凝膠電泳常見問題分析
1、要跑瓊脂糖凝膠電泳，5ng就能很清楚的跑出來，是這樣嗎？能夠照相的清楚的條帶，至少需要多少量呢？ 參考見解 ： 5ng已經可以了，但是或許20ng～200ng效果好，在此范圍內呈線性。 2、把210bp的PCR產物進行酶切，得到190+20bp的兩個片段，請問能用瓊脂糖凝膠電泳檢測酶切結果嗎？用多大濃度的膠和多大的電壓呢？ 參考見解： 可以用瓊脂糖凝膠電泳分開，電壓不變，可用1.5%到2%的膠，20bp得片斷不一定能看得到，所以應用未酶切的PCR片斷作對照。 丙烯酰胺凝膠電泳更適合于分離純化小分子量核酸（5～500bp）并且分辨率高，可以達到1個bp。所以建議進行丙烯酰胺凝膠電泳試試。 3、Marker做瓊脂糖凝膠電泳，發現Marker在加樣孔有一個明顯的亮帶，什么原因？ 參考見解： ......閱讀全文
凝膠電泳
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。其中聚丙烯酰胺凝膠電泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分離蛋白質及較小分子的核酸。瓊脂糖凝膠孔徑較大，對一般蛋白質不起分子篩作用，但適用于分離同工酶及其亞型，大
瓊脂糖凝膠電泳，凝膠電泳條帶
原理 瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳最主要區別是:它兼有"分子篩"和"電泳"的雙重作用。 瓊脂糖凝膠具有網格結構，電泳分子通過時會受到阻力，大分子物質在泳動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量，而且還取決于
雙向凝膠電泳
雙向凝膠電泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年發明的，原理是第1向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離，具有相同等電點的蛋白質無論其分子大小，在電場的作用下都會用聚焦在某一特定位置即等電點處；第2向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復雜蛋白混合物中的蛋白
凝膠電泳定義
凝膠電泳是分子生物學中用于確定DNA,RNA和蛋白質的大小和電荷的強大工具。使用凝膠電泳帶強度作為結果,您可以算出片段的大小。然后可以獲取DNA指紋。正如單詞的“電”部分所揭示的,凝膠電泳定義需要使用電場。使用一種特殊的機器,該機器包含覆蓋電極的緩沖溶液,凝膠懸浮在內部的孔以及電極本身。
梯度凝膠電泳
中文名稱梯度凝膠電泳英文名稱gradient gel electrophoresis定 義使所制備的電泳凝膠形成從大到小的孔隙梯度，以期樣品中各組分在電泳過程中穿過孔徑逐漸減小的凝膠，以期得到更好的分離。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
凝膠電泳實驗
試劑、試劑盒 丙烯酰胺 雙丙烯酰胺儲存液過硫酸銨乙醇上樣（終止）緩沖液甲酰胺EDTA溴酚藍二甲苯腈酶和酶緩沖液PCR 產物（放射性）凝膠培養基儀器、耗材 ZapCap 過濾器108 孔深井式梳子色譜紙上樣器丙烯酸防護板膠片暗盒凝膠印跡膜蓋革計數器凝膠干燥系統膠片S2 型測序儀石蠟封口膜移液管剃須刀片
凝膠電泳實驗
在優化實驗條件時，應該同時用含有甘油和不含甘油的凝膠分離PCR產物，并對放射性自顯影的結果進行比較。利用這兩種凝膠分析同一種樣品的預實驗結果可以在24h之內獲得。一旦實驗條件確定下來，特定實驗所優選的凝膠類型就可以應用到該基因座的所有樣品的分析中。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康
凝膠電泳概述
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。其中聚丙烯酰胺凝膠電泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分離蛋白質及較小分子的核酸。瓊脂糖凝膠孔徑較大，對一般蛋白質不起分子篩作用，但適用于分離同工酶及其
凝膠電泳實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 丙烯酰胺 雙丙烯酰胺儲存液 過硫酸銨 乙醇 上樣（終止）緩沖液 甲酰胺 EDTA 溴酚藍 二
瓊脂糖凝膠電泳實驗——瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳可應用于：（1）DNA切膠回收；（2）DNA分離；（3）佐證DNA是否重組，質粒等是否切開以及其他分子生物學研究。實驗方法原理用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳的最主要區別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構，物質分子通過時會受到阻
凝膠電泳儀
凝膠電泳儀通常用于分析用途，但也可以作為制備技術，在采用某些方法（如質譜(MS)、聚合酶鏈式反應(PCR)、克隆技術、DNA測序或者免疫印跡）檢測之前部分提純分子。
雙向凝膠電泳原理
1、根據蛋白質的等電點（第一向）和分子量（第二向）的不同進行分離。2、電泳后根據蛋白質的上樣量對膠進行考馬斯亮蘭染色、銀染或熒光染色，然后用相關軟件對電泳圖象進行分析。
什么是凝膠電泳？
DNA分子提取得到以后，需要通過電泳技術來檢測其數量和質量。自從瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠被引入核酸研究以來，按相對分子質量大小分離DNA的凝膠電泳技術，已經發展成為一種分析鑒定DNA分子的重要實驗手段。瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠電泳是基因操作的核技術之一，它能夠用于分離、鑒定和純化DNA片段。該技術操作簡
水平板凝膠電泳
中文名稱水平板凝膠電泳英文名稱horizontal slab gel electrophoresis定 義在水平方向放置的凝膠平板中進行的電泳。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
反轉電場凝膠電泳
中文名稱反轉電場凝膠電泳英文名稱field-inversion gel electrophoresis;FIGE定 義一種脈沖電場凝膠電泳，使用單對電極和一個可轉動的潛入式瓊脂糖凝膠板托，電泳時電場有規律地顛倒180。，驅動DNA先向后退，再向前進，使向前的脈沖時間或場強大于向后，樣品獲得向前的凈
鏈分離凝膠電泳
中文名稱鏈分離凝膠電泳英文名稱strand separating gel electrophoresis定 義一種存在變性劑(脲和甲酰胺等)梯度的凝膠電泳，可以分離長度相同而序列不同的解鏈核酸。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
堿性凝膠電泳
中文名稱堿性凝膠電泳英文名稱alkaline gel electrophoresis定 義分析單鏈DNA的電泳法。在高pH條件下，兩條DNA鏈間不能形成氫鍵配對而保持單鏈狀態，按其分子大小在凝膠中電泳移動而分離。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
變性梯度凝膠電泳
實驗材料?DNA樣品試劑、試劑盒?尿素去離子甲酰胺丙烯酰胺甲叉雙丙烯酰胺瓊脂糖 儀器、耗材?PCR擴增儀變性梯度凝膠電泳儀凝膠成像及分析系統紫外透射儀高速離心機電泳儀電泳槽微量加樣器Tip頭Tip頭盒Eppendorf管Eppendorf管架
變性梯度凝膠電泳
變性梯度凝膠電泳（DGGE）是一種根據DNA片段的熔解性質而使之分離的凝膠系統。（1）將凝膠設置在雙重變性條件下，可以檢測DNA分子中的任何一種單堿基的替代、移碼突變以及少于10個堿基的缺失突變，被廣泛應用于基因突變檢測及相關研究。（2） 用于癌癥和遺傳病的篩查及診斷,而且,在癌癥(殘存性病灶、突變
脈沖場凝膠電泳
脈沖場凝膠電泳1）高分子量DNA瓊脂糖凝膠塊制備和加工1．收集10ml全血，加入30ml細胞裂解液。置冰浴中至少20min直至紅細胞完全溶解。2．2000r/min離心10min，移去紅色上清液，再次用細胞裂解液洗滌細胞，然后用PBS重懸細胞。3．稀釋單細胞懸液并取一小份用Neubauer腔計數細胞
變性梯度凝膠電泳
變性梯度凝膠電泳(DGGE) ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 變性梯度凝膠電泳（DGGE）是一種根據DNA片段的熔解性質而使之分離的凝膠系統。核酸的雙螺旋結構在一定條
核酸凝膠電泳3
3、電泳：電壓＜10V/cm，電泳至溴酚蘭移出樣品槽到凝膠板的2/3距離時，關閉電源。4、取出凝膠塊，置紫外透射反射分析儀上觀察，即可見桔紅的DNA區帶。【注意事項】1、加樣時槍頭不要碰壞孔壁，否則DNA帶型不整齊。大多情況下，加樣時不必更換槍頭，可在陰極槽中反復吸打電泳緩沖液清洗，但對Southe
核酸凝膠電泳4
5、室溫下聚合至少30min，若聚合完全，梳齒下可見二條折光線，小心拔出梳子，用水沖洗樣品孔。6、在電泳槽中加入1×TBE緩沖液，使緩沖液覆蓋樣品孔，并用緩沖液稍淋洗樣品孔。7、加上1/6體積6×上樣緩沖液與DNA樣品及DNA分子量標準液中混合，用微量進樣器吸取，小心快速地加入加樣孔中（一般加樣量3
什么是凝膠電泳？
凝膠電泳是一項技術,可讓科學家根據大小分離帶電分子。這包括DNA,RNA和蛋白質。請記住,由于分子的糖-磷酸骨架中帶負電的氧分子,DNA和RNA帶有輕微的負電荷。取決于多肽鏈中的氨基酸,蛋白質可以具有一定范圍的電荷。
凝膠電泳的原理
當一種分子被放置在電場當中時，它們就會以一定的速度移向適當的電極，這種電泳分子在電場作用下的遷移速度，叫做電泳的遷移率。它同電場的強度和電泳分子本身所攜帶的凈電荷數成正比。也就是說，電場強度越大、電泳分子所攜帶的凈電荷數量越多，其遷移的速度也就越快，反之則較慢。由于在電泳中使用了一種無反應活性的穩定
凝膠電泳的顯色
觀察凝膠中DNA的最簡便、最常用的方法就是利用熒光染料溴化乙錠進行染色。溴化乙錠是一種具有扁平分子的核酸染料，在高離子強度下，大約每2.5個堿基插入一個溴化乙錠分子。在DNA溴化乙錠復合物中，DNA吸收254nm處的紫外輻射并傳遞給染料，而結合的染料分子本身吸收302nm和399nm的光輻射，因此吸
什么是凝膠電泳
電泳是實驗室中常用的一種技術，用于根據大小分離帶電分子，例如DNA。凝膠電泳是實驗室中常用的一種技術，用于分離帶電分子，例如DNA?，RNA?和蛋白質。根據它們的大小。當電流通過凝膠時，帶電分子穿過凝膠。在凝膠上施加電流，以使凝膠的一端帶正電荷，而另一端帶負電荷。帶電分子的運動稱為遷移。分子向相反電
凝膠電泳的分類
（1）瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳瓊脂糖是一種線性多糖聚合物，是從紅色海藻產物瓊脂中提取而來的。當瓊脂糖溶液加熱到沸點后冷卻凝固便會形成良好的電泳介質，其密度是由瓊脂糖的濃度決定的。經過化學修飾的低熔點(LMP)的瓊脂糖，在結構上比較脆弱，因此在較低的溫度下便會熔化，可用于DNA片段的制備電泳。聚丙烯
核酸凝膠電泳1
核酸是帶均勻負電荷的分子，在電場中向正極移動，不同大小和構象的核酸分子的電荷密度大致相同，在自由泳動時，各核酸分子的遷移率區別很小，難以分開。以適當濃度的凝膠介質作為電泳支持介質，具有分子篩效應，使得分子大小和構象不同的核酸分子泳動率出現較大差異，達到分離的目的。此為分離、鑒定、純化核酸片段的標準方
核酸凝膠電泳2
二、核酸電泳的指示劑與染色劑【指示劑】電泳過程中，常使用一種有顏色的標記物以指示樣品的遷移過程，核酸電泳常用的指示劑有兩種：溴酚蘭，呈藍紫色；二甲苯青，呈藍色。溴酚藍分子量為670道爾頓，在不同溶液凝膠中，遷移速度基本相同，其分子篩效應小，近似自由電泳。在0.6%、1%、2%的瓊脂糖凝膠電泳中，溴酚