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    聚丙烯酰胺制備方法

    聚丙烯酰胺生產步驟一共兩步:單體生產技術:丙烯酰胺單體的生產時以丙烯腈為原料,在催化劑作用下水合生成丙烯酰胺單體的粗產品,經閃蒸、精制后得精丙烯酰胺單體,此單體即為聚丙烯酰胺的生產原料。丙烯腈+(水催化劑/水) →合 →丙烯酰胺粗品→閃蒸→精制→精丙烯酰胺。......閱讀全文

    常規聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗——檢測

    實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測,對于不同的目的,應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性,所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大

    生化實驗講義(理論部分)四——電泳技術

    4.1 電泳技術發展簡史  1809年俄國物理學家Рейсе首次發現電泳現象。他在濕粘土中插上帶玻璃管的正負兩個電極,加電壓后發現正極玻璃管中原有的水層變混濁,即帶負電荷的粘土顆粒向正極移動,這就是電泳現象。  1909年Michaelis首次將膠體離子在電場中的移動稱為電泳。他

    制膠過程中需要注意的細節及操作指南

    說到Western Blotting,估計所有技術員都會聯想到藍底上的黑色條帶,或者是儀器掃描的白底黑條圖片。經過了漫長的實驗流程,得到的會是清晰的、符合實驗理論的完美結果,或者更多的是其他讓自己略感失望的結局。比起其他分子生物學實驗,Western Blotting實驗似乎更加冗長、更加考驗技術,

    電泳的原理、分類和應用

      【概述】帶電顆粒在電場作用下,向著與其電性相反的電極移動,稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。  1807年,由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)最早發現。 

    聚丙烯酰胺凝膠中DNA片段的回收(壓碎與浸泡法)

                實驗方法原理 從聚丙烯酰胺凝膠中回收 DNA 的標準方法是由 Maxam 和 Gilbert (1977) 最先介紹的“壓碎與浸泡”技術。洗脫下來的 DNA 通常不含有酶抑制物及

    聚丙烯酰胺凝膠中DNA片段的回收(壓碎與浸泡法)

    從聚丙烯酰胺凝膠中回收 DNA 的標準方法是由 Maxam 和 Gilbert (1977) 最先介紹的“壓碎與浸泡”技術。洗脫下來的 DNA 通常不含有酶抑制物及對細胞轉染或微量注射有毒害的污染物。此方法所需時間長,但是工作量小。回收率少于30%~90%,視 DNA 片段大小而定。本實驗來源「分子

    聚丙烯酰胺凝膠中DNA片段的回收(壓碎與浸泡法)

    實驗方法原理 從聚丙烯酰胺凝膠中回收 DNA 的標準方法是由 Maxam 和 Gilbert (1977) 最先介紹的“壓碎與浸泡”技術。洗脫下來的 DNA 通常不含有酶抑制物及對細胞轉染或微量注射有毒害的污染物。此方法所需時間長,但是工作量小。回收率少于30%~90%,視 DNA 片段大小

    聚丙烯酰胺凝膠(PAGE膠電泳)電泳的方法與銀染方法

    PAGE膠電泳(聚丙烯酰胺凝膠電泳 )主要是以PAGE為介質,根據DNA分子大小和電荷分離DNA分子。PAGE膠電泳采用銀染法進行顯色。銀染的原理:一、銀離子(一般是AgNO3 )和DNA結合;二、還原劑甲醛把Ag+ 還原成銀顆粒,最終DNA呈現為黑褐色。聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持

    聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過氧化物酶同工酶

    一、目的同工酶是指能催化同一種化學反應,但其酶蛋白本身的分子結構組成卻有所不同的一組酶。研究表明,植物在發育過程中,所含同工酶的種類和比例都不相同,它們與植物的遺傳、生長發育、代謝調節及抗性等都有一定關系,因此作為基因表達的產物,測定同工酶譜是認識基因存在和表達的一種工具,在植物的種群、發育及雜交遺

    芯片毛細管凝膠電泳

    在蛋白質組學和蛋白質分離研究中,凝膠電泳是廣泛使用的分離技術。它是以凝膠等聚合物作為分離介質,利用其網絡結構并依據被測組分的分子體積不同而進行分離的一種分離模式。在芯片上采用凝膠電泳模式分離蛋白質,更有利于實現分離操作的高速度和高效率。Yao等采用十二烷基磺酸鈉(SDS)凝膠電泳分離模式,對比了芯片

    丙烯酰胺凝膠電泳

    聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的電泳方法。在這種支持介質上可根據被分離物質分子大小和分子電荷多少來分離。聚丙烯酰胺凝膠有以下優點:①聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺和N,N'甲叉雙丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝膠有 格子是帶有酰胺側鏈的碳-碳聚合物,沒有或很少帶有離子的側基,因而電

    瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗原理

    聚丙烯酰胺凝膠電泳,普遍用于分離蛋白質及較小分子的核酸。瓊脂糖凝膠孔徑較大適用于分離同工酶及其亞型,大分子核酸等應用較廣。瓊脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各種形狀、大小和孔隙度。瓊脂糖凝膠分離DNA度大小范圍較廣,不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長度從200bp至近50kb的DNA段。瓊脂糖通常用水平裝置在強度和

    PCR-SSCP 技術實驗

    實驗原理聚合酶鏈式反應-單鏈構象多態(Polymerase Chain Reaction-Single Strand Conformation Polymorphism,PCR-SSCP)技術是在PCR技術基礎上發展起來的,它是一種簡單、快速、經濟的用來顯示在PCR反應產物中單堿基突變(點突變)

    用于PCR的植物基因組DNA快速制備方法(一)

    一種用于PCR的植物基因組DNA快速制備方法 來源:方統科技----------------------------------------------------------------------------------摘要: 本文介紹了一種用于PCR的植物基因組DNA的快速制備方法。該方法

    聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離血清蛋白質(核黃素-TEMED聚...-2

    (二)聚丙烯酰胺凝膠的性能及制備原理1.性能聚丙烯酰胺凝膠的機械強度好,有彈性,透明,相對地化學穩定,對pH和溫度變化較穩定,在很多溶劑中不溶,是非離子型的,沒有吸附和電滲作用。原料成分要采用高純度制品,通過改變濃度和交聯度,可以控制孔徑變動在極廣泛的范圍,并且制備凝膠的重復性好,由于純度高及不溶性

    丙烯酰胺凝膠電泳

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    丙烯酰胺凝膠電泳

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    電泳實驗的危害與防護注意事項

      1.DNA電泳與溴化乙錠   “DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學實驗的基礎型實驗。“質粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學校也是必開的綜合性實驗。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實驗都會用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對DNA進行染色。EB是強誘變劑,具有高致癌性,會在60~70 cc蒸發,所

    電泳操作過程中有哪些注意事項

      1.DNA電泳與溴化乙錠  “DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學實驗的基礎型實驗。“質粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學校也是必開的綜合性實驗。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實驗都會用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對DNA進行染色。EB是強誘變劑,具有高致癌性,會在60~70 cc蒸發,所以在

    temed打翻了怎么辦

    通常情況下,實驗室常用的生物、化學試劑都帶有一定的毒性,從職業健康角度來講,大家在實驗操作過程中應注意做好防護措施,以免危害人身安全。身體是革命的本錢,老拿生命做實驗,實在不值得!來了解一下,生物、化學實驗室中常用到的一些有毒物質吧!1. DNA電泳與溴化乙錠“DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學實驗

    PCR-SSCR技術

    實驗概要掌握PCR-SSCR技術的基本方法。實驗原理聚合酶鏈式反應-單鏈構象多態(Polymerase  Chain Reaction-Single Strand Conformation  Polymorphism,PCR-SSCP)技術是在PCR技術基礎上發展起來的,它是一種

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    PCR擴增產物的電泳分析-2

    2)染色劑:核酸電泳后,需經染色后才能顯現出帶型,最常用的是溴化乙錠染色法,其次是銀染色。溴化乙錠(ethidium bromide,EB)是一種熒光染料,EB分子可嵌入核酸雙鏈的堿基對之間,在紫外線激發下,發出紅色熒光。根據情況可在凝膠電泳液中加入終濃度為 0.5ug/ml的EB,有時亦可

    PCR-SSCP 技術實驗

                實驗方法原理 PCR-SSCP技術的基本原理是PCR擴增后的DNA片段經變性成單鏈DNA,單鏈DNA在中性聚丙烯酰胺凝膠中電泳時形成不同的立體構象,其構象直接影響泳動速率,相同長度的

    谷胱甘肽瓊脂糖親和層析純化融合蛋白實驗

                實驗材料 表達 GST 融合蛋白的大腸桿菌細胞 試劑、試劑盒 二硫蘇糖醇

    電泳技術:生物化學實驗常用技術-2

    瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳是一種以瓊脂糖凝膠為支持物的凝膠電泳,其分析原理與其它支持物電泳的最主要區別是:它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構,直接參與帶電顆粒的分離過程,在電泳中,物質分子通過空隙時會受到阻力,大分子物質在泳動時受到的阻力比小分子大,因此在凝膠電泳中,帶電

    電泳實驗的危害與防護注意事項

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    利用核苷酸交換和剪切技術進行DNA碎裂和定向

    利用核苷酸交換和剪切技術進行DNA碎裂和定向進化             實驗材料 T4 DNA 連接

    聚丙烯酰胺凝膠電泳儀分析技術

            聚丙烯酰胺凝膠電泳儀(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝膠作為載體的電泳技術,于1959年建立,1964年進一步從理論和實驗技術上得到改進并推廣應用。由于分辨率高,目前已廣泛用于蛋白質等生物大分子的分析。一、PAGE工作原理:   

    PCR-SSCP 技術實驗

    聚合酶鏈式反應-單鏈構象多態(Polymerase Chain Reaction-Single Strand Conformation Polymorphism,PCR-SSCP)技術可用于:(1)癌基因和抑癌基因突變的篩查檢測;(2)遺傳病的致病基因分析;(3)基因診斷,基因制圖等領域。實驗方法原

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