常用酶標記法介紹
酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml,混勻并裝透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時(或過夜)使之結合,然后吸出,加硼氫化鈉(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小時,將上述結合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液,置4℃冰箱30分鐘后離心,將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中,并對之透析過夜(4℃),次日離心除去不溶物,即得到酶標抗體,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,......閱讀全文
Genome-Biology發文介紹RNA印記法
生物學家們逐漸意識到,RNA不只是DNA和蛋白之間的過渡產物,它對調節基因的表達有重要作用。深入研究RNA調控,能夠幫助科學家們進一步理解相關疾病。 賓夕法尼亞大學的科學家們開發了分析RNA調控的新方法,這一方法能夠有效獲得RNA與RNA結合蛋白(RBP)互作的所有位點。這一發表在Geno
雙鏈DNA探針標記法介紹
分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。1.?切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的
酶標分析儀是什么?酶標分析儀用途有哪些?
酶標分析儀即酶聯免疫檢測儀,是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。酶標分析儀分為半自動和全自動兩大類,其工作原理基本一致,核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。與適配試劑配合用于生物樣本中待測物的定性和定量分析。 按照功能不同酶標分析儀可以分為光吸收酶標儀,熒光酶標儀,化學發光酶標
什么是酶標洗板機
? ?洗板機是專門清洗酶標板的,一般和酶標儀配套使用。已經廣泛地被用于醫院、血站、衛生防疫站、試劑廠、研究室的酶標板清洗工作。 ? ?酶標洗板機是全自動處理效果,具備多點定位吸液功能,每孔清洗液殘留量
酶標洗板機的簡介
酶標洗板機m312666是全自動處理效果具備多點定位吸液功能,每孔清洗液殘留量
什么是酶標洗板機
??洗板機是專門清洗酶標板的,一般和酶標儀配套使用。已經廣泛地被用于醫院、血站、衛生防疫站、試劑廠、研究室的酶標板清洗工作。????酶標洗板機是全自動處理效果,具備多點定位吸液功能,每孔清洗液殘留量
酶標抗體標記效果測定
酶標抗體標記效果測定:測定內容包括酶和抗體活性、結合物中酶含量和IgG含量、酶與IgG摩爾比值以及結合率。
什么是酶標洗板機
酶標洗板機是全自動處理效果,具備多點定位吸液功能,每孔清洗液殘留量
酶標分析儀簡介
酶標分析儀即酶聯免疫檢測儀,是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。 酶標分析儀即酶聯免疫檢測儀,是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。酶標分析儀分為半自動和全自動兩大類 ,其工作原理基本一致,核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。與適配試劑配合用于生物樣本中待測物的定性和定
什么是酶標洗板機
? ??洗板機是專門清洗酶標板的,一般和酶標儀配套使用。已經廣泛地被用于醫院、血站、衛生防疫站、試劑廠、研究室的酶標板清洗工作。????酶標洗板機是全自動處理效果,具備多點定位吸液功能,每孔清洗液殘留量
免疫酶標技術——直接法
實驗方法原理先將酶與抗體結合形成酶標抗體,然后和相應的抗原反應,使抗原抗體復合物上帶有酶分子,再與酶的底物H2O2—DAB(3’3—二胺荃聯苯胺)發生顯色反應,在顯微鏡下觀察,根據顏色產物檢測相應抗原。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定;2. ?PBS
氨基化酶標板
醇標板經表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由殺水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯劑共價結合的能力,可用于固定溶于 Triton-100、 Tween20等去污劑的蛋白分
免疫酶標技術——間接法
實驗方法原理將酶標記在第二抗體上,再與已形成的抗原抗體復合物中的第一抗體反應。目前廣泛應用的PAP法、ABC法是在間接法的原理和技術的基礎上發展起來的。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBSH2O2血清儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定;2. ?PBS洗滌2×3 分鐘;3. ?1 %H2O2(或1 %
關于基因探針標記的方法介紹
探針的標記方式有放射性標記和非放射性標記。標記物質有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(如生物素、地高辛等)。32P是最常用的核苷酸標記同位素,被標記的dNTP本身就帶有磷酸基團,便于標記。特點是比活性高,可達9000Ci/mmol;發射的β射線能量高。用它標記的探針自顯影時間短,靈敏度高。
探針的標記方式的分類和特點介紹
探針的標記方式有放射性標記和非放射性標記。標記物質有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(如生物素、地高辛等)。32P是最常用的核苷酸標記同位素,被標記的dNTP本身就帶有磷酸基團,便于標記。特點是比活性高,可達9000Ci/mmol;發射的β射線能量高。用它標記的探針自顯影時間短,靈敏度高。32
雙鏈DNA探針標記法的介紹
分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。 雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。 切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到
常用酶的配制
實驗概要常用酶的配制實驗步驟1.溶菌酶 ?? 用水配制成50mg/ml的溶菌酶溶液,分裝成小份并保存于-20℃。每一小份一經使用后便予丟棄。2.蛋白水解酶類 a:鏈霉蛋白酶是從鏈球菌(Streptomyces griseus)中分離到的一種絲氨酸酶和酸性蛋白酶的混合物。 b:自消化可消除DN
常用酶的配制
1.溶菌酶 用水配制成50mg/ml的溶菌酶溶液,分裝成小份并保存于-20℃。每一小份一經使用后便予丟棄。 2.蛋白水解酶類 貯存液 貯存溫度 反應濃度 反應緩沖液 溫度 預處理 0.01mol/L Tris(pH7.8)
酶活性測定法的常用方法介紹
常用的測定方法有取樣法和連續法。 取樣法是在酶反應開始后不同的時間,從反應系統中取出一定量的反應液,并用適當方法停止其反應,再根據產物和底物在化學性質上的差別進行分析,求得單位時間內酶促反應的變化量。 連續法則是基于底物和產物在物理化學性質上的不同,在反應過程中對反應系統添加酶的變性劑以終止
酶標洗板機有哪些特點?
1.多種清洗方式,可適用于不同的實驗要求; 2.DNX-9620A洗板機采用先進的雙泵無正負壓沖洗技術,減少了液路中的交叉污染; 3.全中文的操作系統,操作簡單明了,簡單培訓就可學會; 4.廣泛用于醫院及有關部門的酶標儀檢測中酶標板、培養板的沖洗工作和化學、生化等方面的微量分析中相應的清洗
中結合力酶標板
酶標板經表面疏水鍵被動與白結合,適合作為分子量20D的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合能力為200-300 ng 1gG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異性交又反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液
酶標分析儀的原理
酶標分析儀本質為一臺變相光電比色計或分光光度計,基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同。光源燈發出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光,進入塑料微孔板中的待測標本。該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這些光信號轉換成相應的電信號,電信號經前置放大、對
酶標分析儀的簡介
酶標分析儀即酶聯免疫檢測儀,是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。酶標分析儀分為半自動和全自動兩大類 [1] ,其工作原理基本一致,核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。與適配試劑配合用于生物樣本中待測物的定性和定量分析。 [2]
酶標儀的酶標法是什么?
酶聯免疫吸附試驗方法簡稱酶標法,是標記技術中的一種,是從熒光抗體技術,同位素免疫技術發展而來的一種敏感,特異,快速并且能自動化的現代技術。 酶標法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯劑結合為酶標抗原或抗體,此酶標抗原或抗體可與固相載體上或組織內相應抗原或抗體發生特異反應,并牢固地結合形成仍保持活
免疫酶標技術的技術特點
中文名稱免疫酶標技術英文名稱immunoenzymatic technique定 義以酶標記抗體(或抗原),通過相應底物被酶解后的顯色反應,對細胞和組織標本中的抗原-抗體復合體進行定位、定性分析和鑒定的方法。也可根據酶催化底物顯色的深淺程度,定量測定體液標本中待測抗原或抗體的含量。應用學科細胞生物
酶標分析儀的原理
酶標分析儀本質為一臺變相光電比色計或分光光度計,基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同。光源燈發出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光,進入塑料微孔板中的待測標本。該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這些光信號轉換成相應的電信號,電信號經前置放大、對
酶標分析儀的分類
按照功能不同酶標分析儀可以分為光吸收酶標儀,熒光酶標儀,化學發光酶標儀和多功能的酶標儀 [3] 。 1.光吸收酶標儀 光吸收酶標儀是用來進行可見光與紫外光吸光度的檢測。特定波長的光通過微孔板中的樣品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關系,由此可以用來定性和定量的檢測。
全自動酶標分析儀
全自動酶標儀?XJ6-M15全自動酶標分析儀本儀器用于酶聯免疫檢測zui終讀取吸光度值所設計的一款集進樣、檢測、取值、計算、打印為一體的全自動酶標分析儀器,適用于各種毒素及其他酶聯免疫法的檢測。?特點:?1)試劑開放,無特定限制。?2)自動測量、自動計算、自動顯示計算食品中所含有毒有害物質的zui終
高結合力酶標板
酶標板經表面處理后蛋白結合能力大大増強,可達300-400ng 1gG/cm2,主要結合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產生非特異性反應。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑
酶標分析儀的用途
酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中,例如低紫外區的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量,酶活、酶動力學檢測,酶聯免疫測定(ELISAs),細胞增殖與毒性分析,細胞凋亡檢測(MTT),報告基因檢測及G蛋白偶聯受體分析(GPCR)等。特別在近幾