關于離子交換層析法提取IgG的介紹
常用的離子交換劑有DEAE纖維素或QAE纖維素,以QAE-Sephadex最為理想,DE22、32、52也可應用。取QAE-SephadexA25或A50經酸處理并在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸鹽緩沖液中平衡,將水分抽干,稱濕重Ig加于10ml血清中,在室溫30min后,離心或過濾除去離子交換劑。上清液再如此處理一次,即獲得較純的IgG,甚至不含其他雜蛋白。用該技術純化IgG簡便,不損壞抗體,既可小量提取,也可大量制備。......閱讀全文
關于離子交換層析法提取IgG的介紹
常用的離子交換劑有DEAE纖維素或QAE纖維素,以QAE-Sephadex最為理想,DE22、32、52也可應用。取QAE-SephadexA25或A50經酸處理并在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸鹽緩沖液中平衡,將水分抽干,稱濕重Ig加于10ml血清中,在室溫30min后,離心或過濾
離子交換層析法提取IgG簡介
常用的離子交換劑有DEAE纖維素或QAE纖維素,以QAE-Sephadex最為理想,DE22、32、52也可應用。取QAE-SephadexA25或A50經酸處理并在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸鹽緩沖液中平衡,將水分抽干,稱濕重Ig加于10ml血清中,在室溫30min后,離心或過濾
親和層析法提取特異性IgG的相關介紹
將純化抗原或粗制抗原(如是單價特異性則對抗原要求不高)交聯Sepharose4B制成親和層析柱,將抗血清過柱后洗去未結合的雜蛋白,再用硫氰酸鉀洗脫,流出的是純的特異性IgG抗體。因硫氰酸鉀對抗體有破壞作用,應及時透析除去。純化的IgG因含量低,失去保護作用,應及時應用或凍干保存,亦可20℃保存,
簡述親和層析法提取特異性IgG
將純化抗原或粗制抗原(如是單價特異性則對抗原要求不高)交聯Sepharose4B制成親和層析柱,將抗血清過柱后洗去未結合的雜蛋白,再用硫氰酸鉀洗脫,流出的是純的特異性IgG抗體。因硫氰酸鉀對抗體有破壞作用,應及時透析除去。純化的IgG因含量低,失去保護作用,應及時應用或凍干保存,亦可20℃保存,
關于離子交換層析法的基本內容介紹
離子交換層析法(Ion Exchange Chromatography簡稱為IEC)是以離子交換劑為固定相,依據流動相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進行可逆交換時的結合力大小的差別而進行分離的一種層析方法。常用的離子交換劑有:離子交換纖維素、離子交換葡聚糖和離子交換樹脂 。 離子交換層析法中
離子交換層析法基本介紹
離子交換層析法(Ion Exchange Chromatography簡稱為IEC)是以離子交換劑為固定相,依據流動相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進行可逆交換時的結合力大小的差別而進行分離的一種層析方法。常用的離子交換劑有:離子交換纖維素、離子交換葡聚糖和離子交換樹脂 。 離子交換層析法中
離子交換層析法
離子交換層析法(ion exchange chromatography,簡稱IEC)是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物質的酸堿性、極性,也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離
離子交換層析法
離子交換層析法是以具有離子交換性能的物質作固定相,利用它與流動相中的離子能進行可逆的交換性質來分離離子型化合物的一種方法。⒈ 離子交換劑預處理和裝柱 對于離子交換纖維素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的顆粒,以保證有較好的均勻度,對于已溶脹好的產品則不必經這一步驟。溶脹的交換劑使用前要用稀酸或稀堿處
關于離子交換層析的發展介紹
1848年,Thompson等人在研究土壤堿性物質交換過程中發現離子交換現象。上世紀40年代,出現了具有穩定交換特性的聚苯乙烯離子交換樹脂。50年代,離子交換層析進入生物化學領域,應用于氨基酸的分析。離子交換層析是生物化學領域中常用的一種層析方法,廣泛的應用于各種生化物質如氨基酸、蛋白、糖類、核
關于離子交換層析的內容介紹
離子交換層析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提純中得到最廣泛應用的方法之一。 離子交換層析分離蛋白質是根據在一定pH 條件下,蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法。常用于蛋白質分離的離子交換劑有弱酸型的羧甲基纖維素(CM纖維素) 和弱堿型的二乙基
離子交換層析法簡介
離子交換層析法(Ion Exchange Chromatography簡稱為IEC)是以離子交換劑為固定相,依據流動相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進行可逆交換時的結合力大小的差別而進行分離的一種層析方法。常用的離子交換劑有:離子交換纖維素、離子交換葡聚糖和離子交換樹脂 。
離子交換層析法原理
離子交換層析法(ionexchangechromatography,簡稱IEC)是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物質的酸堿性、極性,也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來
多克隆抗體提取實驗——TrisCl離子交換層析法
實驗材料免疫血清雜交瘤腹水飽和硫酸銨粗提品試劑、試劑盒DE32或DE52纖維素Tris-ClNaClNaOHHCl儀器、耗材層析柱透析袋紫外分光光度計實驗步驟一、材料和試劑?1. ?DE32或DE52纖維素。?2. ?HCl;NaOH;0.01~0.05 mol/L,pH8.0 PB;0.01 mo
多克隆抗體提取實驗——TrisPO4-離子交換層析法
實驗材料免疫血清雜交瘤腹水飽和硫酸銨粗提品試劑、試劑盒DE32纖維素DE52纖維素梯度洗脫液Tris-PO4儀器、耗材層析柱透析袋紫外分光光度計實驗步驟一、材料和試劑?1. ?DE32或DE52纖維素。?2. 待純化標本:雜交瘤腹水或培養上清,免疫血清或飽和硫酸銨粗提品。?3. 1.5x50 cm
離子交換柱層析法(層析實驗簡介)概略
一、??? 原理:有些高分子物質含有一些可以分離的基因,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的離子產生交換反應。如:R-SO3H+M+ ———— R-S3M+H+或R-NH3OH+CL-? —————? R-NH3CL+OH-這類高分子物質通稱離子交換劑,其中使用最普遍的是離子交換樹脂。由
關于離子交換層析的基本信息介紹
離子交換層析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提純中得到最廣泛應用的方法之一。 離子交換層析分離蛋白質是根據在一定pH 條件下,蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法。常用于蛋白質分離的離子交換劑有弱酸型的羧甲基纖維素(CM纖維素) 和弱堿型的二乙基
關于離子交換層析的加樣相關介紹
層析所用的樣品應與起始緩沖液有相同的pH和離子強度,所選定的pH值應落在交換劑與被結合物有相反電荷的范圍,同時要注意離子強度應低,可用透析、凝膠過濾或稀釋法達此目的。樣品中的不溶物應在透析后或凝膠過濾前,以離心法除去。為了達到滿意的分離效果,上樣量要適當,不要超過柱的負荷能力。柱的負荷能力可用交
關于層析法的歷史介紹
1903年3月21日俄國植物學家茨維特(Michael Tswett,1872-1919)在華沙自然科學學會生物學會議上發表了“一種新型吸附現象及其在生化分析上的應用”研究論文,介紹了一種應用吸附原理分離植物色素的新方法,并首先認識到這種層析現象在分離分析方面有重大價值。1906年他在德國植物學
關于層析法的原理介紹
層析法利用混合物中各組分的物理化學性質間的差異(溶解度、分子極性、分子大小、分子形狀、吸附能力、分子親合力等),使各組分在支持物上集中分布在不同區域,借此將各組分分離。 層析法進行時有兩個相,一個相稱為固定相,另一相稱為流動相。由于各組分所受固定相的阻力和流動相的推力影響不同,各組分移動速度也
乳清蛋白分離物的離子交換層析法介紹
離子交換層析(Ion exchange chromatography,IEC)是以離子交換樹脂為固定相,通過流動相中離子與樹脂上的平衡離子進行可逆交換時的結合力大小的不同而進行分離的一種層析方法。通過分子中的活性離子將溶液中帶相反電荷的物質吸附在離子交換劑上,然后用適當的洗脫溶劑將吸附物質再從離
離子交換柱層析分離核苷酸實驗_離子交換層析法
本實驗以酵母RNA 為材料, 將RNA 用堿水解成單核苷酸,再用離子交換柱層析進行分離, 最后采用紫外吸收法進行鑒定。旨在了解并掌握RNA 堿水解的原理和方法,掌握離子交換柱層析的分離原理和方法,熟練掌握紫外吸收分析方法。實驗方法原理本實驗以酵母RNA 為材料, 將RNA 用堿水解成單核苷酸,再用離
離子交換層析法原理是什么
離子交換層析法(ionexchangechromatography,簡稱IEC)是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物質的酸堿性、極性,也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來
離子交換層析法原理是什么
離子交換層析法(ionexchangechromatography,簡稱IEC)是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物質的酸堿性、極性,也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來
離子交換層析法原理是什么
離子交換層析法(ionexchangechromatography,簡稱IEC)是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物質的酸堿性、極性,也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來
離子交換層析法濃縮蛋白實驗
實驗方法原理 離子交換層析可用于濃縮蛋白質溶液。因為大多數蛋白質的等電點均低于 8, 所以它們可在 pH 值為 8 的弱離子強度溶液中被陰離子交換樹脂吸附。用離子強度大的溶液可簡單的將它們洗脫下來,達到濃縮的目的。實驗材料 蛋白質溶液儀器、耗材 離子交換樹脂層析柱實驗步驟 1. 準備離子交換樹脂,裝
離子交換層析法原理是什么
離子交換層析法(ionexchangechromatography,簡稱IEC)是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物質的酸堿性、極性,也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來
離子交換層析法原理是什么
離子交換層析法(ionexchangechromatography,簡稱IEC)是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物質的酸堿性、極性,也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來
離子交換層析法濃縮蛋白實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 離子交換層析可用于濃縮蛋白質溶液。因為大多數蛋白質的等電點均低于 8, 所以它們可在 pH 值為 8 的弱離子強度溶液中被陰離子交換樹脂吸附。用離子強度大的溶液可簡單的將它們洗脫下來,達到濃縮的目的。
離子交換層析法濃縮蛋白實驗
實驗方法原理離子交換層析可用于濃縮蛋白質溶液。因為大多數蛋白質的等電點均低于 8, 所以它們可在 pH 值為 8 的弱離子強度溶液中被陰離子交換樹脂吸附。用離子強度大的溶液可簡單的將它們洗脫下來,達到濃縮的目的。實驗材料蛋白質溶液儀器、耗材離子交換樹脂層析柱實驗步驟1. 準備離子交換樹脂,裝配層析柱
離子交換層析法原理是什么
離子交換層析法(ionexchangechromatography,簡稱IEC)是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物質的酸堿性、極性,也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來