新技術推動CRISPR、TALEN廣泛介導基因敲入
使用一種新型的基因敲入（knock-in）技術，來自日本的科學家們將外源基因有效地插入到了人類細胞和包括蠶及青蛙在內的動物模型中。這種策略不僅能夠在培養細胞中，還可以在各種生物體中普遍實現基因敲入。相關研究結果發布在近日的《自然通訊》（Nature Communications）雜志上。 當前TALENs 和CRISPR/Cas9等可編程核酸酶已被廣泛應用于基因工程中，用來實現基因敲除、基因敲入和各種染色體重排。基因敲入通常是通過共同導入可編程核酸酶和單鏈寡核苷酸或是包含左右同源臂的靶向載體，誘導同源重組（HR）依賴性的基因添加來實現。 盡管同源重組介導的基因敲入能夠精確插入大的DNA片段。構建靶向載體往往很費力，且在大多數培養細胞和生物體中同源重組活性都相對較低。這一問題為同源重組介導的基因敲入技術應用于生命科學領域設置了技術障礙。 與之相反，研究人員常常利用可編程核酸酶借助于微同源(microhomology)介導......閱讀全文
－Cell子刊突破：無需克隆的CRISPR新技術
來自荷蘭Hubrecht研究所和烏特勒支醫學中心（UMC Utrecht）、麻省理工學院的研究人員稱，他們開發出了一種自身克隆CRISPR/Cas9(scCRISPR)技術，可以繞開基因編輯過程中所有的克隆步驟，在數小時內完成CRISPR/Cas9介導基因突變及位點特異性轉基因敲入。他們的研究成
Rosa2基因組中的安全位點
當我們提到“safe harbour”，你首先想到的什么呢？我們今天要討論的不是船只安全停泊的港口，而是小鼠基因組中外源基因定點整合的安全位點。接下來就讓我們一起探索小鼠基因組中的最經典的安全位點之一：Rosa26，作為基因組中的安全位點是種怎樣的體驗吧。?Rosa26：安全這塊我拿捏的死死地！?隨
用CRISPR構建誘導性基因敲除人類干細胞系
來自威斯康星大學的研究人員報告稱，他們開發出了一種新策略來快速構建誘導性基因敲除（iKO）人類多能干細胞（hPSC）系。相關研究論文發布在7月2日的《細胞干細胞》（Cell stem cell）雜志上 威斯康星大學的張素春（Su-Chun Zhang）教授及助理研究員Yuejun Chen是這
基因重組和DNA重組區別
基因重組是由于不同DNA鏈的斷裂和連接而產生DNA片段的交換和重新組合，形成新DNA分子的過程。 在人類的生殖細胞中發現的46條染色體發生在生物體內基因的交換或重新組合。基因重組是生物遺傳變異的一種機制，包括同源重組、位點特異重組、轉座作用和異常重組四大類。DNA重組指DNA分子內或分子間發生的遺傳
病毒介導基因轉移
病毒介導基因轉移：前述的化學和物理方法都是通過傳染方式基因轉移。病毒介導基因轉移（viral mediatedgene transfer）是通過轉換方式完成基因轉移，即以病毒為載體（vector），將外源目的基因通過基因重組技術，將其組裝于病毒上，讓這種重組病毒去感染受體宿主細胞，這種病毒稱為病毒運
Small：利用近紅外光觸發Cre重組酶介導的基因組編輯
在細胞中進行基因組編輯的一個主要障礙是細胞本身。美國加州大學圣塔芭芭拉分校化學與生物化學系教授Norbert Reich解釋道，“人細胞不喜歡攝入東西。”人細胞已形成一種“垃圾處理”機制來分離和降解外來的蛋白、其他的不想要的生物分子和病原體，甚至是受損的細胞結構。因此，對生物技術、生物制藥和基因
外源基因表達新進展，工具豬價值翻倍
近日，中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院賴良學課題組在可誘導外源基因表達工具豬培育及其應用取得新進展，成功建立了僅需一輪體細胞克隆，即可獲得可穩定遺傳的藥物調控外源基因表達的工具豬模型。相關研究在線發表于Science China Life Sciences。 高表達外源基因的基因修飾豬在生物醫
以自然為師－基因敲高獲突破
近日，中國農業大學植物保護學院姜臨建與青島清原化合物有限公司李華榮、中科院分子植物科學卓越創新中心朱健康、貴州大學宋寶安等研究人員開展合作，報道了一種“基因敲高”的新策略。11月15日，相關論文發表于《自然—植物》。 研究人員表示，這項研究進一步深化了對基因編輯工具的認知和理解。基因編輯創制基
基因敲減的概念和功能作用
利用雙鏈小RNA高效、特異性降解細胞內同源mRNA，從而阻斷體內靶基因的表達，使細胞出現靶基因缺失的表型。它不同于基因敲除（Gene knock-out）使目標基因永久性的表達沉默，而是通過降解具有同源序列靶基因的mRNA，達到阻止基因表達的作用，因此被形象地稱為“基因敲低”（Gene knock-
基因功能研究策略
隨著人類基因組計劃的順利進行,越來越多的新基因被發現,基因功能研究成為生命科學領域中的重大課題,目前基因功能研究方法主要有基因轉導、反義技術、轉基因和基因剔除、染色體轉導、RNA 干涉等。一、 正常情況：DNA→mRNA→蛋白質→功能（遺傳效應以及表型）二、 基因功能研究策略：1、 基因功能的獲得（
獼猴早期胚胎發育研究獲進展
日前，中科院昆明動物所鄭萍課題組與中科院馬普計算所韓敬東課題組合作，研究揭示了 非人靈長類動物（如獼猴）較小鼠更適合于研究人類早期胚胎發育調控機制。該成果在線發表《基因組研究》。 已知靈長類的早期胚胎與小鼠比較，具更高的染色體異常發生率及胚胎發育失敗率，但機制并不清楚。 科研人員繪制了首個
基因編輯到底是什么
? ? ? ?CRISPR/Cas9系統中sgRNA(smallguideRNA)識別并結合目標基因的靶向序列，引導Cas9對結合位點進行剪切，產生DNA雙鏈斷裂（double-strandbreak,DSB），機體自身通過非同源重組（non-homologousendjoining，NHEJ）的方
獼猴早期胚胎發育研究獲進展
日前，中科院昆明動物所鄭萍課題組與中科院馬普計算所韓敬東課題組合作，共同完成了題為Transcriptome analyses of rhesus monkey pre-implantation embryos reveal a reduced capacity for DNA double s
敲降斑馬魚基因的方法學比較
一、基因敲降的前期準備工作相同 1.1 生物信息學分析目標基因在斑馬魚早期胚胎發送過程中是否有表達。 1.2 收集斑馬魚早期發育胚胎（通常為48 hpf前的胚胎），提取總RNA，然后進行體外轉錄（RT）。 1.3 設計檢測目標基因表達的PCR引物，以1.2獲得的cDNA為模板，
敲降斑馬魚基因的方法學比較
一、基因敲降的前期準備工作相同 1.1 生物信息學分析目標基因在斑馬魚早期胚胎發送過程中是否有表達。 1.2 收集斑馬魚早期發育胚胎（通常為48 hpf前的胚胎），提取總RNA，然后進行體外轉錄（RT）。 1.3 設計檢測目標基因表達的PCR引物，以1.2獲得的cDNA為模板，
敲降斑馬魚基因的方法學比較
一、基因敲降的前期準備工作相同1.1 生物信息學分析目標基因在斑馬魚早期胚胎發送過程中是否有表達。1.2 收集斑馬魚早期發育胚胎（通常為48 hpf前的胚胎），提取總RNA，然后進行體外轉錄（RT）。1.3 設計檢測目標基因表達的PCR引物，以1.2獲得的cDNA為模板，進行PCR擴增，確認目標基因
關于基因重組的自然重組的介紹
自然界不同物種或個體之間的基因轉移和重組是經常發生的,它是基因變異和物種進化的基礎。自然界的基因轉移的方式有： 接合作用：當細胞與細胞、或細菌通過菌毛相互接觸時,質粒DNA就可從一個細胞（細菌）轉移至另一細胞(細菌）,這種類型的DNA轉移稱為接合作用（conjugation ）。 轉化作用（
基因重組的簡述
基因重組是由于不同DNA鏈的斷裂和連接而產生DNA片段的交換和重新組合，形成新DNA分子的過程。1974年波蘭斯吉巴爾斯基（Waclaw Szybalski）稱基因重組為合成生物學，1978年他在《基因》期刊中寫道：限制酶將帶領我們進入合成生物學的新時代。
基因重組的定義
重組（recombination） 雜交后代的個體中出現了親代所沒有的基因組合的現象。
什么是基因重組
基因重組是造成基因型變化的核酸的交換過程，是生物體內細胞中DNA序列的改變。基因重組是在生物體進行有性生殖的過程中，控制不同性狀的基因重新組合。基因重組一般發生在減數分裂過程中，包含兩種情況，一種是減一后期同源染色體上的等位基因彼此分離，非同源染色體上的非等位基因彼此結合；另一種情況是聯會時期的交叉
基因重組的分類
①基因的自由組合:減數分裂(減1后期)形成配子時,隨著非同源染色體的自由組合,位于這些染色體上的非等位基因也自由組合。組合的結果可能產生與親代基因型不同的個體。②基因的交叉互換:減Ⅰ四分體時期,同源染色體上(非姐妹染色單體)之間等位基因的交換。結果是導致染色單體上基因的重組,組合的結果可能產生與親代
基因重組的應用——基因診斷
通過使用基因芯片分析人類基因組，可找出致病的遺傳基因。癌癥、糖尿病等，都是遺傳基因缺陷引起的疾病。醫學和生物學研究人員將能在數秒鐘內鑒定出Z終會導致癌癥等的突變基因。借助一小滴測試液，醫生們能預測藥物對病人的功效，可診斷出藥物在ZL過程中的不良反應，還能當場鑒別出病人受到了何種細菌、病毒或其他微生物
基因重組應用——轉基因技術
基因重組中轉基因技術的理論基礎來源于進化論衍生來的分子生物學。基因片段的來源可以是提取特定生物體基因組中所需要的目的基因，也可以是人工合成指定序列的DNA片段。基因重組DNA片段被轉入特定生物中，與其本身的基因組進行重組，再從重組體中進行數代的人工選育，從而獲得具有穩定表現特定的遺傳性狀的個體。該技
北大魏文勝課題組：提高基因敲除效率的新方法
基因組編輯技術，可讓科學家們能夠在各種哺乳動物細胞系中實現基因敲除。然而，用一種典型的方法，以一種及時的方式，完全破壞一個靶基因，在技術上是具有挑戰性的。為了提高產生可靠基因組修飾的效率，北京大學生命科學學院魏文勝課題組，設計了一種方法，其使用一個線性供體片段，該片段包含一個報告系統。結合一種不
北大魏文勝課題組：提高基因敲除效率的新方法
基因組編輯技術，可讓科學家們能夠在各種哺乳動物細胞系中實現基因敲除。然而，用一種典型的方法，以一種及時的方式，完全破壞一個靶基因，在技術上是具有挑戰性的。為了提高產生可靠基因組修飾的效率，北京大學生命科學學院魏文勝課題組，設計了一種方法，其使用一個線性供體片段，該片段包含一個報告系統。結合一種不依賴
用CRISPR構建轉基因動物的簡單方法
轉基因動物（GM）在基因功能和人類疾病研究中起到了重要的作用。CRISPR-Cas是一種強大的基因組編輯工具，注射到受精卵之后可以生成相應的轉基因動物。不過，用CRISPR在受精卵中靶向敲入（KI）大片段并不容易。 日本京都大學的研究團隊在一月二十日的Nature Communications
經5年攻關,朱健康研究組在CRISPR領域取得重大進展,
2018年5月17日，朱健康研究組在Nature Communications在線發表了題為“CRISPR/Cas9-mediated gene targeting in Arabidopsis using sequential transformation”的研究論文，該論文報道了擬南芥中基因
我學者用CRISPR讓豬生產人血白蛋白
在許多情況下，在大型家養動物中進行精確的基因組修飾，是可取的。在過去，這只能通過冗長而繁瑣的克隆程序才能進行。近期，來自軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所、第三軍醫大學、南京大學、國家蛋白質科學中心和廣州醫科大學附屬第一醫院的研究人員，通過使用最新的基因組編輯工具CRISPR/Cas9，將人血白
病毒介導基因轉移技術介紹
病毒介導基因轉移：前述的化學和物理方法都是通過傳染方式基因轉移。病毒介導基因轉移（viral mediatedgene transfer）是通過轉換方式完成基因轉移，即以病毒為載體（vector），將外源目的基因通過基因重組技術，將其組裝于病毒上，讓這種重組病毒去感染受體宿主細胞，這種病毒稱為病毒運
RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料pGEM-T 載體 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DNA 模板 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒d
