RNAi引起的基因敲除
RNAi引起的基因敲除：由于少量的雙鏈RNA就能阻斷基因的表達，并且這種效應可以傳遞到子代細胞中，所以RNAi的反應過程也可以用于基因敲除。......閱讀全文
基因敲除技術的理論來源
基因敲除就是通過同源重組將外源基因定點整合入靶細胞基因組上某一確定的位點，以達到定點修飾改造染色體上某一基因的目的的一種技術。它克服了隨機整合的盲目性和偶然性，是一種理想的修飾、改造生物遺傳物質的方法。這項技術的誕生可以說是分子生物學技術上繼轉基因技術后的又一革命。尤其是條件性、誘導性基因打靶系統的
基因敲除技術的操作步驟
利用基因打靶技術產生轉基因動物的程序一般為：獲得干細胞基因敲除一般應用于鼠，而最常用的鼠的種系是129及其雜合體，因為這類小鼠具有自發突變形成畸胎瘤和畸胎肉瘤的傾向，是基因敲除的理想實驗動物。而其他遺傳背景的胚胎干細胞系逐漸被發展應用，最來自于C57BL/6×CBN/JNCrjF1小鼠的胚胎干細胞系
基因敲除技術的技術應用
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立，而最成熟的實驗動物是小鼠，對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來，牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊，基因敲除狗的培育難度大為增加，狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題，研究團隊設計了一個自體移植的策略，
基因敲除技術的研究歷史
基因敲除技術是20世紀80年代發展起來的，是建立在基因同源重組技術基礎以及胚胎干細胞技術基礎上的一種新分子生物學技術。所謂胚胎干細胞（EmbryonicStem cell，ES）是從著床前胚胎（孕3—5天）分離出的內細胞團（Inner cellmass，ICM）細胞，它具有向各種組織細胞分化的多分化
基因敲除技術的技術分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除（又稱不完全基因敲除）兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性，條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
基因敲除技術的理論來源
基因敲除就是通過同源重組將外源基因定點整合入靶細胞基因組上某一確定的位點，以達到定點修飾改造染色體上某一基因的目的的一種技術。它克服了隨機整合的盲目性和偶然性，是一種理想的修飾、改造生物遺傳物質的方法。這項技術的誕生可以說是分子生物學技術上繼轉基因技術后的又一革命。尤其是條件性、誘導性基因打靶系統的
基因敲除技術的操作步驟
利用基因打靶技術產生轉基因動物的程序一般為：獲得干細胞基因敲除一般應用于鼠，而最常用的鼠的種系是129及其雜合體，因為這類小鼠具有自發突變形成畸胎瘤和畸胎肉瘤的傾向，是基因敲除的理想實驗動物。而其他遺傳背景的胚胎干細胞系逐漸被發展應用，來自于C57BL/6×CBN/JNCrjF1小鼠的胚胎干細胞系成
基因敲除的原理與方法
基因敲除可以說是基因組 學、細胞分離培養以及轉基因技術的組合。那么基因敲除的原理是什么呢？ 基因敲除的方法有哪些呢？在此，做個小結，以供大家學習。一.概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子 生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用D
基因敲除技術概述（一）
1．概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較成
基因敲除常見方法
一、常規基因敲除鼠（Conventional Knockout）常規基因敲除是通過基因打靶，把需要敲除的基因的幾個重要的外顯子或者功能區域用Neo Cassette?替換掉。這樣的小鼠其全身所有的組織和細胞中都不表達該基因產物。此類基因敲除鼠一般用于研究某個基因在對小鼠全身生理病理的影響，而且這個基
基因敲除技術概述（三）
2.1.2.2 誘導性基因敲除法誘導性基因敲除也是以Cre/loxp 系統為基礎，但卻是利用控制Cre 表達的啟動子的活性或所表達的Cre 酶活性具有可誘導的特點，通過對誘導劑給予時間的控制或利用Cre 基因定位表達系統中載體的宿主細胞特異性和將該表達系統轉移到動物體內的過程在時間上的可控性
基因敲除技術概述（四）
[13]。2.3.2 RNAi基因敲除的優點及應用①.比用同源重組法更加簡便，周期大大縮短。②.對于哺乳動物，如對于一些敲除后小鼠在胚胎時就會死亡的基因，可以在體外培養的細胞中利用RNAi技術研究它的功能。③.由于RNAi能高效特異的阻斷基因的表達，它成為研究信號傳導通路的良好工具。④.RNAi還被
基因敲除技術概述（二）
2.1.2條件性基因敲除法條件性基因敲除法可定義為將某個基因的修飾限制于小鼠某些特定類型的細胞或發育的某一特定階段的一種特殊的基因敲除方法[2]。它實際上是在常規的基因敲除的基礎上，利用重組酶Cre介導的位點特異性重組技術，在對小鼠基因修飾的時空范圍上設置一個可調控的“按鈕”，從而使對小鼠基因組的修
RNAi及基因沉默原理
RNA 干擾(RNAinterference，RNAi)是由雙鏈RNA (double-strandedRNA，dsRNA) 引發的轉錄后基因靜默機制。其原理是：RNaseIII 核酶家族的Dicer，與雙鏈RNA 結合，將其剪切成21 - 25nt 及3'端突出的小干擾RNA (small
基因敲除的基本功能
基因敲除（knockout）是用含有一定已知序列的DNA片段與受體細胞基因組中序列相同或相近的基因發生同源重組，整合至受體細胞基因組中并得到表達的一種外源DNA導入技術。它是針對某個序列已知但功能未知的序列，改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進一步對生物體造成影
基因敲除技術的原理和方法
1.利用基因同源重組進行基因敲除基因敲除是80年代后半期應用DNA同源重組原理發展起來的。80年代初，胚胎干細胞(ES細胞)分離和體外培養的成功奠定了基因敲除的技術基礎。1985年，首次證實的哺乳動物細胞中同源重組的存在奠定了基因敲除的理論基礎。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES細
基因敲除的技術和功能簡介
基因敲除（knockout）是用含有一定已知序列的DNA片段與受體細胞基因組中序列相同或相近的基因發生同源重組，整合至受體細胞基因組中并得到表達的一種外源DNA導入技術。它是針對某個序列已知但功能未知的序列，改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進一步對生物體造成影
基因敲除與RNA干擾的關系
20世紀80年代初，胚胎干細胞分離和體外培養的成功為基因敲除奠定了技術基礎。1985年，首次證實的哺乳動物細胞中同源重組(homology recombination, HR)的存在為基因敲除奠定了理論基礎[2]。為了編輯基因，傳統的靶向特定等位基因的同源重組技術被使用，但是，這個方法在當年來說，存
基因敲除小鼠的原理和方法
1.利用基因同源重組進行基因敲除。基因敲除是80年代后半期應用DNA同源重組原理發展起來的。80年代初，胚胎干細胞(ES細胞)分離和體外培養的順利奠定了基因敲除的技術基礎。1985年，首次證實的哺乳動物細胞中同源重組的存在奠定了基因敲除的理論基礎。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES
基因敲除真把整個基因敲掉嗎？
一般我們把基因分成兩類：編碼蛋白的基因不編碼蛋白的基因這兩類基因的敲除方式有著很大的區別編碼蛋白的基因這些基因的功能主要是通過編碼區中的三聯體密碼所編碼的蛋白來實現的。基因敲除的最終目的是讓這個基因的蛋白產物不能發揮功能，或者蛋白不能表達。整個編碼區統統刪掉所有的密碼都沒了，當然就不能翻譯出蛋白啦！
關于基因敲除技術應用介紹
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立，而最成熟的實驗動物是小鼠，對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來，牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊，基因敲除狗的培育難度大為增加，狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題，研究團隊設計了一個自體移植的策略，
Fgf21基因敲除小鼠
背景信息FGF家族成員具有廣泛的促有絲分裂和細胞存活特性，并參與多種生物過程，包括胚胎發育、細胞生長、形態發生、組織修復、腫瘤生長和侵襲。成纖維細胞生長因子21（FGF21）是一種肝細胞因子——即由肝臟分泌的一種激素，通過下丘腦室旁核中的FGF21受體信號傳導調節糖攝入和對甜食的偏好，并與伏隔核內多
TetraOne－KO——基因敲除技術進展
TetraOne KO——基因敲除技術的重大突破 近日，賽業生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球ZL技術TetraOne基因敲除，一種不僅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6個月），而且避免了TALEN、CRISP
如何檢測－crispr－基因敲除成功
CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一種來自細菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫機制。在細菌及古細菌中，CRISPR系統共分成3類，其中Ⅰ類和Ⅲ類需要多種CRISPR相關蛋白（Ca
基因敲除技術原理和方法
1.利用基因同源重組進行基因敲除基因敲除是80年代后半期應用DNA同源重組原理發展起來的。80年代初，胚胎干細胞(ES細胞)分離和體外培養的成功奠定了基因敲除的技術基礎。1985年，首次證實的哺乳動物細胞中同源重組的存在奠定了基因敲除的理論基礎。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES細
Cell：不讓基因沉默的RNAi途徑
“這項研究的獨特之處在于――之前，我們知道RNAi能用于調控基因，或者完全關閉基因。而這項研究中，我們發現的是一種通過piRNA途徑，保護基因不被沉默的RNAi機制，這種機制能作為一種保護形式，讓基因得以表達。” ――Darryl Conte Jr.博士 生物機體采用了多種戰略方法來
基因敲除的定義和功能用途
基因敲除（knockout）是用含有一定已知序列的DNA片段與受體細胞基因組中序列相同或相近的基因發生同源重組，整合至受體細胞基因組中并得到表達的一種外源DNA導入技術。它是針對某個序列已知但功能未知的序列，改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進一步對生物體造成影
組織特異性基因敲除的定義
中文名稱組織特異性基因敲除英文名稱tissue-specific gene knockout定 義在特定組織細胞類型中使基因功能完全喪失的實驗技術。應用學科遺傳學（一級學科），發育遺傳學（二級學科）
Nature驚人發現：基因敲除技術的缺陷
當前一些基因組改造新方法在科學界引發了廣泛的討論：例如，采用CRISPR/Cas技術，科學家們可以刪除某一基因遺傳密碼的組成部分，由此敲除掉這一基因。 此外，還有一些方法可以抑制基因翻譯為蛋白質。兩種方法的共同之處在于，它們都阻礙了蛋白質生成，因此可給生物體造成一些相似的影響。然而，有證據顯示敲
RNA干擾RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關；② 在果蠅中，參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失，同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南