成,功能基因組學的研究逐漸成為研究的熱點。而基因表達的調控又是功能基因組學的一個重要研究領域。研究某個蛋白因子的調控功能,可以通過對蛋白活性(激活或抑制其活性),蛋白數量(過表達Overexpression或基因缺陷型Knockout), 以及蛋白功能(功能缺陷

    北京大學對趨化素樣因子1的研究取得重要階段性成果

      趨化素樣因子1(Cklf1)是北京大學醫學部免疫學系韓文玲教授利用抑制性消減雜交技術(SSH)在國際上首次克隆到的一個新的、有自主知識產權的細胞因子,初步的研究認為它是一種具有廣譜的趨化活性的趨化因子,而正是趨化因子對炎性細胞的吸引和活化引起炎性細胞浸潤、進而引起血管平滑肌的增殖、遷移,形成內膜

    凝膠成像系統,化學發光系統和紫外交聯儀-Biometra,UVI

      英國UVItec公司位于英國劍橋,專門提供高質量的紫外線設備,凝膠成像和分析系統。該公司將自身經驗、技術專家意見和客戶反饋信息相融合,進而使紫外分析設備和凝膠數據分析系統處于世界領先地位。    UVI化學發光成像系統 UVIchemi    特性   ·帶有Peltier冷卻元件

    用檢測和驅動 DNA 探針進行差異雜交實驗

    下面 4 個探針用于差異篩選雜交。1. 檢測者特異性消減探針(正向消減探針)。2. 驅動者特異性消減探針(反向消減探針)。3. 從檢測者 mRNA(或檢測者基因組 DNA) 直接合成的 cDNA 探針。4. 從驅動者 mRNA(或驅動者基因組 DNA) 直接合成的 cDNA 探針。本實驗來源于 PC

    消減雜交實驗

    試劑、試劑盒 稀釋緩沖液雜交緩沖儲存液基三乙基溴化銨礦物油核酸和寡核苷酸儀器、耗材 熱循環儀實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑稀釋緩沖液(20 mmol/L HEPES>HCl、pH8.3,50 mmol/LNaCl,0.2 mmol/L EDTA)4X 雜交緩沖儲存液:4mol/L

    鏡像方向選擇實驗

    SSH 的主要缺點是,在消減文庫中存在代表非差異表達 DNA 種類的背景克隆。在某些情況下,背景克隆的數量可能大大超過目的克隆。為了克服這個問題,推薦鏡像方向選擇(MOS)。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒EDTA礦物油TN 緩沖液PCR 緩沖液聚合酶混合液

    國家藥監局印發食品安全檢驗機構技術裝備等基本標準

    關于印發餐飲服務食品安全檢驗機構技術裝備基本標準和現場快速檢測設備配備基本標準的通知 國食藥監食[2011]130號 各省、自治區、直轄市及新疆生產建設兵團食品藥品監督管理局:   為貫徹落實《食品安全法》、《食品安全法實施條例》以及《餐飲服務食品安全監督管理辦法》,逐步建立

    Nature重要論文:糖尿病治療的新突破

      近日來自卡羅林斯卡學院、路德維希癌癥研究所和澳大利亞生物制藥公司CSL Limited的科學家們成功地在小鼠和大鼠的實驗中阻止了II型糖尿病形成,并逆轉了已建立疾病的進展。這項研究發表在著名的科學期刊《自然》(Nature)雜志上,被描述為糖尿病研究的一個突破性成果。   卡羅林斯卡學院醫

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