間接免疫熒光術的技術特點
中文名稱間接免疫熒光英文名稱indirect immunofluorescence定 義直接免疫熒光技術的改進。待檢細胞首先用未標記的抗體處理,使之與特異的抗原形成復合物,然后再用抗抗體的熒光標記抗體著色,即可檢測出特異抗原在細胞中的存在部位,具有熒光增強效應。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)......閱讀全文
間接免疫熒光術的技術特點
中文名稱間接免疫熒光英文名稱indirect immunofluorescence定 義直接免疫熒光技術的改進。待檢細胞首先用未標記的抗體處理,使之與特異的抗原形成復合物,然后再用抗抗體的熒光標記抗體著色,即可檢測出特異抗原在細胞中的存在部位,具有熒光增強效應。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞
免疫熒光技術——間接法
實驗方法原理基本原理是先用特異性抗體與細胞內相應抗原結合,再用熒光素標記的二抗與特異性抗體相結合,形成抗原-特異性抗體-標記熒光抗體的復合物。因為在復合物上帶有比直接法更多的熒光標記物,所以比直接法更敏感。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBS伊文氏蘭儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定后,PBS洗滌3
間接免疫熒光
中文名稱間接免疫熒光英文名稱indirect immunofluorescence定 義直接免疫熒光技術的改進。待檢細胞首先用未標記的抗體處理,使之與特異的抗原形成復合物,然后再用抗抗體的熒光標記抗體著色,即可檢測出特異抗原在細胞中的存在部位,具有熒光增強效應。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞
間接免疫熒光
實驗方法原理固定細胞,順序加入一抗和二抗,通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片產生一抗種屬的二抗豬血清或其他封閉劑D-PBSA試劑、試劑盒新鮮制備的固定劑用含10%的FBS培養液封固劑實驗步驟1. 用 D-PBSA 洗滌長有細胞的蓋玻片,置于合適的培養皿中。如 13 mm 蓋玻片可用24 孔
間接免疫熒光
方案16.11 間接免疫熒光實驗方法原理固定細胞,順序加入一抗和二抗,通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片產生一抗種屬的二抗豬血清或其他封閉劑D-PBSA試劑、試劑盒新鮮制備的固定劑用含10%的FBS培養液封固劑實驗步驟1. 用 D-PBSA 洗滌長有細胞的蓋玻片,置于合適的培養皿中。如 1
間接免疫熒光
實驗方法原理固定細胞,順序加入一抗和二抗,通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?產生一抗種屬的二抗 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
抗核抗體與間接免疫熒光技術
在自身免疫性疾病中,人體組織細胞細胞核的核膜、核內的染色質、非組蛋白,以及核糖核酸(RNA)和相關的蛋白質等都可成為自身免疫反應攻擊的靶子,產生抗核抗體(ANA)。其中有不少抗體因對疾病的診斷有高度的特異性,已成為診斷某一類疾病的血清標志性抗體,如抗雙鏈DNA抗體、抗Sm抗體之于SLE,抗SSB抗體
流式細胞術間接免疫熒光標記的樣品制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取一定量的細胞懸液,先加入特異的第一抗體,待反應完全后洗去未結合抗體,在加入熒光標記的第二抗體,生成抗原-抗體復合物,以流式細胞儀檢測其上標記的熒光素被激發后發出的熒光。 實
流式細胞術間接免疫熒光標記的樣品制備實驗
實驗方法原理取一定量的細胞懸液,先加入特異的第一抗體,待反應完全后洗去未結合抗體,在加入熒光標記的第二抗體,生成抗原-抗體復合物,以流式細胞儀檢測其上標記的熒光素被激發后發出的熒光。實驗材料實驗樣品試劑、試劑盒抗體、PBS溶液儀器、耗材移液器移液吸頭離心機實驗步驟一、不同來源樣品的處理1 . 培養細
流式細胞術間接免疫熒光標記的樣品制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取一定量的細胞懸液,先加入特異的第一抗體,待反應完全后洗去未結合抗體,在加入熒光標記的第二抗體,生成抗原-抗體復合物,以流式細胞儀檢測其上標記的熒光素被激發后發出的熒光。 實
免疫熒光技術的技術特點
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。
免疫熒光技術技術特點
該技術的主要特點是:特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是:非特異性染色問題尚未完全解決,結果判定的客觀性不足,技術程序也還比較復雜。熒光免疫法按反應體系及定量方法不同,還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡便,便于推廣。國外生產的TDM用試劑盒,有相當一部分
皮膚間接免疫熒光試驗
免疫熒光技術的原理是不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。間接免疫熒光試驗是將熒光素標記的抗體先與特異性抗體抗原復合物反應,形成抗原-抗體-抗抗體復合物體系。染色程序分為兩步,第一步:用未知未標記的抗體(待檢標本
免疫熒光染色(間接法)
1、切片固定后用毛細滴管吸取經適當稀釋的免疫血清滴加在其上,置于染色盒中保持一定的濕度,37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗兩次,10min,用吸水吸去或吹干余留的液體。?2、再滴加間接熒光抗體(如兔抗人 -球蛋白熒光抗體等),同上步驟,染色30min,37℃,緩沖鹽水
免疫熒光技術特點
該技術的主要特點是:特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是:非特異性染色問題尚未完全解決,結果判定的客觀性不足,技術程序也還比較復雜。 熒光免疫法按反應體系及定量方法不同,還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡便,便于推廣。國外生產的TDM用試劑盒,有相
免疫熒光的技術特點
該技術的主要特點是:特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是:非特異性染色問題尚未完全解決,結果判定的客觀性不足,技術程序也還比較復雜。熒光免疫法按反應體系及定量方法不同,還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡便,便于推廣。國外生產的TDM用試劑盒,有相當一部分
免疫熒光技術熒光抗體染色方法介紹間接法
間接法是根據抗球蛋白試驗的原理,用熒光素標記抗球蛋白抗體(簡稱標記抗抗體)的方法(圖)。間接法的檢測過程分為兩步:第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中在37℃下保溫30min,使抗原抗體充分結合,然后洗滌,除去未結合的抗體;第二步,加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、
免疫熒光的技術的間接法測抗體注意事項
1)熒光染色后一般在1h內完成觀察,或于4℃保存4h,時間過長 ,會使熒光減弱。 2)每次試驗時 ,需設置以下三種對照: ① 陽性對照:陽性血清+熒光標記物 ②陰性對照:陰性血清+熒光標記物 ③ 熒光標記物對照:PBS+熒光標記物 3)已知抗原標本片需在操作的各個步驟中,始終保持濕潤,
間接免疫熒光法原理
間接免疫熒光試驗是用特異性抗體與標本中相應抗原反應后,再用熒光素標記的第二抗體(抗抗體)與抗原-抗體復合物中第一抗體結合,洗滌后在熒光顯微鏡下觀察特異性熒光,以檢測未知抗原或抗體。本法比直接法敏感度提高5-10倍,且一種熒光二抗可檢測多種抗原抗體系統,缺點是易產生非特異性熒光。
免疫熒光技術的應用特點
該技術的主要特點是:特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是:非特異性染色問題尚未完全解決,結果判定的客觀性不足,技術程序也還比較復雜。熒光免疫法按反應體系及定量方法不同,還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡便,便于推廣。國外生產的TDM用試劑盒,有相當一部分
直接免疫熒光的技術特點
中文名稱直接免疫熒光英文名稱direct immunofluorescence定 義直接用熒光標記抗體來研究特異性抗原在細胞內定位的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
顯微術的技術特點
中文名稱顯微術英文名稱microscopy定 義利用顯微鏡、制片、染色等各種方法在細胞、亞細胞甚至原子水平觀察生命現象的技術。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,
間接免疫熒光和直接免疫熒光染色方法的異同
免疫熒光細胞化學方法的原理是根據抗原抗體反應的規律,把已知的抗原或抗體標記上熒光素,制成熒光抗原或抗體,然后以它作為探針來檢測組織或細胞內的相應物質。方法具體種類有直接法、間接法、夾心法和補體法等。在熒光顯微鏡下,根據其形成復合物所發的熒光,來確定判斷檢測物的來源、性質和部位。?1、直接法:這是最早
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,
簡述免疫熒光的技術的間接法測抗體的實驗步驟
1)滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于已知抗原標本片,10min后棄去,使標本片保持一定濕度。 2)滴加以0.01mol/L,pH7.4的PBS適當稀釋的待檢抗體標本,覆蓋已知抗原標本片。將玻片置于有蓋搪瓷盒內,37℃保溫30min。 3)取出玻片,置于玻片架上,先用0.01mol
關于免疫熒光的技術的間接法測抗體的原理介紹
⑴基本原理 染色程序分為兩步,第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗原抗體充分結合,然后洗滌,除去未結合的抗體。第二步,加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應,標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體
間接免疫熒光試驗的注意事項
檢查前: 抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食 物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。體檢前一天 的晚八時以后,應禁食,以免影響第二天空腹血糖等指標的檢測。 檢查時: 應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮、增加采血的困難 不適宜人群:沒有