張玉奎院士：復雜樣品的高效分離與表征

　　2014年4月20日上午，第十屆全國生物醫藥色譜及相關技術學術交流會大會報告在威海盛大召開。中國科學院大連化學物理研究所的張玉奎院士作為本次大會的嘉賓，帶來了題為《復雜樣品的高效分離與表征》的報告。

中國科學院大連化學物理研究所 張玉奎院士

　　張玉奎院士首先介紹了蛋白質組學的研究歷史，人類蛋白質組中的40~99%至今尚未被發現，蛋白質組分析需要更靈敏的檢測技術。蛋白質組在定性方面3721個新鑒定的蛋白質中，82.5%是低豐度蛋白質；在定量方面精確度、準確度和覆蓋率低。

　　對于膜蛋白，發現了雙相柱膜蛋白質微反應器，實現酸性條件溶解和堿性條件酶解的兼容，還可以將整個樣品預處理時間由16h縮短到1.5h。對于磷酸化蛋白質組的富集：蛋白質的磷酸化與癌癥等疾病密切相關；1/3以上蛋白質存在磷酸化；8萬多個磷酸化位點尚未被鑒定。根據蛋白質磷酸化分析豐度低、干擾大和高度復雜的難點，發展出新一代磷酸酯鈦固定金屬離子親和色譜新材料，可使蛋白質磷酸化鑒定能力比常規方法提高3 倍以上。隨后張玉奎院士講述了糖基化蛋白質富集和糖肽的選擇性富集。

　　接著張玉奎院士講到了離子交換附聚型纖維多糖色譜，將硅膠表面磺化使其表面帶上負電荷，然后與陽離子纖維素結合，進一步衍生得到附聚型纖維素材料。在毛細管整體柱制備新技術中，制備一種具有高度有序三維孔道結構的有機-硅膠雜化整體柱，在LC分離中不僅具有反相/親水相互作用雙保留能力，同時又具有很高的分離效率，最高柱效可達120,000 N/m。

　　新型停留模式二維液相色譜，將捕集柱和稀釋液引入到停流模式的二維液相色譜流路中，有效解決了傳統二維色譜系統存在溶劑匹配和稀釋效應難題。在血樣中脂質輪廓分析中，二維液相分別選擇HILIC和RPLC分離機理，根據脂質分子的極性頭基和非極性尾基的不同進行分離。

　　最后張玉奎院士報告了在蛋白質定量新方法及相關技術研究中，基于二甲基化等重標記蛋白質定量方法，由于核結合能的不同導致的質量虧損，通過高分辨額質譜可以實現微小差異的MS2分辨，形成成對的碎片離子，實現定量。定量準確性幾乎可達100%；定量范圍可達4個數量級。