Precision公司基因編輯的同種異體CD20CART療法獲批臨床

　　總部位于美國北卡羅來納州的Precision BioSciences于2006年成立，擁有杜克大學基因編輯技術的ZL授權，于今年3月首次公開募股(IPO)募集約1.454億美元。

　　9月16日，Precision公司宣布，美國FDA已接受基因編輯的同種異體抗CD20 CAR-T細胞療法PBCAR20A的臨床試驗申請。PBCAR20A將是該公司第二款進入臨床的現成(off-the-shelf)的CAR-T療法，為Precision全資擁有，正在開發用于治療非霍奇金淋巴瘤(NHL)、慢性淋巴細胞白血病(CLL)和小淋巴細胞淋巴瘤(SLL)。

　　該公司計劃在2019年第四季度開始I/IIa期臨床試驗(NCT04030195)，初步數據預計在2020年公布。該研究將包括NHL患者，其中一個患者子集被診斷為套細胞淋巴瘤(MCL)。PBCAR20A已被授予治療MCL的孤兒藥指定。

　　CD19絕對稱得上是CAR-T治療靶點中的當家花旦，已經在復發難治性B細胞惡性血液疾病獲得了極大的成功，但并不是所有患者都能從CD19 CAR-T療法中獲益。以CD20為靶點的CAR-T療法或許能夠成為替代解決方案，克服因CD19抗原丟失而產生的治療耐藥性等障礙。值得注意的是，CD20 CAR-T療法在我國開展臨床研究的數量處于國際領先。

　　Precision的首席開發官David Thomson說：“在臨床前疾病模型中，PBCAR20A顯示出對CD20+腫瘤細胞的體內清除和降低腫瘤總體體積的有效性。此外，在嚴格的臨床前模型中，我們沒有觀察到移植物抗宿主病的任何證據。”

　　獨特的ARCUS編輯技術

　　Precision的通用CAR-T來源于健康捐贈者，并基于專有的ARCUS基因編輯平臺進行編輯和改造，旨在克服傳統自體CAR-T療法的制造限制，針對更廣泛的惡性腫瘤，并增加可能獲益的患者數量。

　　該公司的聯合創始人兼首席執行官Matt Kane說：“FDA批準我們的抗CD20現成CAR-T候選療法開始臨床試驗，這對于Precision來說是一個重要的里程碑。緊隨今年早些時候開始的抗CD19同種異體CAR-T候選療法PBCAR0191的首次臨床試驗，今天的公告展示了我們利用ARCUS基因組編輯平臺的獨特能力、CAR-T開發方法和內部開發的高度差異化制造流程，將多個候選產品并行推進臨床的能力”。

　　目前，各大公司正在測試ZFN、TALEN、CRISPR、meganucleases、megaTALs等基因編輯技術用于優化通用CAR-T的潛力。縱觀全球，臨床進展最快的通用CAR-T產品掌握在法國Cellectis公司手上，其開發了基于TALEN技術開發的同種異體CAR-T技術平臺。

　　Precision表示，新型ARCUS基因編輯平臺可能更具特異性，并且具有較少的脫靶副作用。作為下一代基因組編輯平臺，ARCUS的核心是ARCUS核酸酶——一種類似于歸巢核酸內切酶的全合成酶，被改進用于基因編輯治療。

　　根據Precision公司官網，歸巢核酸內切酶具有不同尋常的能力，能夠精確識別長DNA序列(12-40個堿基對)，這些序列通常很少見，只能在復雜的基因組中出現一次。這些非破壞性酶觸發基因轉換事件，以非常精確的方式修飾基因組，最常見的是通過插入新的DNA序列。由于歸巢內切核酸酶能夠在復雜基因組中靶向單個DNA斷裂，并實現基因修飾而避免隨機脫靶，使其成為治療級基因組編輯技術的理想起始材料。

　　ARCUS核酸酶很小，可以定制以識別任何靶基因內的DNA序列。ARCUS核酸酶是利用一套專有的計算機模擬和實驗室技術產生的，以確保最大的基因編輯效率和最小的脫靶活性。而且，ARCUS核酸酶可以基于相關模式生物中的切割活性分析進行優化，以控制效力和特異性。

　　在通用CAR-T中，Precision使用ARCUS去除T細胞受體(TCR)以預防移植物抗宿主病，從而避免了傳統組織捐贈過程中需要的供體-患者匹配；另外，ARCUS技術可將CAR基因靶向插入到T細胞基因組中的單個特定位置，以實現可控的、一致的表達。

　　ARCUS基因編輯技術擁有廣泛應用前景，引起了一些制藥巨頭的關注。2018年9月，Precision獲吉利德押注4.45億美元里程碑款項，雙方開展戰略合作旨在利用ARCUS基因編輯平臺開發體內消除乙型肝炎病毒(HBV)的創新療法。

　　其實，不僅僅是吉利德，ARCUS技術早已引起其他大型制藥公司及機構的關注。

　　2018年9月，Precision與英國制藥巨頭Shire合作開發腫瘤免疫療法，Shire擁有從合作伙伴獲取后期臨床開發和商業化產品的獨家選擇權。緊接著，Precision宣布與賓夕法尼亞大學Perelman醫學院合作研究和開發新型體內基因療法。新的合作將包括3個基因敲除計劃和最多3個基因敲入/基因修復計劃。

　　Precision與法國藥企施維雅(Servier)的聯盟可以追溯到2016年，涵蓋PBCAR0191和另外五個CAR-T療法的開發。

　　現貨CAR-T減輕制造負擔

　　早于PBCAR20A，Precision公司第一款進入臨床的現成CAR-T療法是PBCAR0191，其靶向CD19，目前正在評估用于患有復發或難治性(R/R) NHL或R/R B細胞前體細胞急性淋巴細胞白血病(B-ALL)的成年患者。該公司于今年4月開始在PBCAR0191的I/IIa期臨床試驗中給藥，預計此次試驗的臨時數據將于2020年第一季度前的一次科學會議上公布。

　　Precision全權負責PBCAR0191的早期研發、制造和第一階段臨床試驗的執行，施維雅(Servier)則擁有后期開發和商業化的權利。

　　Precision正在推進一系列細胞表型優化的同種異體CAR-T療法，充分利用了規模化的專有制造工藝。該平臺的設計旨在使盡可能多的患者可以受益于CAR-T。

　　Precision公司選取健康供體來源的優質T細胞作為起始材料，利用其獨特的ARCUS基因組編輯技術，通過一步工程過程對細胞進行修飾，將制造時間縮短至10天。這意味著，Precision的候選產品可以提前制造，大批量生產，然后冷凍保存，以便運輸、儲存和現成使用。

　　該公司的專有制造工藝在整個生產過程和最終產品中始終保持較高比例的原始和中央記憶CAR-T細胞，優化其CAR-T候選療法以用于免疫細胞在體內的擴增。

　　今年7月，Precision公司的先進治療學制造中心(MCAT)開業，這是目前美國第一家致力于基因組編輯、現成的CAR-T細胞治療產品的符合良好制造工藝(cGMP)的內部制造工廠。同時，這也是該公司2019年在北卡羅萊納州癌癥免疫治療平臺和設施擴建的較大投資的一部分。

　　填補重要空白

　　PBCAR20A如果獲得批準，將填補目前癌癥治療的重要空白。

　　在美國，B細胞惡性腫瘤占所有NHL病例的85%，而CLL和SLL占白血病的25%到30%。雖然一線治療為半數以上的新診斷的NHL患者提供了好處，但至少有三分之一的受益患者將變得難治性，只獲得部分緩解或緩解后復發。此外，自體CAR-T細胞治療CLL患者的成功有限，這通常歸因于與這種惡性腫瘤相關的T細胞衰竭。通過健康供體來源的同種異體CAR-T細胞治療，有可能克服目前CLL治療中的挑戰，增加NHL患者的護理機會。

　　另一方面，同種異體CAR-T療法(如PBCAR20A)有望克服治療抗性，并為同時靶向CD19和CD20的聯合治療方案提供了可能性，這可能有助于克服一些患者的耐藥機制。

　　Precision的首席開發官David Thomson說：“我們希望PBCAR20A將為仍然非常需要新的治療方案NHL或CLL/SLL的患者提供一種新的同種異體CAR試驗治療方案，該方案具有可靠、現成和優化的細胞活性的優點。”