免疫酶技術介紹
免疫酶技術(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫測定，是通過酶標記抗體或抗原來檢測抗原或抗體的方法，其應用范圍極廣。顯示方法是用酶的特殊底物來處理反應后的標本，通過酶催化底物的顯色反應來測定抗原或抗體的存在，以酶標作定量或定性分析。標記酶有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶等，它們與抗原或抗體結合后活性不受影響。底物一般是鄰苯二胺和對硝基苯磷酸酯。它具有敏感性高、特異性強，既可定性又可定量的特點。......閱讀全文
免疫電鏡相關技術實驗——酶標記免疫電鏡技術
實驗方法原理該技術是以酶為抗原—抗體反應的標記物，在不改變抗原抗體的免疫反應特異性，亦不降低酶活性條件下，與相應底物作用后形成不溶性的反應物。在電鏡下形成為電子散射力強的終末產物。用于免疫電鏡標記的酶有辣根過氧化物酶 (HRP)堿性磷酸酶 (AKP 或 ALP)葡萄糖氧化酶(GOP) 等。目前常用的
免疫酶標技術的技術特點
中文名稱免疫酶標技術英文名稱immunoenzymatic technique定 義以酶標記抗體（或抗原），通過相應底物被酶解后的顯色反應，對細胞和組織標本中的抗原-抗體復合體進行定位、定性分析和鑒定的方法。也可根據酶催化底物顯色的深淺程度，定量測定體液標本中待測抗原或抗體的含量。應用學科細胞生物
免疫酶技術的技術原理簡介
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物，與抗體或抗原聯結，與相應的抗原或抗體作用后，通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量，亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究，即酶免疫組織化學技術。 目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗（ELISA），
酶免疫技術抗體的酶標記方法
用于酶免疫技術的酶須具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室溫下穩定;反應產物易于顯現;能商品化生產。目前酶免疫技術檢測中常用的酶為辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)和堿性磷酸酶(AP),其次還有葡萄糖氧化酶、β-半乳糖苷酶、溶菌酶和蘋果酸脫氫酶等。由于辣根過氧化
細胞免疫化學：免疫酶標技術
1） 直接法1．標本固定。2．PBS洗滌2×3分鐘。3．1％?H2O2（或1％?H2O2?甲醇）抑制內源性過氧化物，室溫10～20分鐘。4．正常血清（1：10）孵育，室溫20分鐘。5．滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6．PBS洗滌3×3分鐘。7．DAB＋H2O2顯色5～10分鐘，鏡下控制染色
酶免疫電泳技術
實驗方法原理抗原與抗體在瓊脂糖凝膠中電泳時，在堿性緩沖液的條件下，抗原帶負電，向正極移動。不同分子量或還不同電荷的抗原，在相同條件下，移動距離不等。這些在不同部位的抗原，再與相關抗體經擴散形成免疫沉淀線。酶免疫電泳技術中的抗原與抗體就是酶和它的相應抗體球蛋白。酶抗原與酶抗體形成的免疫復合物是用底物顯
酶免疫技術使用的方法
ACA（抗心磷脂抗體）主要通過抑制血管內皮細胞合成PGI2，干擾血栓調節素、纖溶酶原激活劑和蛋白質C系統的活性，抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝狀態，與復發性動靜脈血栓形成、反復自然流產及血小板減少癥關系密切。 其主要程序為用純心磷脂的無水乙醇溶液包被聚苯乙烯板，封閉后分別于標本孔和對
概述免疫酶技術的原理
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物，與抗體或抗原聯結，與相應的抗原或抗體作用后，通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量，亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究，即酶免疫組織化學技術。 目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗（ELISA），
酶免疫電泳技術
一，酶免疫電泳技術的原理抗原與抗體在瓊脂糖凝膠中電泳時，在堿性緩沖液的條件下，抗原帶負電，向正極移動。不同分子量或還不同電荷的抗原，在相同條件下，移動距離不等。這些在不同部位的抗原，再與相關抗體經擴散形成免疫沉淀線。酶免疫電泳技術中的抗原與抗體就是酶和它的相應抗體球蛋白。酶抗原與酶抗體形成的免疫復合
關于酶免疫技術的簡介
酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法，是標記免疫技術的一種。近年來標記免疫技術飛速發展，應用不同標記物，根據不同原理、不同技術建立起來的檢測方法層出不窮，而方法的創建者往往給同類的方法以不同的名稱。因此確知某一方法屬于哪一類型，對該方法的正確理解有著重要意義。本節先敘述各種標記免疫技
免疫酶技術的操作步驟
（1） 用微量移液器分別加待檢血清、陽性對照、陰性對照各100μl于1、2、3孔中，370C水浴箱溫育30min。（2） 用PBS液洗板3次，每次3min，甩干。（3） 每孔加入酶結合物2滴，370C水浴箱溫育30min。（4） 用PBS液洗板3次，每次3min，甩干（5） 每孔分別加入顯色A液、B
酶免疫電泳技術
一，酶免疫電泳技術的原理抗原與抗體在瓊脂糖凝膠中電泳時，在堿性緩沖液的條件下，抗原帶負電，向正極移動。不同分子量或還不同電荷的抗原，在相同條件下，移動距離不等。這些在不同部位的抗原，再與相關抗體經擴散形成免疫沉淀線。酶免疫電泳技術中的抗原與抗體就是酶和它的相應抗體球蛋白。酶抗原與酶抗體形成的免疫復合
關于免疫酶技術的簡介
免疫酶技術(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫測定，是通過酶標記抗體或抗原來檢測抗原或抗體的方法，其應用范圍極廣。顯示方法是用酶的特殊底物來處理反應后的標本，通過酶催化底物的顯色反應來測定抗原或抗體的存在，以酶標作定量或定性分析。標記酶有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿
免疫酶標技術——直接法
實驗方法原理先將酶與抗體結合形成酶標抗體，然后和相應的抗原反應，使抗原抗體復合物上帶有酶分子，再與酶的底物H2O2—DAB（3’3—二胺荃聯苯胺）發生顯色反應，在顯微鏡下觀察，根據顏色產物檢測相應抗原。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定；2. ?PBS
免疫酶細胞化學實驗技術
免疫酶細胞化學免疫酶細胞化學是免疫細胞化學（Immunocytochemistry,ICC）中最常用的方法之一，它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下，借助于酶細胞化學的手段，檢測某種物質（抗原/抗體）在組織細胞內存在部位的一門新技術：即預先將抗體與酶連結，再使其與組織內特異抗原反應，經細胞化學染色
免疫酶標技術——間接法
實驗方法原理將酶標記在第二抗體上，再與已形成的抗原抗體復合物中的第一抗體反應。目前廣泛應用的PAP法、ABC法是在間接法的原理和技術的基礎上發展起來的。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定；2. ?PBS洗滌2×3 分鐘；3. ?1 %H2O2（或1 %
酶免疫技術的技術原理是什么？
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物，與抗體或抗原聯結，與相應的抗原或抗體作用后，通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量，亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究，即酶免疫組織化學技術。 為了檢測抗原可用夾心法。將特異性抗體吸附在固相載體（聚苯乙
酶免疫技術的技術原理是什么？
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物，與抗體或抗原聯結，與相應的抗原或抗體作用后，通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量，亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究，即酶免疫組織化學技術。 為了檢測抗原可用夾心法。將特異性抗體吸附在固相載體（聚苯乙
免疫酶技術中常用的酶-底物系統
各種免疫酶技術,最終都是以某種顯色反應而揭示待測物質來進行定性和定量分析。不同酶要選擇相應的底物,見下表。免疫酶技術中常用的酶-底物系統酶底物顯色反應測定波長/nm辣根過氧化物酶二氨基聯苯胺深褐色沉淀5-氨基水楊酸棕色449鄰苯二胺橘紅色492/460鄰聯甲苯胺藍色4254-硝基酚磷酸黃色400堿性
免疫學檢驗中的酶免疫技術
目前，免疫學檢驗中的標記技術主要包括酶免疫技術、熒光免疫技術、放射免疫技術、金免疫技術、化學發光免疫技術等。其中酶免疫技術是以酶標記的抗體（抗原）作為主要試劑，將抗原抗體反應的特異性和酶催化底物反應的高效性和專一性結合起來的一種免疫檢測技術。作為經典的三大標記技術之一，酶免疫技術在檢驗醫學中得到廣
免疫學檢驗中的酶免疫技術
20世紀中期，以放射免疫技術為代表的標記免疫技術相繼問世，它將某種可微量或超微量測定的物質（如放射性核素、熒光素、酶、化學發光劑等）標記于抗原（抗體）上制成標記物，加入到抗原抗體的反應體系中與相應的抗體（抗原）反應，以檢測標記物的有無及含量間接反映被測物的存在與多少。這些將標記技術與抗原抗體反應
臨床化學檢查方法介紹--固相酶免疫測定技術介紹
固相酶免疫測定技術介紹： 固相酶免疫測定主要是指ELISA，其基本原理是：使抗原或抗體結合到某種固相載體表面(包被)，并保持其免疫活性;用酶標記(另一種)抗原或抗體，保留其免疫活性和酶活性;在測定時，把待測標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應;用
免疫酶技術的技術特點和應用范圍
免疫酶技術(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫測定，是通過酶標記抗體或抗原來檢測抗原或抗體的方法，其應用范圍極廣。顯示方法是用酶的特殊底物來處理反應后的標本，通過酶催化底物的顯色反應來測定抗原或抗體的存在，以酶標作定量或定性分析。標記酶有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷
免疫酶細胞化學實驗技術-4
三、ICC在細胞功能研究中的應用 形態學研究目的之一是揭示組織細胞結構特征及其功能意義。利用ICC顯示給與細胞增殖標記物，是組織細胞學研究中形態和功能相結合的重要手段之一。目前常用的細胞增殖標記物有4種，Brdu (5—bromo—2--deoxyuridine), DNA polymerase
免疫酶技術的具體步驟
ACA（抗心磷脂抗體）主要通過抑制血管內皮細胞合成PGI2，干擾血栓調節素、纖溶酶原激活劑和蛋白質C系統的活性，抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝狀態，與復發性動靜脈血栓形成、反復自然流產及血小板減少癥關系密切。其主要程序為用純心磷脂的無水乙醇溶液包被聚苯乙烯板，封閉后分別于標本孔和對照孔中加
酶免疫技術的分類有幾種？
酶免疫組織化學技術：用于組織切片或其他標本中抗原的定位。 酶免疫測定技術（EIA）：用于液體標本中抗原或抗體的定性和定量。根據抗原抗體反應后是否需將結合和游離的酶標志物分離，EIA一般可分為均相和異相兩種類型。
免疫酶技術的具體步驟
ACA（抗心磷脂抗體）主要通過抑制血管內皮細胞合成PGI2，干擾血栓調節素、纖溶酶原激活劑和蛋白質C系統的活性，抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝狀態，與復發性動靜脈血栓形成、反復自然流產及血小板減少癥關系密切。其主要程序為用純心磷脂的無水乙醇溶液包被聚苯乙烯板，封閉后分別于標本孔和對照孔中加
免疫酶標技術——雙PAP法
實驗方法原理這種方法可在復合物體系中連接更多的PAP復合物，對抗原可進一步放大，因此靈敏度更為增強，適用于微量抗原的檢測。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清DAB蘇木精儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定后，PBS洗滌；2. ?1 %H2O2（或1 %H2O2甲醇）阻斷內源性過氧化物，室
免疫酶細胞化學實驗技術-2
（四）染色原理及步驟 1．基本原理 酶標抗體與熒光色素標記抗體的染色相同，亦分直接法和間接法。直接法是將酶直接標記在每一抗體上，間接法是將酶標記在第二抗體上，檢測組織細胞內的特定抗原物質。間接法所用的第一抗體是對組織細胞內某種抗原的特異性抗體（80%～90%的抗血清系由家兔制得，而絕大數單克隆
免疫酶細胞化學實驗技術-3
一、對照實驗 1．吸收實驗 應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時，需用相應的抗原吸收抗血清后，再孵育標本，判斷結果的可信性（結果應為陰性）。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種（見本書第一章 ），對于不能形成沉淀，難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原，以固相吸收為佳