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  • 流感病毒RNA提取

    試劑、試劑盒 10×RSB 溶液 10%SDS 蛋白酶 K lOXLiCI 溶液 RSB 飽和的酚 氯仿 異戊醇 2mol L 乙酸鈉 無水乙醇 TSE 溶液 LiCl 緩沖液平衡酚 TSE 飽和酚 4mol LLiCL實驗步驟 一 材料與設備1. 酚提法1)10×RSB 溶液:O.Olmol/LTris,O.OOlmol/LKCl,0.0015mol/LMgCL22)10%SDS3) 蛋白酶 K,5 mg/ml4)lOXLiCI 溶液:5%SDS,0.lmol/L 乙酸鈉,1.4mol/LLiCl。5)RSB 飽和的酚.6) 氯仿:異戊醇 (24:1)7)2mol/L 乙酸鈉。8) 無水乙醇。2.LiCl 提取法1)TSE 溶液。2)10%SDS,3) 蛋白酶 K(10 mg/ml)。4)lOXLiCl 溶液:5%SDS,0.lmol/L 乙酸鈉,1.4mol/LLiCl5)LiCl 緩沖液平衡酚6) 氯仿7)2mol/L 乙......閱讀全文

    流感病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒 10×RSB 溶液 10%SDS 蛋白酶 K lOXLiCI 溶液 RSB 飽和的酚 氯仿 異戊醇 2mol L 乙酸鈉 無水乙醇 TSE 溶液 LiCl 緩沖液平衡酚 TSE 飽和酚 4mol LLiCL實驗步驟 一 材料與設備1. 酚提法1)10×RSB 溶液:O.Olmol/LT

    流感病毒-RNA-提取

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 10×RSB 溶液 ?10%SDS ?蛋白酶 K ?lOXLiCI 溶液 ?RSB 飽和的酚 ?氯仿

    2.8.1-流感病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒10×RSB 溶液10%SDS蛋白酶 KlOXLiCI 溶液RSB 飽和的酚氯仿異戊醇2mol L 乙酸鈉 無水乙醇TSE 溶液LiCl 緩沖液平衡酚TSE 飽和酚4mol LLiCL實驗步驟一 材料與設備1. 酚提法1)10×RSB 溶液:O.Olmol/LTris,O.OOlmol/

    禽流感病毒RNA提取protocol

    1,用異硫氰酸胍提取1.取200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管2.加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿,顛倒混勻3.13000rpm離心15min4.在第3步離心快結束時,另取同樣多eppendorf管,加入400ul -20度預冷的異丙

    禽流感病毒RNA的三種提取方法

    實驗概要本實驗介紹了禽流感病毒RNA的三種提取方法:異硫氰酸胍提取,TRIzol LS提取及Trizol法。實驗步驟1. 用異硫氰酸胍提取?? 1) 取200ul樣品數 陰性對照 陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管。?? 2) 加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿

    RNA提取心得(組織RNA提取和培養細胞的RNA提取)

    一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的(最好在半年之內,-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復凍融,從冰凍狀態拿到0-4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預冷的勻漿器中,然后

    RNA提取

    RNA提取(主要內容如下)Tips for Handing RNA?Total RNA IsolationmRNA IsolationrRNA IsolationOthersQ & A posted in the Method Forum??Basic Procedures for Handing

    總RNA提取(Trizol提取)

    在收集到生物材料之后,最好能即刻進行RNA 制備工作。若需暫時儲存,則應以液氮將生物材料急速冷凍后,儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時,將儲存于冷凍柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破細胞,不可以先行解凍,以避免RNase 的作用。1. 提取組織RNA 時,每50~100mg 組織用1ml

    RNA提取原理

    RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑,內含異硫氰酸胍等物質,能迅速裂解細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成

    RNA的提取

    一、準備試劑:氯仿,異丙醇,75℅乙醇,無RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC處理過的水配制)。二、操作步驟:1. 勻漿處理:a. 組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。b. 單層培養細胞

    RNA的提取

    【實驗原理】Trizol 試劑是直接從細胞或組織中提取總RNA 的試劑。它在破碎和溶解細胞時能保持RNA 的完整性。加入氯仿后離心,樣品分成水樣層和有機層。RNA存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后,RNA 可以通過異丙醇沉淀獲得。【實驗儀器】1. 勻漿機2. 低溫離心機3. 渦旋器【試劑及配制】1

    RNA提取原理

    RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑,內含異硫氰酸胍等物質,能迅速裂解細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成

    RNA提取時RNA降解原因

    1 ) 新鮮細胞: 裂解液的量不足,使得裂解不充分。 2 ) 新鮮組織: 某些含有內源性核酸酶的樣品,很難避免RNA酶的降解,建議采用的方法為在液氮條件下將組織研碎,并且,勻漿時采用更多的裂解液。 3 ) 冷凍樣品: 樣品取材后應該迅速置于液氮中冷凍存放,然后轉移到-70℃冰箱存

    核酸提取——RNA提取與DNA的提取

    核酸分為兩大類:一類為核糖核酸(RNA),另一類為脫氧核糖核酸(DNA)。核酸的分子量極大,從數萬到億萬。核酸是兩性化合物,在一定的等電點溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有機溶劑。細胞內的核酸常和蛋白質結合成核蛋白。核糖核蛋白和脫氧核糖核蛋白在不同濃度的電解質溶液中 的溶解度有顯著區別,在一定濃

    核酸提取——RNA提取與DNA的提取

    核酸分為兩大類:一類為核糖核酸(RNA),另一類為脫氧核糖核酸(DNA)。核酸的分子量極大,從數萬到億萬。核酸是兩性化合物,在一定的等電點溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有機溶劑。細胞內的核酸常和蛋白質結合成核蛋白。核糖核蛋白和脫氧核糖核蛋白在不同濃度的電解質溶液中 的溶解度有顯著區別,在一定濃

    RNA提取技術概述

    RT-PCR是將RNA的反轉錄(Reverse Transcription,RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術,近年來得到快速發展和廣泛應用。首先,經反轉錄酶的作用,以RNA為模板,合成互補的DNA鏈(cDNA),再以cDNA為模板,通過PCR擴增合成目的片段。RT-PC

    病毒RNA提取實驗

    實驗方法原理 大多植物病毒RNA 為單鏈RNA ,并且其極性與mRNA 極性相同,植物病毒RNA 提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。實驗材料 TMV病毒液試劑、試劑盒 TE-飽和酚:氯仿氯仿NaAc乙醇TE緩沖液雙菌水儀器、耗材 冷凍臺式離心機低溫真空干燥儀電泳儀電泳槽實驗步驟 一、實驗

    動物RNA提取實驗

    實驗方法原理 SV Total RNA Isolation System (SV 總RNA 純化系統)可在1小時內從組織、培養細胞和白細胞中提取純化完整總RNA,方法簡單、快速。該系統以膜為基礎,根據組織類型的不同,每次最多可純化60 mg 組織。系統包含DNase 處理步驟,直接在小離

    TRIzol-RNA提取方法

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采用變性劑即內含異硫氰酸胍酚和β-巰基乙醇等變性物質,能迅速破碎細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶。異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質變性劑,可溶解蛋白質,并使蛋白質二級結構消失,細胞結構

    總RNA提取實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一些公司推出的總RNA 提取試劑盒,可以用來制備高質量的可用于建庫的RNA 。該總RNA 純化系統采用兩種著名的RNA 酶抑制劑,異硫氰酸弧(GTC)和β-巰基乙醇,加上整個操作都在冰浴下進行,這樣就能顯著降低RNA 的

    動物RNA提取實驗

    SV總RNA試劑盒提取法 Trizol試劑提取法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 SV Total RNA Isolation System (SV 總RNA

    病毒RNA提取實驗

    TE-飽和酚/氯仿提取法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大多植物病毒RNA 為單鏈RNA ,并且其極性與mRNA 極性相同,植物病毒RNA 提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲

    植物病毒RNA提取

    大多植物病毒RNA為單鏈RNA,并且其極性與mRNA極性相同,植物病毒RNA提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。?  一、材料?  提純TMV病毒液(10mg/ml)。?  二、設備?  冷凍臺式離心機,低溫真空干燥儀,電泳儀,電泳槽。?  三、試劑?  TE-飽和酚:氯仿(1:1),氯仿

    TRIzol-RNA提取方法

    研究基因的表達和調控時常常要從組織和細胞中分離和純化RNA。TRIzol RNA提取方法:(1)操作簡單的,提取方便,回收率高; (2)提取的RNA的質量高,對cDNA庫,RT-PCR和Northern?Blot等分子生物學實驗起著很重要的影響。實驗方法原理Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采

    病毒RNA提取實驗

    病毒RNA提取可以:(1)用于RNA病毒復制機制研究;(2)用于反向遺傳學研究;(3)用于分子病毒學其他研究。實驗方法原理大多植物病毒RNA 為單鏈RNA ,并且其極性與mRNA 極性相同,植物病毒RNA 提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。實驗材料TMV病毒液試劑、試劑盒TE-飽和酚:氯

    提取懸浮細胞RNA

    提取RNA器械:離心管2支,吸管4個,酒精燈,打火機,記號筆,200ul,1000UL槍,DEPC泡過的槍頭EP管,紫外照過的手套。濾紙,DEPC純水(750ml無水乙醇+150mlDEPC水,劇烈振蕩,使勁的搖晃,直至混勻),氯仿,75%酒精,異丙醇,Trizol,預冷的離心機(兩種),EP管架(

    真菌RNA提取實驗

    實驗方法原理 液氮研磨可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯仿時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。?實驗材料 菌絲體試劑、試劑盒 NaCl蒸餾水SDSTr

    TRIzol-RNA提取方法

    (一)試劑準備1.TRIzol試劑。2.氯仿3.異丙醇4.75%乙醇(DEPC H2O配制)5.DEPC H2O(二)操作步驟1. 樣品處理:(1)培養細胞:收獲細胞1-5×107,移入1.5ml離心管中,加入1ml Trizol,混勻,室溫靜置5min。(2)組織:取50-100mg組織(新鮮或-

    總RNA提取實驗

    實驗方法原理 GTC和N-十二烷基肌氨酸鈉的聯合使用,將促使核蛋白復合體的解離,使RNA 與蛋白質分離,并將RNA 釋放到溶液中。而進一步從復合體中純化RNA ,則根據Chomc zynski和Sacchi的一步快速抽提法進行,采用酸性酚-氯仿混合液抽提。低pH值的酚將使RNA 進入水相

    植物RNA提取實驗

    直接研磨法 液氮研磨法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過裂解液β-巰基乙醇迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶,植物RNA助提劑PLANTaid幫助結合多糖多酚并通過離

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