雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因，也就是說，是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。 一般的，把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中，報告基因被廣泛應用。如綠色熒光蛋白(GFP）和熒光素酶。熒光素酶（Luciferase）：是能夠催化不同底物氧化發光的一類酶的統稱，哺乳細胞無內源性熒光素酶。熒光素酶報告基因的優點蛋白不需要翻譯后加工，所以一旦翻譯立即產生報告活性。在所有的化學發光反應中，它的光產物具有最高的量子效率，因而非常靈敏。另外，在宿主細胞及檢測試劑中均檢測不到背景發光。檢測快速，每個樣品只需幾秒鐘二、實驗原理利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特性，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上......閱讀全文
雙熒光素酶驗證
miR 和LncRNA/circRNA/mRNA 結合雙熒光素酶驗證方案 一、 檢測原理全基因合成 miR 潛在結合位點上下游~500bp（ LncRNA、circRNA 或 mRNA 的3’UTR）野生形式 WT 及結合位點的突變形式 Mut，克隆到 psiCHECK-2 多克隆位點處
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
什么是雙熒光素酶
熒光素酶（Luciferase）是催化瑩光素氧合而發光的蛋白酶即[讓螢火蟲尾部熒光素發出熒光的蛋白質]瑩光素+ATP+O2-->氧合瑩光素+AMP+PPi+熒光
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
什么是雙熒光素酶
熒光素酶（Luciferase）是催化瑩光素氧合而發光的蛋白酶即[讓螢火蟲尾部熒光素發出熒光的蛋白質]瑩光素+ATP+O2-->氧合瑩光素+AMP+PPi+熒光
什么是雙熒光素酶
熒光素酶（Luciferase）是催化瑩光素氧合而發光的蛋白酶即[讓螢火蟲尾部熒光素發出熒光的蛋白質]瑩光素+ATP+O2-->氧合瑩光素+AMP+PPi+熒光
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因，也就是說，是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的，把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中，
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因，也就是說，是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的，把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中，
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因，也就是說，是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的，把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中，
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因，也就是說，是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的，把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中，
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因，也就是說，是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的，把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中，
雙熒光素酶實驗原理是什么
v雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興
雙熒光素酶實驗原理是什么
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理是什么
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理是什么
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶報告基因測試
在用螢火蟲熒光素酶定量基因表達時 ，通常采用第二個報告基因來減少實驗的變化因素。但傳統的共報告基因（比如CAT，β-Gal，GUS）不夠便利。因為各自的測試化學，處理要求，檢測特點存在差異。Promega提供一種先進的雙報告基因技術，結合了螢火蟲熒光素酶測試和海洋腔腸熒光素酶測試。雙熒光素酶報告基因
雙熒光素酶實驗原理是什么
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶轉煙草如何觀察
觀察雙熒光素酶轉煙草可以通過以下步驟：1.準備轉基因煙草植株：使用含雙熒光素酶基因的轉基因煙草，使其表達熒光蛋白。2.觀察煙草植株：使用熒光顯微鏡觀察轉基因煙草植株，檢查其是否表達熒光蛋白。熒光顯微鏡可以用來觀察轉基因煙草葉片、莖、花和果實等部位，以檢查是否存在熒光信號。3.測定熒光強度：可以使用熒
雙熒光素酶實驗原理是什么
雙熒光素酶實驗原理：利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因（firefly luciferase）的上游，構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞，適當刺激或處理后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶檢測的原理和應用
一、熒光素酶報告基因的檢測原理熒光素酶（Luciferase）是生物體內催化熒光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化發光的一類酶的總稱，來自于自然界能夠發光的生物。自然界存在的熒光素酶來自螢火蟲、發光細菌、發光海星、發光節蟲、發光魚、發光甲蟲等。細菌熒光素酶對熱敏
雙熒光素酶報告基因檢測（二）
雙熒光素酶報告基因檢測（二）雙熒光素酶實驗通常被用來評估miRNA是否與其潛在的靶基因發生相互作用。實驗中，預測的miRNA靶標基因的3’-UTR序列被克隆到含有螢火蟲熒光素酶的報告基因載體的3’-UTR位置。如果miRNA與插入到質粒中的目標序列發生結合，miRNA將通過抑制該序列的翻譯來降低螢火
雙熒光素酶報告基因檢測（三）
雙熒光素酶報告基因檢測（三）螢火蟲熒光素酶片段互補成像（LCI）技術是一種新興的蛋白質相互作用研究方法，其中兩個被研究的目標蛋白質分別與螢火蟲熒光素酶的N端和C端相連。當這兩個蛋白質發生相互作用時，熒光素酶的兩個段落會接近并組合成一個活性酶。結合煙草瞬時表達系統的LCI技術，能夠在植物細胞內進行實時