蛋白質標記
Biosynthetic labeling (Sefton Lab)Biotinylation of Antibody (Contributed by Nanci Donacki)125I Labeling of Protein using ICl (ScienceXchange)Protein (Antibody) Fluorescent Labeling (Mario Roederer)Gives detailed protocol for conjugation of proteins to fluorescent dyes. The conjugations fall into four basic protocols: Type 1 (used for FITC, Cy5, and the initial preparation of the Cy5 and Cy7 tandem......閱讀全文
蛋白質標記
Biosynthetic labeling?(Sefton Lab)Biotinylation of Antibody?(Contributed by Nanci Donacki)125I Labeling of Protein using ICl?(ScienceXchange)Protein (
蛋白質的膠體金標記
當蛋白質的最適穩定量及標記的最佳pH值被確定以后,便可進行標記。具體步驟如下。(1)根據標記所用膠體金的總量計算出所需要待標記蛋白質的總量。(2)邊攪拌邊將蛋白質溶液加入膠體金溶液中,逐漸加入,lmg的蛋白質量大約需5min,或在攪拌下將膠體金逐漸加入到蛋白質溶液中,大約需5~10min。(3)繼續
蛋白質的膠體金標記
當蛋白質的最適穩定量及標記的最佳pH值被確定以后,便可進行標記。具體步驟如下。(1)根據標記所用膠體金的總量計算出所需要待標記蛋白質的總量。(2)邊攪拌邊將蛋白質溶液加入膠體金溶液中,逐漸加入,lmg的蛋白質量大約需5min,或在攪拌下將膠體金逐漸加入到蛋白質溶液中,大約需 5~10min。(3)繼
蛋白質的生物合成標記實驗
甲硫氨酸短時間標記懸液中的細胞 甲硫氨酸短時間標記貼壁培養細胞 甲硫氨酸對細胞進行脈沖追蹤標記 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質
膠體金標記蛋白質的純化
標記好的免疫金探針必須經過純化處理才能用于IHC染色,尤其是免疫電鏡的染色。純化的目的就是除去其中未標記的蛋白質,未充分標記的膠體金及在標記過程可能形成的各種聚合物。其純化方法有超速離心法、色譜柱法以及以上二者相結合應用。(一)超迷離心法根據膠體金顆粒大小不同及蛋白質種類不同,離心的轉速和時間也不同
蛋白質的生物合成標記實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 甲硫氨酸PBS儀器、耗材 培養箱離心管實驗步驟 1. ?培養懸浮細胞至對數增長期,室溫300 g 離心5 min。回收107~108細胞。?2. ?每2×107細胞用約10 ml 37℃的短時間標記培養基在圓錐型試管中洗滌,于室溫300 g 離心5 min 回收細胞,小
蛋白質的生物合成標記實驗
甲硫氨酸短時間標記懸液中的細胞 甲硫氨酸短時間標記貼壁培養細胞 甲硫氨酸對細胞進行脈沖追蹤標記 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質
靶蛋白的放射標記實驗—酵母和細菌蛋白質代謝放射標記
實驗材料 細胞 儀器、耗材 基本培養基 實驗步驟 1. 接種細胞于只含有必需氨基酸和輔因子的已知成分的基本培養基,于合適溫度中度振蕩培養過夜。 2. 用新鮮的基本培養基稀釋培養物,繼續溫育至 107?細胞/ml (酵母)或對數期中期(細菌)。 3. 5000
重組蛋白質的代謝標記實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸儀器、耗材 培養瓶離心機轉子實驗步驟 1. ?接種2.5×106細胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培養液的60 mm 肌組織培養皿中。對每一假定重組病毒分別準備一個平皿供感染用,并準備一個對照平皿供野生型桿狀病毒感染。于27℃溫育
重組蛋白質的代謝標記實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒
頭發中獨特蛋白質標記可識別身份
DNA檢測技術已在尋找罪犯方面發揮很大威力。但DNA檢測是找到犯罪分子的唯一手段嗎?美國一項最新研究稱,頭發中的獨特蛋白質標記同樣可以用于身份識別,讓那些犯罪分子無所遁形。 每個人的DNA都是獨一無二的,這是DNA檢測常用于犯罪調查或考古研究的原因所在。但這一手段也存在不足,因為隨著時
重組蛋白質的代謝標記實驗
由于重組蛋白質表達的時候,宿主蛋白質的合成基本終止,因此體內代謝標記是檢測重組蛋白質的敏感方法。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸儀器、耗材培養瓶離心機轉子實驗步驟1. ?接種2.5×106細胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培養液的60 mm 肌組織培養皿中。對每一假定重組病
頭發中獨特蛋白質標記可識別身份
DNA檢測技術已在尋找罪犯方面發揮很大威力。但DNA檢測是找到犯罪分子的唯一手段嗎?美國一項最新研究稱,頭發中的獨特蛋白質標記同樣可以用于身份識別,讓那些犯罪分子無所遁形。 每個人的DNA都是獨一無二的,這是DNA檢測常用于犯罪調查或考古研究的原因所在。但這一手段也存在不足,因為隨著時間的流
蛋白質的生物合成標記實驗(二)
實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS甲硫氨酸儀器、耗材培養箱離心機實驗步驟1. ?在100 mm 直徑的培養皿上培養貼壁細胞(0.5~2×107)至70%~90%匯片,吸去培養液,用10 ml 于37℃短時間標記培養基輕輕搖晃冼兩次細胞。2. ?加入5 ml 于37℃短時間標記培養基,在5%CO2的加濕培
蛋白質的生物合成標記實驗(三)
實驗材料細胞試劑、試劑盒甲硫氨酸PBS儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟1. ?準備和用[35S]甲硫氨酸標記細胞,用0.2~1 mCi/ml 的[35S]甲疏氨酸脈沖標記細胞5~30 min。?2. ?脈沖標記后,除去[35S]甲硫氨酸培養基,用10 ml 于37℃追加培養基冼細胞1次,加入10 ml
蛋白質的生物合成標記實驗(一)
甲硫氨酸短時間標記懸液中的細胞生物按照從脫氧核糖核酸 (DNA)轉錄得到的信使核糖核酸(mRNA)上的遺傳信息合成蛋白質的過程。由于mRNA上的遺傳信息是以密碼(見遺傳密碼)形式存在的,只有合成為蛋白質才能表達出生物性狀,因此將蛋白質生物合成比擬為轉譯或翻譯。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒甲硫氨酸PBS
不同標記與非標記蛋白質組學定量準確性分析研究
通過質譜法進行定量蛋白質組分析為生物醫學探索研究提供非常重要的途徑。 然而,了解生物樣品中的定量限制對于準確判斷結果非常重要。通過使用加入已知濃度的蛋白質標準品的復雜樣本,科學家們研究了無標記(label free)和基于標記(TMT和iTRAQ)的肽定量的定量限制,包括前體混合的評估及其對同重
全套抗體標記工具全套抗體和蛋白質標記試劑盒的使用2
? ?? 方便的設計以取得最大的效果:??? ? ? ?ReadiLink?快速抗體標記試劑盒利用胺反應性標記來制備共價標記的結合物。這些反應性標記選擇性地靶向并結合至目標抗體上的伯胺(例如賴氨酸殘基)。要標記您的抗體,只需將您的抗體溶液(濃度約1 mg / mL)與ReadiLink?
全套抗體標記工具全套抗體和蛋白質標記試劑盒的使用1
? ?? 用特定標簽標記抗體已成為生物科學和醫學研究中的重要且常規程序,標簽的范圍從視覺標記(例如熒光染料)到半抗原分子(例如生物素),標簽的作用有增強免疫復合物和蛋白質-蛋白質相互作用的可見性,以及用于蛋白質的分離和純化。?? ? ? ?在確定選擇哪種標簽類型時,應側重于抗體的下游應用。熒光標
全套抗體標記工具全套抗體和蛋白質標記試劑盒的使用3
? ? ? ?表2. ReadiLink?xtra快速抗體標記試劑盒? 名稱 Ex(nm) Em(nm) 規格 貨號 ReadiLink?xtra Rapid iFluor?350抗體標記試劑盒 344 4
蛋白質磷酸化的測定實驗—代謝標記
實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶實驗步驟1. 用 60 mm 或 100 mm 培養瓶,在完全培養基中培養細胞至所希望的密度。2. 用預熱的低磷酸培養基(無放射性磷酸鹽)沖洗兩次,然后加入含 0.5~1 mCi32P/ml 的低磷酸培養基(50~100 μmol/L 無機磷酸)。3. 培養結束后,回收?
用于無標記蛋白質分析的高通量系統
蛋白質分析尋找不需要檢測劑的技術。使用無微流體的系統越來越多地被使用,這些系統承諾更容易處理,更快的測量和更大的數據集。 生物層干涉測量法是一種無標記的快速實時蛋白質分析方法。 生物層干涉測量遵循基于光波疊加的光學干涉測量原理。使用具有特定的表面改性,以在傳感器的前端基于光纖的BLI生
活細胞蛋白質標記與成像研究獲進展
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504935.shtm近日,華東理工大學光遺傳學與合成生物學交叉學科研究中心楊弋、朱麟勇、陳顯軍團隊在活細胞蛋白質標記與成像研究中取得重要進展,相關研究在《細胞發現》發表。 ???人造熒光蛋白及熒光
蛋白質可控熒光標記研究方面取得新成果
9月21日,Angewandte Chemie International Edition發表了中科院生物物理研究所王江云研究組和林慶研究組合作成果Genetically Encoded Cyclopropene Directs Rapid, Photoclick
《自然化學》:標記蛋白質的有效新方法
最近,奧胡斯大學的研究人員開發出一種更簡單的方法,來構建DNA-蛋白質復合物。該方法可能加強疾病診斷相關的工作。 DNA與蛋白質——包括抗體相結合,提供了一種強有力的伙伴關系,可用于診斷技術、納米技術和其他學科。DNA-蛋白質復合物——用DNA標記蛋白質,可用于諸如感光檢測和生物材料可視化這樣
氯胺T法標記蛋白質/多肽注意事項
(1)放射性碘源的選用:無載體的131I或125I均可用于碘化標記,但應盡量選用新鮮的、比放射強度高的、含還原劑量少的放射性碘源。碘源的比放射強度最好≥50~100mCi/ml,至少也要>30mCi/ml,否則加入碘源的容量要增加,隨著帶入碘源中含有的還原劑(為放射性碘源運輸保存所需加入)量也增加
方案1-用-FLAG抗原表位標記蛋白質進行蛋白質免疫共沉淀
實驗材料抗 FLAGM2 單克隆抗體293 T 細胞試劑、試劑盒抗 FLAGM2 瓊脂糖親和凝膠甘氨酸辣根過氧化物酶IEF緩沖液裂解緩沖液NaCl磷酸鹽緩沖液聚乙烯亞胺RF10培養基RPMI 1640 培養基4 X SDS-PAGE 加樣緩沖液疊氮化鈉胰島素儀器、耗材大型離心機配有檢測 GFP 濾片
非標記蛋白質的磷酸化作用分析實驗
免疫印跡分析 化學發光法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質樣品 試劑、試劑盒
新蛋白質交聯抗體的標記和修飾使用方法
介紹現在的研究中,一個大生物分子與另一個大分子的共價結合,如抗體與酶或酶與DNA的共價結合,仍是研究人員實驗中的重點之一。其中有幾種方法可用于交聯兩個生物分子。一種常見的方法是使用一種小分子交聯劑(如Sulfo-SMCC)。SMCC的一端有胺反應性NHS酯基與蛋白質的游離胺(-NH2)反應,另一端有
方案10-定量蛋白質組學的體內蛋白質同位素標記實驗
實驗材料釀酒酵母試劑、試劑盒丙酮乙腈NH4HCO3細胞生長培養基干冰冰水2-巰基乙醇甲醇鐵氰化鉀蛋白提取試劑組合蛋白酶抑制劑硫代硫酸鈉儀器、耗材離心蒸發儀離心管血細胞計數器孵育器MALDI- TOF 質譜儀和 LC-MS MS 系統超聲波破碎儀分光光度計實驗步驟一、培養細胞二、提取蛋白的細胞準備三、