雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,報告基因被廣泛應用。如綠色熒光蛋白(GFP)和熒光素酶。熒光素酶(Luciferase):是能夠催化不同底物氧化發光的一類酶的統稱,哺乳細胞無內源性熒光素酶。熒光素酶報告基因的優點蛋白不需要翻譯后加工,所以一旦翻譯立即產生報告活性。在所有的化學發光反應中,它的光產物具有最高的量子效率,因而非常靈敏。另外,在宿主細胞及檢測試劑中均檢測不到背景發光。檢測快速,每個樣品只需幾秒鐘二、實驗原理利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特性,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上......閱讀全文
雙熒光素酶驗證
miR 和LncRNA/circRNA/mRNA 結合雙熒光素酶驗證方案 一、 檢測原理全基因合成 miR 潛在結合位點上下游~500bp( LncRNA、circRNA 或 mRNA 的3’UTR)野生形式 WT 及結合位點的突變形式 Mut,克隆到 psiCHECK-2 多克隆位點處
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
什么是雙熒光素酶
熒光素酶(Luciferase)是催化瑩光素氧合而發光的蛋白酶即[讓螢火蟲尾部熒光素發出熒光的蛋白質]瑩光素+ATP+O2-->氧合瑩光素+AMP+PPi+熒光
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
什么是雙熒光素酶
熒光素酶(Luciferase)是催化瑩光素氧合而發光的蛋白酶即[讓螢火蟲尾部熒光素發出熒光的蛋白質]瑩光素+ATP+O2-->氧合瑩光素+AMP+PPi+熒光
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
什么是雙熒光素酶
熒光素酶(Luciferase)是催化瑩光素氧合而發光的蛋白酶即[讓螢火蟲尾部熒光素發出熒光的蛋白質]瑩光素+ATP+O2-->氧合瑩光素+AMP+PPi+熒光
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,
雙熒光素酶報道系統詳解
一、概述報告基因 (reporter gene):是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。? 一般的,把報告基因的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。在基因表達調控的研究中,
雙熒光素酶實驗原理是什么
v雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興
雙熒光素酶實驗原理是什么
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理是什么
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶實驗原理是什么
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶報告基因測試
在用螢火蟲熒光素酶定量基因表達時 ,通常采用第二個報告基因來減少實驗的變化因素。但傳統的共報告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不夠便利。因為各自的測試化學,處理要求,檢測特點存在差異。Promega提供一種先進的雙報告基因技術,結合了螢火蟲熒光素酶測試和海洋腔腸熒光素酶測試。雙熒光素酶報告基因
雙熒光素酶實驗原理是什么
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶轉煙草如何觀察
觀察雙熒光素酶轉煙草可以通過以下步驟:1.準備轉基因煙草植株:使用含雙熒光素酶基因的轉基因煙草,使其表達熒光蛋白。2.觀察煙草植株:使用熒光顯微鏡觀察轉基因煙草植株,檢查其是否表達熒光蛋白。熒光顯微鏡可以用來觀察轉基因煙草葉片、莖、花和果實等部位,以檢查是否存在熒光信號。3.測定熒光強度:可以使用熒
雙熒光素酶實驗原理是什么
雙熒光素酶實驗原理:利用熒光素酶與底物結合發生化學發光反應的特點,把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因(firefly luciferase)的上游,構建成熒光素酶報告質粒。然后轉染細胞,適當刺激或處理后裂解細胞,測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷性刺前后或不同刺激對感興趣
雙熒光素酶報告基因實驗原理
雙熒光素酶報告基因實驗原理具體如下:雙熒光素酶報告基因實驗原理是利用雙熒光素酶作為熒光素酶的標記來研究基因表達與調控的機制。雙熒光素酶報告基因實驗是一種基因表達定量分析技術,通過將雙熒光素酶Luciferase作為報告基因插入到需要研究的靶基因啟動子區域或轉錄后區域,使其與靶基因協同表達。當熒光素基
雙熒光素酶檢測的原理和應用
一、熒光素酶報告基因的檢測原理熒光素酶(Luciferase)是生物體內催化熒光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化發光的一類酶的總稱,來自于自然界能夠發光的生物。自然界存在的熒光素酶來自螢火蟲、發光細菌、發光海星、發光節蟲、發光魚、發光甲蟲等。細菌熒光素酶對熱敏
如何使用多功能酶標儀檢測雙熒光素酶
報告基因檢測被廣泛應用于研究基因表達及外部刺激下原核和真核細胞的反應。Luciferase報告基因系統是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統。可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達。但是報告基因實驗中往往會受到各種實驗條件的影響