糖基化多肽合成過程
糖基化糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生于內質網。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質經過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作用。過程N-連接的糖鏈合成起始于內質網,完成于高爾基體。在內質網形成的糖蛋白具有相似的糖鏈,由Cis面進入高爾基體后,在各膜囊之間的轉運過程中,發生了一系列有序的加工和修飾,原來糖鏈中的大部分甘露糖被切除,但又被多種糖基轉移酶依次加上了不同類型的糖分子,形成了結構各異的寡糖鏈。糖蛋白的空間結構決定了它可以和那一種糖基轉移酶結合,發生特定的糖基化修飾。許多糖蛋白同時具有N-連接的糖鏈和O-連接的糖鏈。O-連接的糖基化在高爾基體中進行,通常第一個連接上去的糖單元是N-乙酰半乳糖,連接的部位為Ser、Thr和Hyp的羥基,然后逐次將糖基轉移到上去形成寡糖鏈,糖的供體同樣為核苷糖,如UDP-半乳糖。糖基化的結果使不......閱讀全文
糖基化多肽合成過程
糖基化糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生于內質網。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質經過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作用。過程N-連接的糖鏈合成起始于內質網,完成于高爾基體。在內質網形成的糖蛋
糖肽多肽糖基化修飾
通過化學鍵將單糖(如葡萄糖、半乳糖)或者多糖連接到多肽上的過程,我們將其稱之為多肽糖基化修飾,通過糖基化修飾后得到的多肽,我們稱之為糖肽(Glycopeptides);糖肽對膜蛋白功能常常有很重要的影響,對特異的生物學功能起介導作用,比如:對細胞具有保護、穩定、組織及屏障等多方面作用;可作為外源性受
什么是多肽和多肽定制?
多肽定制一般指人工多肽合成的一種服務,指根據客戶的需要,如序列、純度、分子量等的不同要求,進行加工合成的滿足特定需要的多肽合成服務。通過質譜儀進行分子量的確認,確定粗品MS的正否與否,再將粗品通過高效液相色譜即HPLC純化,得到精品肽。根據不同實驗,可以選擇不同的多肽純度,原則上是純度越高,價格
什么是多肽和多肽定制?
多肽定制一般指人工多肽合成的一種服務,指根據客戶的需要,如序列、純度、分子量等的不同要求,進行加工合成的滿足特定需要的多肽合成服務。通過質譜儀進行分子量的確認,確定粗品MS的正否與否,再將粗品通過高效液相色譜即HPLC純化,得到精品肽。根據不同實驗,可以選擇不同的多肽純度,原則上是純度越高,價格
什么是多肽和多肽定制?
多肽定制一般指人工多肽合成的一種服務,指根據客戶的需要,如序列、純度、分子量等的不同要求,進行加工合成的滿足特定需要的多肽合成服務。通過質譜儀進行分子量的確認,確定粗品MS的正否與否,再將粗品通過高效液相色譜即HPLC純化,得到精品肽。根據不同實驗,可以選擇不同的多肽純度,原則上是純度越高,價格越高
多肽制備
固相多肽合成就是不斷地在固相載體上加入α-氨基和側鏈基團被保護的氨基酸。FMOC基團是用來保護α-氨基中的N的,去除保護基團后,再加入第二個氨基酸。產生的多肽通過一個連接臂將C端連接在樹脂上,它可以被裂解下來。通常情況下,在多肽從樹脂上裂解下來的同時去除側鏈保護基團,一般采用哌啶去 FMOC保護基團
什么是糖基化?
糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生于內質網。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質經過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作用。
糖基化與免疫
蛋白糖基化是真核生物常見的蛋白質翻譯后修飾過程,合成后的或正在合成的蛋白質在糖基轉移酶的作用下,將活化的單糖加到肽鏈上。根據糖與肽鏈中氨基酸的連接方式不同,可將糖基化修飾分為三種形式:N-糖苷(N-glycan)、O-糖苷(O-gly-can)、糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphat
蛋白質糖基化的檢測實驗——化學脫糖基化
實驗材料蛋白樣品試劑、試劑盒TFMS苯甲醚儀器、耗材玻璃器皿實驗步驟1. 在冰上預冷干凈、干燥的玻璃器皿。用帶有 Teflon-絲帽的玻璃試管混合試劑。2. 打開或混合試劑前,在冰上預冷所有的溶液。從冰冷的原液中,TFMS:苯甲醚 ( Sigma) 以 2:1 (v/v) 的比例混合。緩慢的向試管內
蛋白質糖基化的檢測實驗——酶脫糖基化
實驗方法原理用酶或化學脫糖基化、通過選擇性標記或通過凝集素親和層析法是檢測蛋白糖基化常用方法。實驗材料蛋白樣品試劑、試劑盒磷酸鈉緩沖液蛋白溶液β-巰基乙醇NP-40 溶液儀器、耗材SDS-PAGE玻璃器皿植物凝集素柱實驗步驟一、用 PNGaseF(N-多糖酶)處理1. 以 0.1 mol/L 磷酸鈉
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重復添加的過程,通常從C端向N端(氨基端)進行合成。多肽固相合成的原理是將目的肽的第一個氨基酸C端通過共價鍵與固相載體連接,再以該氨基酸N端為合成起點,經過脫去氨基保護基和過量的已活化的第二個氨基酸進行反應,接長肽鏈,重復操作,達到理想的合成肽鏈長度,最后將肽鏈從樹脂上裂解下來
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重復添加的過程,通常從C端向N端(氨基端)進行合成。多肽固相合成的原理是將目的肽的第一個氨基酸C端通過共價鍵與固相載體連接,再以該氨基酸N端為合成起點,經過脫去氨基保護基和過量的已活化的第二個氨基酸進行反應,接長肽鏈,重復操作,達到理想的合成肽鏈長度,最后將肽鏈從樹脂上裂解下來
多肽固相合成方法:Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重復添加的過程,通常從C端向N端(氨基端)進行合成。多肽固相合成的原理是將目的肽的第一個氨基酸C端通過共價鍵與固相載體連接,再以該氨基酸N端為合成起點,經過脫去氨基保護基和過量的已活化的第二個氨基酸進行反應,接長肽鏈,重復操作,達到理想的合成肽鏈長度,最后將肽鏈從樹脂上裂解下來,分
固相多肽合成的應用——多肽合成儀
多肽固相合成技術的發明同時促進了多肽合成的自動化。世界上第一臺真正意義上的多肽合成儀出現在1980年代初期,它是利用氮氣鼓泡來對反應物進行攪拌,用計算機程序控制來實現有限度的自動合成。雖然在各項功能方面有著明顯的缺陷,但是它畢竟把人從實驗室里解放出來,極大地提高了工作效率。隨著多肽科學的發展,科學家
多肽合成儀
美國洛克菲勒大學教授Bruce Merrifield 在1963年發明的多肽固相合成技術(SPPS)是多肽合成領域的一個重大突破,對化學,生化,醫藥,免疫和基因科學等學科和領域都起了巨大的推動作用。 他本人也因此項發明榮獲1984化學諾貝爾獎。
多肽是什么
多肽是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物,是蛋白質水解的中間產物。由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,同理類推還有三肽、四肽、五肽等。通常由10~100個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽。它們的分子量低于10000Da(Dalton,道爾頓),能透過半透膜,不被三氯乙酸及硫酸銨所
多肽質譜儀類型
多肽質譜儀類型有多種。1、按分析目的可分:實驗室多肽質譜儀和工業多肽質譜儀。2、按質量分析器的工作狀態可分:靜態多肽質譜儀和動態多肽質譜儀。3、按分析規模可分:小型多肽質譜儀和大型多肽質譜儀。4、按聯用方式可分:多肽液相色譜質譜聯用儀、多肽毛細管電泳質譜聯用儀和多肽串聯質譜儀等。5、按質量分析器的工
抗原多肽設計
為了使產生的抗體獲得最佳效果,仔細地設計抗原多肽是很有必要的,設計應滿足一個基本條件:在免疫過程中,該抗原既不會產生過強的免疫反應,同時又能產生出對感興趣的蛋白有結合能力的抗體。抗原設計是一個很復雜的課題,有諸多需要注意的細節。根據我們所積累的經驗,有幾點關鍵的基本設計原則可供大家參考:確定抗體的用
多肽的特點
傳統獲得肽的方法有很多。傳統法主要有:酸法、堿法、電法、人工嫁接法、基因表達法等。但在工藝技術方面,這些合成工藝方法的局限性,是導致其這些合成方法沒有產品的原因。 而酶法在傳統法的基礎上有所突破和創新,適應了低碳經濟和綠色環保的要求。酶法就是用生物酶催化蛋白質獲得多肽,就是蛋白質降解,人工合成
什么是多肽?
多肽:由多個a-氨基酸分子縮合消去水分子而形成含有多個肽鍵,天然產物中得到一種有機物。
多肽合成歷史
多肽合成概述: 1963年,R.B.Merrifield[1]創立了將氨基酸的C末端固定在不溶性樹脂上,然后在此樹脂上依次縮合氨基酸,延長肽鏈、合成蛋白質的固相合成法,在固相法中,每步反應后只需簡單地洗滌樹脂,便可達到純化目的.克服了經典液相合成法中的每一步產物都需純化的困難,為自動化合成肽奠定了基
多肽合成儀
多肽合成儀,是以固相合成為原理合成多肽粗品的儀器。整體由主體、傳輸設備、動力裝置以及軟件系統組成。以固相合成為反應原理,在密閉的防爆玻璃反應器中使氨基酸按照已知順序不斷添加、反應、合成,操作最終得到多肽載體。
多肽小常識
保存: 大多肽在-20℃很穩定,特別是冷凍干燥并保存在干燥器中,在將它們暴露于空氣之前, 冷凍干燥多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少,當無法冷凍干燥時,最好的方法是以小的工作樣量存放。 對于含Cys, Met orTrP的多肽,脫氧緩沖劑對其溶解必不可少,因為這種多肽可易空氣氧化, 在封瓶前
多肽合成步驟
1、樹脂的選擇及氨基酸的固定? 用于多肽合成的高分子的載體主要有3類:交聯聚苯乙烯;聚酰胺;聚乙烯乙二醇脂類樹脂。氨基酸的固定主要是通過保護的氨基酸的羧基同樹脂的反應基團之間形成共價鍵來實現。? 2、氨基、羧基、側鏈的保護及脫除? 要成功合成具有特定的氨基酸順序的多肽,需要對暫不參與形成酰胺
多肽小常識
多肽的基本常識保存: 大多肽在-20℃很穩定,特別是冷凍干燥并保存在干燥器中,在將它們暴露于空氣之前, 冷凍干燥多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少,當無法冷凍干燥時,最好的方法是以小的工作樣量存放。? 對于含Cys, Met orTrP的多肽,脫氧緩沖劑對其溶解必不可少,因為這種多肽可易空氣氧
多肽的簡介
肽(peptide)是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物,它也是蛋白質水解的中間產物。 一般肽中含有的氨基酸的數目為二到九,根據肽中氨基酸的數量的不同,肽有多種不同的稱呼:由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,同理類推還有三肽、四肽、五肽等,一直到九肽。通常由10~100個氨基酸
概述糖基化的過程
N-連接的糖鏈合成起始于內質網,完成于高爾基體。在內質網形成的糖蛋白具有相似的糖鏈,由Cis面進入高爾基體后,在各膜囊之間的轉運過程中,發生了一系列有序的加工和修飾,原來糖鏈中的大部分甘露糖被切除,但又被多種糖基轉移酶依次加上了不同類型的糖分子,形成了結構各異的寡糖鏈。糖蛋白的空間結構決定了它可
糖基化的過程介紹
N-連接的糖鏈合成起始于內質網,完成于高爾基體。在內質網形成的糖蛋白具有相似的 糖鏈,由Cis面進入高爾基體后,在各膜囊之間的轉運過程中,發生了一系列有序的加工和修飾,原來糖鏈中的大部分甘露糖被切除,但又被多種 糖基轉移酶依次加上了不同類型的糖分子,形成了結構各異的寡糖鏈。糖鏈的空間結構決定了它可以
糖基化位點檢測
經常聽到糖基化修飾,今天帶大家一探究竟。什么是糖基化修飾呢?糖基化是在糖基轉移酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生于內質網和高爾基體。糖基化修飾是一類非常重要的翻譯后修飾,大部分膜蛋白和分泌蛋白均為糖蛋白,糖基化修飾不僅影響蛋白質的空間構象、活性、運輸和定位,同時在信號轉導、分子識別,
簡述糖基化的作用
糖基化對膜蛋白功能影響常常是很重要的,對特異的生物學功能起介導作用: 1、對細胞具有保護、穩定、組織及屏障等多方面作用; 2、可作為外源性受體的特異性配體,某些糖鏈可作為各種病毒、細菌及寄生物的特異受體; 3、糖鏈也可作為內源性受體的特異性配體,參與介導清除、周轉及胞內穿行作用; 4、糖