常用酶標記法介紹
酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml,混勻并裝透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時(或過夜)使之結合,然后吸出,加硼氫化鈉(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小時,將上述結合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液,置4℃冰箱30分鐘后離心,將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中,并對之透析過夜(4℃),次日離心除去不溶物,即得到酶標抗體,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,......閱讀全文
常用酶標記法介紹
酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出
改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體
HRP分子中與酶活性無關的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發生自身偶聯,在標記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結合反應后,再加入硼氫化鈉還原成穩定的結合物。 (1) 取HRP 5mg溶
實驗動物常用的標記法
常用的標記法有染色、耳緣剪孔、烙印、號牌等方法。二)烙印法用刺數鉗在動物耳上刺上號碼,然后用棉簽蘸著溶在酒精中的黑墨在刺號上加以涂抹,烙印前最好對烙印部位預先用酒精消毒。(三)針刺法用七號或八號針頭蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等處刺入皮下,在受刺部位留有一黑色標記。該法適用于大小鼠、豚鼠
什么是酶標記法?
酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 ,
酶標儀酶標法介紹
酶聯免疫吸附試驗方法簡稱酶標法,是標記技術中的一種,是從熒光抗體技術,同位素免疫技術發展而來的一種敏感,特異,快速并且能自動化的現代技術。酶標法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯劑結合為酶標抗原或抗體,此酶標抗原或抗體可與固相載體上或組織內相應抗原或抗體發生特異反應,并牢固地結合形成仍保持活性的免疫
酶標法的相關介紹
酶標法是指使用 酶聯免疫吸附試驗( ELISA)來檢測HIV抗體。這種方法是根據酶免疫測定原理發展的一種技術,其基本方法分三類:間接法、雙抗原夾心法和抗體競爭法。 目前國內外主要使用的是第三代(雙抗原夾心法)試劑。血源篩查以第三代 ELISA為主,國際上有些國家和地區已經將第四代 ELISA試劑
酶聯免疫吸附酶標記法的方法特點介紹
酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出
免疫電鏡膠體金標記法(簡稱金標法)
1、 包埋后染色 (超薄切片的金標記法)(1)超薄切片厚50~70nm左右,載于200~300網孔的鎳網上;(2)滴1%的H2O2液1滴于蠟板上,將網的載片面輕浮于液滴上10min至1h;(3)雙蒸水洗3次,每次10分鐘。第1、2次洗法如(2),浮于液面上,第3次以盛雙蒸水的注射器沿鎳網面沖洗,水流
酶標儀采用的酶標法介紹
酶標儀即酶聯免疫檢測儀,是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來分析抗原或抗體的含量。 酶標法是什么? 酶聯免疫吸附試驗方法簡稱酶標法,是標記技術中的一種,是從熒光抗體技術,同位素免疫技術發展而來的一種敏感
關于酶標板的分類介紹
類型主要根據酶標儀進行選擇。又分可拆和不可拆的,對于不可拆的,就是一整塊板上的板條都是連在一起的,那么可拆的就是板子上面的板條是分開的,分出來的板條又有12孔和8孔之分。一般用的較多的是可拆的酶標板,如果你之前買了一些這樣的板子,那么完全可以只買些酶標板條就可以了。不同的廠家做出來的酶標板雖然整
酶標分析儀的用途介紹
酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中,例如低紫外區的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量,酶活、酶動力學檢測,酶聯免疫測定(ELISAs),細胞增殖與毒性分析,細胞凋亡檢測(MTT),報告基因檢測及G蛋白偶聯受體分析(GPCR)等。特別在近幾
免疫酶標技術
1) 直接法1.標本固定。2.PBS洗滌2×3分鐘。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制內源性過氧化物,室溫10~20分鐘。4.正常血清(1:10)孵育,室溫20分鐘。5.滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6.PBS洗滌3×3分鐘。7.DAB+H2O2顯色5~10分鐘,鏡下控制染色
免疫酶標技術
中文名稱免疫酶標技術英文名稱immunoenzymatic technique定 義以酶標記抗體(或抗原),通過相應底物被酶解后的顯色反應,對細胞和組織標本中的抗原-抗體復合體進行定位、定性分析和鑒定的方法。也可根據酶催化底物顯色的深淺程度,定量測定體液標本中待測抗原或抗體的含量。應用學科細胞生物
酶標洗板機
酶標洗板機是全自動處理效果,具備多點定位吸液功能,每孔清洗液殘留量
免疫酶標技術
實驗方法原理 先將酶與抗體結合形成酶標抗體,然后和相應的抗原反應,使抗原抗體復合物上帶有酶分子,再與酶的底物H2O2—DAB(3’3—二胺荃聯苯胺)發生顯色反應,在顯微鏡下觀察,根據顏色產物檢測相應抗原。實驗材料 抗體試劑、試劑盒 PBSH2O2血清儀器、耗材 顯微鏡實驗步驟 1. ?標本固定;2.
免疫酶標技術
免疫酶標技術1)??直接法1.標本固定。2.PBS洗滌2×3分鐘。3.1%?H2O2(或1%?H2O2?甲醇)抑制內源性過氧化物,室溫10~20分鐘。4.正常血清(1:10)孵育,室溫20分鐘。5.滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6.PBS洗滌3×3分鐘。7.DAB+H2O2顯色5~10分鐘
常用免疫組織化學方法的原理免疫酶標方法
免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是最常用的技術。本方法與免疫熒光技術相比的主要優點是:定位準確,
酶標檢測儀的產品說明介紹
1、酶標、酶標動力學、紫外、凝集四種功能檢測 2、多通道光纖測量系統,2秒檢測96孔 3、CUT OFF定性處理系統 4、直線、曲線、直線回歸定量系統 5、震板裝置、震動時間、程度任意調節 6、可內置8個濾光片。自動轉換,單、雙多波長檢測 7、隨機贈送計算機操作軟件,隨時與計算機實行
關于酶標板的基本信息介紹
酶標板(ELISA PLATE)在酶聯免疫吸附試驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中,參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。
關于酶標分析儀的相關介紹
1、 測量準確,重復性好,具有質控功能,無須外接計算機即可自動提供31天質控數據及X平均值、 SD、CV值 2、 能做定性、定量、基因檢測 3、 開放型軟件,可適應目前國內外任何廠家的試劑 4、 可預設操作程序,并可儲存檢測結果 5、 檢測結果既可直接顯示在屏幕上,也可打印保存 6、
酶標分析儀的相關知識介紹
? ? 國產實驗室儀器近年來發展迅猛,在技術上已經較以往有了大幅度的提升,在價格上更是有較大的優勢,因此當前國產實驗室儀器的應用前景非常廣闊,而隨著實驗室儀器種類和數量的不斷增多,酶標分析儀這種儀器在實驗室中也常能看到它的身影,為了讓大家對其有更深的了解,這里就酶標分析儀的功能、工作原理和清潔等方面
關于酶標板的選擇和分類介紹
要根據您的酶標儀進行選擇。 另外,又分可拆和不可拆的,對于不可拆的,就是一整塊板上的板條都是連在一起的,那么可拆的就是板子上面的板條是分開的,分出來的板條又有12孔和8孔之分。一般現在用的較多的是可拆的酶標板,如果你之前買了一些這樣的板子,那么現在完全可以只買些酶標板條就可以了。不同的廠家做出
自旋標記法的方法介紹
自旋標記 (spin label), 很多物質的分子不表現電子自旋共振(ESR),但對這些分子,人工地使之與自由基(free radical)結合從而得以用ESR法來研究,獲得獨特的ESR信息,這就是自旋標記法。
什么是酶標板?
酶標板(ELISA PLATE):在酶聯免疫吸附試驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中, 參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。此外,作為載體的固相聚苯
酶標板的簡介
酶標板(ELISA PLATE):在酶聯免疫吸附試驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中, 參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。此外,作為載體的固相聚苯
酶標板的分類
這這要根據您的酶標儀進行選擇。 要根據您的酶標儀進行選擇。 另外,又分可拆和不可拆的,對于不可拆的,就是一整塊板上的板條都是連在一起的,那么可拆的就是板子上面的板條是分開的,分出來的板條又有12孔和8孔之分。一般現在用的較多的是可拆的酶標板,如果你之前買了一些這樣的板子,那么現在完全可以只買
什么是酶標法?
酶聯免疫吸附試驗方法簡稱酶標法,是標記技術中的一種,是從熒光抗體技術,同位素免疫技術發展而來的一種敏感,特異,快速并且能自動化的現代技術。 酶標法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯劑結合為酶標抗原或抗體,此酶標抗原或抗體可與固相載體上或組織內相應抗原或抗體發生特異反應,并牢固地結合形成仍保持活
關于酶標檢測儀的主要特性介紹
1、多種測量方式、數據處理方式,儀器操作方式可供選擇,操作簡便 2、可編制、存貯、刪改操作程序和曲線及各種參數,可貯存64個程序 3、打印結果排列與板孔排列一致,并同時打印實驗程序、日期、時間 4、整板孔間統計分析,可用于質控檢驗及酶標板質量檢驗 5、空白孔、陰性、弱陽性、陽性對照孔任意
高結合力酶標板的基本介紹
酶標板經表面處理后蛋白結合能力大大増強,可達300-400ng 1gG/cm2,主要結合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產生非特異性反應。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑。
中結合力酶標板的基本介紹
酶標板經表面疏水鍵被動與白結合,適合作為分子量20D的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合能力為200-300 ng 1gG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異性交又反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。