· Lambda DNA Preparation (Stanford DNA Sequence & Technology Center)Detailed protocol for lambda DNA preparation with recipes· Isolation of Lambda DNA: Quick Method (Molecular Genetics Network Lab)· Lambda Large Prep. (Crawford Lab)· &nb......閱讀全文
1、在噬菌體展示技術的應用中,M13噬菌體與其他噬菌體比有什么優點? M13噬菌體和與其密切相關的絲狀噬菌體fd和f1均為非裂解性噬菌體,它們在增殖期間均不裂解宿主菌。這就極大地簡化了每輪淘選過程之間的中間噬菌體純化步驟,只用簡單的PEG沉淀方法就足以將噬菌體與其他所有污染的細胞蛋白分開
噬菌體展示技術的應用中,M13噬菌體與其他噬菌體比有什么優點?M13噬菌體和與其密切相關的絲狀噬菌體fd和f1均為非裂解性噬菌體,它們在增殖期間均不裂解宿主菌。這就極大地簡化了每輪淘選過程之間的中間噬菌體純化步驟,只用簡單的PEG沉淀方法就足以將噬菌體與其他所有污染的細胞蛋白分開。而其他用于噬菌體展
幾個常用的啟動子和誘導調控表達系統最早應用于的表達系統是Lac乳糖操縱子,由 啟動子Plac + 操縱基因lacO +結構基因組成。其轉錄受CAP正調控和lacI負調控。lacUV5突變能夠在沒有CAP的存在下更有效地起始轉錄,該啟動子在轉錄水平上只受lacI 的調控,因而隨后得到了更廣泛采用。la
在DNA測序過去的40年中,我們見證了諸多技術的變革和測序規模的極度增長。從幾千個堿基到第一個人體基因組,乃至當前數以萬計的人體和無數其它的基因組。包括作為大量分子現象的“計數器”在內,DNA測序被廣泛和創造性地應用于各個領域。從長遠來看,我們可以預測DNA測序技術所帶來的影響將會與顯微鏡的使用
Gateway也可以被視為一種克隆操作平臺:把目的基因克隆到入門載體(Entry Vector)后,就不用依賴限制性內切酶,而靠載體上存在的特定重組位點和重組酶,高效、快速地將目的基因克隆到其它的受體載體(Destination Vector,目的載體)上。Gateway的原理也是建立在噬菌體DNA
細菌克隆的溶解實驗 實驗方法原理 具有原噬菌體的細菌稱為溶原性細菌。噬菌體分為烈性噬菌體和溶原性噬
細菌克隆的溶解實驗可以用于:(1)從表達特定融合蛋白質的重組噬菌體構建噬菌體溶源菌;(2)從該溶源菌誘導合成并純化出融合的目的蛋白質。實驗方法原理具有原噬菌體的細菌稱為溶原性細菌。噬菌體分為烈性噬菌體和溶原性噬菌體,在感染于寄主細菌細胞時,前者往往在菌體內增殖并將菌體裂解。實驗材料大腸桿菌噬菌體試劑
基因組DNA文庫用途十分廣泛,如用于人類及動植物基因組學研究,基因表達調控研究,分析、分離特定的基因片段等。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為四大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。一、分離基因組DNA(gDNA) 毫無
基因純化,可以用于(1)對大量提取的質粒DNA進行純化;(2)常用的方法有柱層析法和氯化銫梯度離心法。實驗材料細胞試劑、試劑盒TBS抽提緩沖液儀器、耗材離心管實驗步驟1. 根據樣品類型,從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒(堿裂解法) 實驗材料
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒(堿裂解法) 實驗材料
使用毛細管等電聚焦分析5型AV的穩定性已被描述[17] 。然而,這是首次被描述的使用電泳滴定曲線測定完整病毒顆粒的電荷行為。 也采用ETC對經320nm紫外線照射15分鐘滅活的麻疹病毒進行了分析。瓊脂糖凝膠電泳曲線證實在PH值低于7時病毒帶正電荷,
病毒顆粒的等電位滴定曲線用于指導離子交換層析工藝開發病毒顆粒的等電位滴定曲線用于指導離子交換層析工藝開發 S. Herzer1, P. Beckett 1 , T. Wegman 2, and P. Moore1 1Amersham Biosciences Corp, Piscatawa
基因組 DNA文庫有十分廣泛的用途,如用于分析、分離特定的基因片段,用以基因表達調控、人類及動植物基因組工程的研究。通常情況下,基因組文庫構建的基本流程可以歸為4大步驟:分離基因組DNA、對基因組DNA作相關的處理、將基因組DNA片段連接入載體、將重組載體轉入宿主細胞。 一、分離
描述一種大聚合酶鏈反應(PCR)應用的方法,使在已知序列的核心區邊側的未知 DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA,以產生適合于PCR擴 增大小的片段,然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區 的末端序列,但其方向性,使鏈的延長經過環上的未知區而不是分開引
BAC (Bacterial Artificial Chromosome,細菌人工染色體)文庫可用于:(1)全基因組測序;(2)構建物理圖譜、染色體步查;(3)基因篩選;(4)基因圖位克隆。實驗方法原理BAC是一種裝載DNA大片段的克隆載體系統,用于人、動物和植物基因組文庫構建。BAC具有插入片段較
我們描述一種大聚合酶鏈反應(PCR)應用的方法,使在已知序列的核心區邊側的未知 DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA,以產生適合于PCR擴 增大小的片段,然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區 的末端序列,但其方向性,使鏈的延長經過環上的未知區而不是
BAC文庫的構建 實驗方法原理 BAC是一種裝載DNA大片段的克隆載體系統,用于人、動物和植物基因