寡核苷酸定點誘變的概念
中文名稱寡核苷酸定點誘變英文名稱oligonucleotidedirected mutagenesis定 義人工獲得特定核酸定點突變的一種方案。將需要改變的核苷酸置于一段合成的寡核苷酸中部，在單鏈噬菌體(如M13)模板上用克列諾酶合成有指定變化的負鏈，再通過噬菌體復制得到含突變的雙鏈。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）......閱讀全文
寡核苷酸定點誘變的概念
中文名稱寡核苷酸定點誘變英文名稱oligonucleotidedirected mutagenesis定 義人工獲得特定核酸定點突變的一種方案。將需要改變的核苷酸置于一段合成的寡核苷酸中部，在單鏈噬菌體(如M13)模板上用克列諾酶合成有指定變化的負鏈，再通過噬菌體復制得到含突變的雙鏈。應用學科生物
分子遺傳學詞匯寡核苷酸定點誘變
中文名稱：寡核苷酸定點誘變英文名稱：oligonucleotide-directed mutagenesis定 義：用人工合成的寡核苷酸在特定位點導致突變。應用學科：遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
寡核苷酸陣列的概念
微陣列（DNA Microarray）也叫寡核苷酸陣列（Oligonucleotide array），是人類基因組計劃（Human Genome Project，HGP）的逐步實施和分子生物學的迅猛發展及運用的產物，它是生物學家受到計算機芯片制造和廣為應用的啟迪，融微電子學、生命科學、計算機科學和光
隨機寡核苷酸誘變的概念
中文名稱隨機寡核苷酸誘變英文名稱random oligonucleotide mutagenesis定 義通過合成一系列突變寡核苷酸引物對基因組某個區域進行聚合酶鏈反應擴增，獲得大量突變的DNA，以研究突變對功能的影響。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
用放射性標記的寡核苷酸雜交篩選定點誘變重組克隆實驗
實驗方法原理 試劑、試劑盒 甲酸銨寡核苷酸雜交溶液寡核苷酸預雜交液TE噬菌體T4多核苷酸激酶限制性內切核酸酶瓊脂糖凝膠誘變寡核苷酸[γ-32P]ATP2XYT 頂層瓊脂和 2xYT 瓊脂平皿儀器、耗材 鈍端鑷子皮下注射用針頭（18 號）和印度墨水孵箱硝酸纖維素膜或尼龍膜真空烤箱68°C 水浴What
用放射性標記的寡核苷酸雜交篩選定點誘變重組克隆實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 試劑、試劑盒 甲酸銨 寡核苷酸雜交溶液 寡核苷酸預雜交液 TE 噬菌體T4多核
用放射性標記的寡核苷酸雜交篩選定點誘變重組克隆實驗
本方案主要描述了篩選噬菌體 M13 重組克隆，而一種選擇方案是篩選含噬菌粒的細菌克隆。最后也介紹了用 PCR 檢測突變體的方法。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗方法原理試劑、試劑盒甲酸銨寡核苷酸雜交溶液寡核苷酸預雜交液TE噬菌體T4多核
定點誘變實驗
基本方案 利用PCR引物點突變 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
定點誘變實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 TE寡核苷酸引物質粒dNTPDNA聚合酶氯仿石蠟油無水乙醇儀器、耗材 離心管熱循環儀離心機實驗步驟 1. ?利用突變區兩側的限制性內切酶位點將待誘變的DNA片段亞克隆進高拷貝數的載體中。?2. ?用小量制備的質粒提取模板DNA，用TE緩沖液重懸100 ng DNA至終濃
定點誘變(DpnI法)
1、引物設計：每條引物都要攜帶有所需的突變位點，引物一般長25~45bp,設計的突變位點需位于引物中部。2、反應：使用高保真的pyrobest DNA聚合酶 ;循環次數少，一般為12個循環。反應體系：10x pyrobest Buffer 5 uldNTP Mixture(10mM) 1ul模板DN
定點誘變(DpnI法)
1、引物設計：每條引物都要攜帶有所需的突變位點，引物一般長25~45bp,設計的突變位點需位于引物中部。2、反應：使用高保真的pyrobest DNA聚合酶 ;循環次數少，一般為12個循環。反應體系：10x pyrobest Buffer ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 5 uldN
盒式誘變的簡介
盒式誘變(cassette mutagenesis)是一種定點誘變技術，其方法是利用一段人工合成的具有突變序列的雙鏈寡核苷酸片段，取代野生型基因中相應序列。這種誘變的雙鏈寡核苷酸片段是由兩條人工合成的寡核苷酸鏈組成的，當它們退火時，會按照設計要求產生出克隆需要的粘性末端。這些合成的寡核苷酸片段就
關于基因定點誘變的概述
對于任何一種遺傳學研究，尤其是有關基因的結構與功能的分析，突變都是最基本的手段。經典的方法是，應用能夠修飾DNA分子的化學誘變劑或物理誘變劑處理生物體。此類誘變方法雖然已得到了廣泛的應用，獲得了大量的突變體，但亦存在著諸多的不便之處。 第一、經受誘變劑處理的生物體，它的任何基因都有可能發生突變
定點誘變實驗——基本方案
定點突變是指通過聚合酶鏈式反應（PCR）等方法向目的DNA片段（可以是基因組，也可以是質粒）中引入所需變化（通常是表征有利方向的變化），包括堿基的添加、刪除、點突變等。定點突變能迅速、高效的提高DNA所表達的目的蛋白的性狀及表征，是基因研究工作中一種非常有用的手段。實驗材料DNA試劑、試劑盒TE寡核
定點誘變與盒式誘變的比較介紹
構建一個位點導向的文庫涉及使用含有一個或多個簡并密碼子的合成DNA片段替代一個基因片段。這可以通過雙鏈盒式誘變或單鏈寡核苷酸定向誘變來實現。我們相對傾向于寡核苷酸定向誘變，因為不同于盒式誘變，它不需要在目的區域附近有獨特的限制性酶切位點，并且構建一個文庫只需要一個寡核苷酸片段。因此，這個方法相當
寡核苷酸的性質
寡核苷酸極易與它們的互補對鏈接。
定點誘變實驗——利用PCR引物點突變
實驗材料DNA試劑、試劑盒DNA聚合酶klenow限制性內切酶儀器、耗材水浴鍋離心機培養箱實驗步驟1. ?制備模板（見基本方案，步驟1和2）?2. ?合成和純化寡核苷酸引物并對5‘端磷酸化。?3. ?擴增模板DNA（基本方案，步驟4和5），在最后一次延伸結束后，加5 U 的klenow酶，30℃保溫
關于寡核苷酸引物誘變的介紹
寡核苷酸引物誘變是由加拿大生物化學家Michael Smith發明的一種基因定點誘變方法。其基本原理是：合成一段寡聚脫氧核糖核苷酸作為引物，其中含有需要改變的堿基，使其與帶有目的基因的單鏈DNA配對，合成的引物除短的錯配區外，與目的基因完全互補，然后用DNA聚合酶延伸引物，完成單鏈DNA的復制。
寡核苷酸的主要應用
反義寡核苷酸(AON)是一類通過序列特異地與靶基因DNA或mRNA結合而抑制該基因表達，在基因水平調控的分子藥物。而硫代反義寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides，簡稱PS2ODNs)，是用硫原子將磷酸骨架上的非成鍵氧原子取代后形成的一類新的寡核苷酸類似物(圖
寡核苷酸的應用介紹
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構，用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中??。寡核苷酸合成的DNA（脫氧核糖核酸）可以用于鏈聚合反應，能放大確定幾乎所有DNA的片段，在這個過程中寡核苷酸是作為引物，和DNA 中標記的互補片段結合，作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA片段，防
關于寡核苷酸的簡介
寡核苷酸(Oligonucleotide)，一般是指2~10核苷酸殘基以磷酸二酯鍵連接而成的線性多核苷酸片段，但在使用這一術語時，對核苷酸殘基的數目并無嚴格規定，在不少文獻中，把含有30甚至更多核苷酸殘基的多核苷酸分子也稱作寡核苷酸。寡核苷酸可由儀器自動合成，它可作為DNA合成的引物(Prime
簡述寡核苷酸的應用
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構，用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中 [2] 。 寡核苷酸合成的DNA（脫氧核糖核酸）可以用于鏈聚合反應，能放大確定幾乎所有DNA的片段，在這個過程中寡核苷酸是作為引物，和DNA 中標記的互補片段結合，作成DNA的復制品。 調控寡核苷酸用于
寡核苷酸的應用特點
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構，用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中 。寡核苷酸合成的DNA（脫氧核糖核酸）可以用于鏈聚合反應，能放大確定幾乎所有DNA的片段，在這個過程中寡核苷酸是作為引物，和DNA 中標記的互補片段結合，作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA片段，防止
寡核苷酸的應用介紹
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構，用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中 。寡核苷酸合成的DNA（脫氧核糖核酸）可以用于鏈聚合反應，能放大確定幾乎所有DNA的片段，在這個過程中寡核苷酸是作為引物，和DNA 中標記的互補片段結合，作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA片段，防止
寡核苷酸的優化設計
關鍵詞：寡核苷酸；優化設計中圖分類號：Q524???? 在核酸分子雜交、DNA序列測定和通過PCR放大DNA片段等實驗中，都需要使用寡核苷酸作為探針或引物，而對這些反應的質量起最重要影響作用的，就是這些寡核苷酸探針或引物。用優化的寡核苷酸進行實驗能夠很快得到好的結果，而用不夠合適的寡核苷酸時，常常得
寡核苷酸的相關操作
In this section, you will find techniques related to oligonucleotides, such as oligo purification by acrylamide gel, annealing two oligos to make doub
寡核苷酸的主要應用
寡核苷酸常用來作為探針確定DNA或RNA的結構，用于基因芯片、電泳、熒光原位雜交等過程中?[2]??。寡核苷酸合成的DNA（脫氧核糖核酸）可以用于鏈聚合反應，能放大確定幾乎所有DNA的片段，在這個過程中寡核苷酸是作為引物，和DNA 中標記的互補片段結合，作成DNA的復制品。調控寡核苷酸用于抑制RNA
寡核苷酸的基本介紹
寡核苷酸(Oligonucleotide)，一般是指2~10核苷酸殘基以磷酸二酯鍵連接而成的線性多核苷酸片段，但在使用這一術語時，對核苷酸殘基的數目并無嚴格規定，在不少文獻中，把含有30甚至更多核苷酸殘基的多核苷酸分子也稱作寡核苷酸。寡核苷酸可由儀器自動合成，它可作為DNA合成的引物(Prime
寡核苷酸探針的簡介
基因探針，即核酸探針，是一段帶有檢測標記，且順序已知的，與目的基因互補的核酸序列(DNA或RNA)。基因探針通過分子雜交與目的基因結合，產生雜交信號，能從浩瀚的基因組中把目的基因顯示出來。根據雜交原理，作為探針的核酸序列至少必須具備以下兩個條件：①應是單鏈，若為雙鏈，必須先行變性處理。②應帶有容
寡核苷酸引物的作用
PCR技術中的引物的本質和作用。引物是一小段單鏈DNA或RNA，引物可以做為DNA復制開始時DNA聚合酶的結合位點，在細胞外的條件下，只有通過引物，DNA才可以開始進行復制。引物是人工合成的兩段寡核苷酸序列，一個引物與感興趣區域一端的一條DNA模板鏈互補，另一個引物與感興趣區域另一端的另一條DNA模