體外轉錄的概念和過程
轉錄通常發生在生物體內，如果我們將含有RNA轉錄酶、NTP等條件，在體外無細胞系統中，用DNA作為模板，模仿體內轉錄過程生成RNA，這樣的技術則能夠控制轉錄的基因、轉錄的過程和轉錄后RNA的用途，該技術被稱為體外轉錄。......閱讀全文
體外轉錄的概念和過程
轉錄通常發生在生物體內，如果我們將含有RNA轉錄酶、NTP等條件，在體外無細胞系統中，用DNA作為模板，模仿體內轉錄過程生成RNA，這樣的技術則能夠控制轉錄的基因、轉錄的過程和轉錄后RNA的用途，該技術被稱為體外轉錄。
轉錄的概念和過程
轉錄是指由DNA合成RNA的過程。在轉錄期間，RNA聚合酶根據需要將一個基因的DNA拷貝成mRNA，這個過程在真核生物和原核生物中是相似的。與原核生物明顯不同的是，真核RNA聚合酶在轉錄過程中與mRNA加工酶結合，因此，真核生物的mRNA加工可以在轉錄開始后快速進行。短壽命的未加工或部分加工的轉錄產
體外轉錄
·?????????In Vitro RNA Transcription?(Promega)For?in vitro?preparation single-stranded RNA probes or microgram quantities of defined RNA transcripts f
轉錄的定義和過程
轉錄(Transcription)是遺傳信息從DNA流向RNA的過程。即以雙鏈DNA中的確定的一條鏈(模板鏈用于轉錄,編碼鏈不用于轉錄)為模板,以A、U、C、G四種核糖核苷酸為原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的過程。作為蛋白質生物合成的第一步,進行轉錄時,一個基因會被讀取并被復制為mRNA,即特
關于體外轉錄的轉錄條件介紹
轉錄模板必須滿足： 1. 在基因組全長克隆過程中，在正向引物5‘末端添加T7啟動子序列； 2. 以T7啟動子作為體外轉錄啟動子，在啟動子后面靶位序列連續帶有3個G,轉錄效率最 高； 3. 在正向引物5/端添加一個帽子G,有利于提高體外轉錄RNA分子的侵染活性。
體外轉錄合成單鏈RNA探針:體外轉錄法
體外轉錄法l????????體外轉錄合成單鏈RNA探針1.??????用適當的限制酶消化超螺旋質粒DNA制備5 pmol的線性模板DNA。取一小份消化的DNA（100ng）進行瓊脂糖凝膠電泳分析。如有必要，再補加限制性酶進行溫育，直至不再殘存痕量的未消化DNA。2.??????如必須用產生3’突出端
體外培養的概念
中文名稱體外培養英文名稱in vitro culture定 義將活體結構成分（如活體組織、活體細胞、活體器官等）甚至活的個體從體內或其寄生體內取出，置于類似于體內生存環境的體外環境中生長和發育的方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞培養與細胞工程（二級學科）
?轉錄水平調控的概念和方式
轉錄水平調控是真核基因表達調控的重要環節。根據真核基因表達是否受環境影響可分為：發育調控和瞬時調控。其中發育調控是指真核生物為確保自身生長、發育、分化等對基因表達按“預定”和“有序”的程序進行的調控，是不可逆的過程；瞬時調控是指真核生物在內、外環境的刺激下所做出的適應性轉錄調控，是可逆過程。
逆轉錄的特點和過程
以RNA鏈為模板，經逆轉錄酶（即依賴于RNA的DNA聚合酶）催化合成DNA鏈，叫做逆轉錄。這種機制在RNA腫瘤病毒中首先發現。RNA聚合酶是以DNA為模板的RNA聚合酶，也稱轉錄酶。原核生物的RNA聚合酶分子量很大，通常由5個亞基組成；兩個α亞基，β，β′和σ，可寫作α2ββ′σ。含有5個亞基的酶叫
克隆化基因的體外轉錄和翻譯實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 TE核苷三磷酸混合液RNA聚合酶緩沖液異丁醇NaOHTCA儀器、耗材 離心機搖床實驗步驟 1. ?亞克隆編碼蛋白質的目的DNA片段于質粒載體的SP6或T7啟動子的下游。?2. ?通過CsCl/溴化乙錠離心或PEG沉淀制備質粒DNA。?3. ?用位點在終止密碼子的立即下游
克隆化基因的體外轉錄和翻譯實驗
DNA的克隆是指在體外將含有目的基因或其它有意義的DNA片段同能夠自我復制的載體DNA連接，然后將其轉入宿主細胞或受體生物進行表達或進一步研究的分子操作的過程，因此DNA克隆又稱分子克隆，基因操作或重組DNA技術。實驗材料DNA試劑、試劑盒TE核苷三磷酸混合液RNA聚合酶緩沖液異丁醇NaOHTCA儀
克隆化基因的體外轉錄和翻譯實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
轉錄物的概念
中文名稱轉錄物英文名稱transcript定 ?義在DNA模板上由RNA聚合酶催化轉錄生成的mRNA。應用學科遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)
體外轉錄siRNAs的技術特點
以DNA Oligo為模版，通過體外轉錄合成siRNAs，成本相對化學合成法而言比較低，而且能夠比化學合成法更快的得到siRNAs。不足之處是實驗的規模受到限制，雖然一次體外轉錄合成能提供足夠做數百次轉染的siRNAs，但是反應規模和量始終有一定的限制。而且和化學合成相比，還是需要占用研究人員相當的
關于體外轉錄的基本介紹
轉錄通常發生在生物體內，如果我們將含有RNA轉錄酶、NTP等條件，在體外無細胞系統中，用DNA作為模板，模仿體內轉錄過程生成RNA，這樣的技術則能夠控制轉錄的基因、轉錄的過程和轉錄后RNA的用途，該技術被稱為體外轉錄。
配子發生的概念和過程
配子形成的過程稱為配子發生。配子分為雄配子（male gamete）和雌配子（female gamete）,動物和植物的雌配子通常稱為卵（ova,或egg）,而將雄配子稱為精子（sperm）。精子相當小，但能夠運動，而卵細胞體積相當大，并且是不可游動的，如海膽的卵細胞是精細胞的10,000倍。盡管雌
初生代謝的概念和過程
合成糖類，氨基酸類,普通的脂肪酸類，核酸類以及由它們形成的聚合物(多糖類、蛋白質類、RNA、DNA等等)。這些對生物生存和健康必需的化合物就叫初生代謝產物(Primary metabolites)。初生代謝過程是指微生物從外界吸收各種營養物質，通過分解代謝和合成代謝，生成維持生命活動的物質和能量的過
細胞移動的概念和過程
主要是指高等脊椎動物細胞從一個地方向另一個地方轉移。一般是用培養的動物細胞觀察細胞的移動。細胞移動可以分為三個過程∶首先是細胞前緣的擴展(extension)，這一步是由肌動蛋白的聚合作用引起的；第二是擴展的前緣通過粘著斑的形成附著到基底(substratum)；第三是通過胞質溶膠向前流動和細胞尾部
ATP循環的概念和過程
ATP作為細胞內放能與吸能反應的主要中間媒介物，在各種生命活動及代謝過程中直接或間接起供能作用。ATP為腺苷三磷酸，3個磷酸之間有2個磷酸酯鍵。當ATP水解成ADP時釋放的能量比一般磷酸酯鍵水解時釋放出的能量多得多，因而可以使需要加入自由能的吸能反應得以進行。而ADP與無機磷酸鹽又可利用生物氧化時釋
同源重組的概念和過程
同源重組(Homologous Recombination) 是指發生在非姐妹染色單體(non-sister chromatid) 之間或同一染色體上含有同源序列的DNA分子之間或分子之內的重新組合。同源重組需要一系列的蛋白質催化,如原核生物細胞內的RecA、RecBCD、RecF、RecO、Rec
初生代謝的概念和過程
合成糖類，氨基酸類,普通的脂肪酸類，核酸類以及由它們形成的聚合物(多糖類、蛋白質類、RNA、DNA等等)。這些對生物生存和健康必需的化合物就叫初生代謝產物(Primary metabolites)。初生代謝過程是指微生物從外界吸收各種營養物質，通過分解代謝和合成代謝，生成維持生命活動的物質和能量的過
關于體外轉錄的操作步驟介紹
1. 提取cDNA質粒； 2. 線性化質粒：（利用單一的酶切位點線性化有利于轉錄） 3. 純化質粒：（盡量避免RNase污染） ① 加等體積的Tris-苯酚：氯仿（1:1）到100μL限制內切酶消化體系，渦旋振蕩20s, 13000g離心5min； ②上清轉移，加入2倍體積無水乙醇和1/10
體外轉錄合成siRNAs的方法特點
以DNA Oligo為模版，通過體外轉錄合成siRNAs，成本相對化學合成法而言比較低，而且能夠比化學合成法更快的得到siRNAs。不足之處是實驗的規模受到限制，雖然一次體外轉錄合成能提供足夠做數百次轉染的siRNAs，但是反應規模和量始終有一定的限制。而且和化學合成相比，還是需要占用研究人員相當的
轉錄的過程介紹
在轉錄過程中，DNA模板被轉錄方向是從3′端向5′端；RNA鏈的合成方向是從5′端向3′端。RNA的合成一般分兩步，第一步合成原始轉錄產物（過程包括轉錄的啟動、延伸和終止）；第二步轉錄產物的后加工，使無生物活性的原始轉錄產物轉變成有生物功能的成熟RNA。但原核生物mRNA的原始轉錄產物一般不需后加工
體外轉錄與體外翻譯耦聯的快速反應系統
實驗材料 質粒 DNA 模板試劑、試劑盒 無核酸酶污染的水 [35S] 標記的甲硫氧酸 TNT 快速超級混合液 T7TNTPCR 增強液儀器、耗材 一 70°C 冰箱 冰浴 微量移液器 離心機 水浴槽 聚丙烯酰胺凝膠電泳裝置實驗步驟 ―、材料與設備1) 無核酸酶污染的水。2)[35S] 標記的甲硫氧
體外轉錄與體外翻譯耦聯的快速反應系統
? ? ? ? ? ? 實驗材料 質粒 DNA 模板 試劑、試劑盒 無核酸酶污染的水 [35S] 標記的甲硫氧酸 TN
精子發生的過程和概念
精子在睪丸的曲細精管（ seminiferous tubules ）中產生。睪丸的各個組成部分以及整體的功能都受到下丘腦 - 腦垂體內分泌腺體的影響。另外，睪丸局部的自分泌、旁分泌調節機制在睪丸的生精功能調控中也起到重要的作用。
變形運動的概念和過程
變形運動是細胞的變形運動，這種變形運動在原生動物變形蟲表現得最為典型。變形運動又稱偽足運動（pseudopodial movement）。除了作為根足蟲類特有的運動形式以外，變形運動是各種變形細胞或游走細胞的屬性，廣泛地分布在后生生物界。
細胞衰老的概念和過程介紹
細胞衰老（cell aging）是指細胞在執行生命活動過程中，隨著時間的推移，細胞增殖與分化能力和生理功能逐漸發生衰退的變化過程。細胞的生命歷程都要經過未分化、分化、生長、成熟、衰老和死亡幾個階段。衰老死亡的細胞被機體的免疫系統清除，同時新生的細胞也不斷從相應的組織器官生成，以彌補衰老死亡的細胞。細
甲基化的概念和過程
甲基化，是指從活性甲基化合物上將甲基催化轉移到其他化合物的過程，可形成各種甲基化合物，或是對某些蛋白質或核酸等進行化學修飾形成甲基化產物。在生物系統內，甲基化是經酶催化的，這種甲基化涉及重金屬修飾、基因表達的調控、蛋白質功能的調節以及核糖核酸加工。