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    電泳操作過程中有哪些注意事項

    1.DNA電泳與溴化乙錠 “DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學實驗的基礎型實驗。“質粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學校也是必開的綜合性實驗。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實驗都會用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對DNA進行染色。EB是強誘變劑,具有高致癌性,會在60~70 cc蒸發,所以在學生實驗中要特別注意其安全使用,嚴禁隨便丟棄。在實驗中使用及實驗結束后處理應注意以下事項。 (1)使用中注意事項 實驗室涉及到EB的操作應統一固定在實驗室的某一角落,稱量固體時要帶面罩和手套,使用含有EB的溶液務必帶上手套。同時不要在膠太熱的時候加EB,以防止因蒸發被吸入。接觸到EB的玻璃器皿應集中放置并專門使用,污染到EB的槍頭、抹布、手套及EB染色跑完的膠,回收至棕色的玻璃瓶中,定期進行焚燒處理舊。桌面或物體表面污染到EB時,可用活性碳進行處理。 (2)廢EB溶液處理 A:EB濃溶液(濃度大于0.5mg/mI)的凈化處理......閱讀全文

    電泳的原理、分類和應用

      【概述】帶電顆粒在電場作用下,向著與其電性相反的電極移動,稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。  1807年,由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)最早發現。 

    蛋白質分析技術(Analytical Techniques for Protein)-3

    六、SDS-PAGE1.SDS及SDS-PAGE(1)SDS:十二烷基硫酸鈉(sodium decyl sulfate,SDS),一種陰離子去污劑,它能以一定的比例和蛋白質結合,形成一種SDS—protein的復合物。(2)SDS- PAGE:具有SDS的PAGE,分離SDS—protein復合物,

    分子生物學常用實驗技術(page 3)

    分子雜交技術    互補的核苷酸序列通過Walson-Crick 堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA 分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DN

    非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳

    Native-PAGE原理:非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳 (Native-PAGE)是在不加入SDS 疏基乙醇等變性劑的條件下, 對保持活性的蛋白質進行聚丙烯酰胺凝膠電泳,常用于同工酶的鑒定和提純.未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝膠電泳可以使生物大分子在電泳過程中保持其天然的形狀和電荷,它們的分離

    核酸抽提經驗及原理

    1、核酸抽提原理 簡單地講,核酸抽提包含樣品的裂解和純化兩大步驟。裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的過程,純化則是使核酸與裂解體系中的其它成分,如蛋白質、鹽及其它雜質徹底分離的過程。 經典的裂解液幾乎都含有去污劑 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等

    生化樣本的芯片介電電泳富集和分離研究進展

    處于非均勻電場中的微粒由于極化效應而產生運動,這種現象稱之為介電電泳(Dielectrophoresis,DEP)。Maxwell和Wagner分別在1891和1914年研究懸浮液的介電特性時發現,由于介電微粒與懸浮介質的介電性能不同,在外加電場作用下介電微粒會發生界面極化,形成很大的感應偶極矩。1

    測序技術及DNA序列測定結果分析

    實驗概要 在分子生物學研究中,DNA的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用于測序的技術主要有Sanger等(1977)發明的雙脫氧鏈末端終止法和Maxam和   Gilbert(1977)發明的化學降解法。這二種方法在原理上差異很大,但都是根據核苷酸在某一固定的點開始

    電泳槽的操作流程

      0引言  鑒于陰極電泳涂裝泳透力好、涂料利用率高、安全性高、漆膜均勻且展平性好等優點,目前已經得到廣泛的應用,陰極電泳系統包括槽液循環系統、超濾循環系統、加熱冷卻循環系統、陽極系統、加藥系統、整流電源系統等。各個系統的狀態直接影響著整車的防腐性能,各主機廠針對電泳槽的清潔周期進行了嚴格規范和控制

    蛋白質技術專題:蛋白等電聚焦凝膠電泳技術(一)

      等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術,等電聚焦中,蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,負極為堿性的連續的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷,因此可以在電場

    蛋白質濃縮和溶質的去除實驗

    預計在新奇的一級分子和生物仿制藥實體方面將會有突出的增長。一些進步的是改良的分析、開發和相互作用。現在已有許多用于去除關的方法,包括凍干、反向萃取、溶質析出,precipitation、透析(溶劑交換) 、超濾和層析技術。值得注意的是,在眾多微和設備發展的支持下,小型化和高通量的蛋白質分析取得了極大

    蛋白質濃縮和溶質的去除實驗

    蛋白質濃縮和溶質的去除實驗             實驗步驟 一、層

    蛋白等電聚焦凝膠電泳技術

    1.原理等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術,等電聚焦中,蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,負極為堿性的連續的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷,因此可以在

    聚丙烯酰胺凝膠電泳(圓盤電泳)

    實驗概要本實驗介紹了聚丙烯酰胺凝膠電泳(圓盤電泳)的操作流程。實驗原理聚丙烯酰胺凝膠電泳是利用丙烯酰胺(acrylamide,Acr)與N,N亞甲基雙丙烯酰胺(N,Nmethylene bisacrylamide,Bis)在催化劑的作用下,聚合成大分子凝膠后,加樣,再進行電泳的一種方法。聚丙

    DNA測序——非同位素銀染

    實驗方法原理Promega公司的SILVER SEQUENCETM DNA測序系統是一種無放射性的序列分析系統,它通過靈敏的銀染方法檢測凝膠中的條帶。 銀染提供了一種對于放射性或熒光法來說更加快速,廉價的替代方法。測序結果可以在同一天內得到;電泳完成后經90分鐘就可讀序,這是常規的放射性測序法做不到

    常規聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗——檢測

    實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測,對于不同的目的,應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性,所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大

    聚丙烯酰胺凝膠電泳儀分析技術

            聚丙烯酰胺凝膠電泳儀(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝膠作為載體的電泳技術,于1959年建立,1964年進一步從理論和實驗技術上得到改進并推廣應用。由于分辨率高,目前已廣泛用于蛋白質等生物大分子的分析。一、PAGE工作原理:   

    蛋白等電聚焦凝膠電泳技術(二)

    5.電泳操作步驟:1)將蛋白樣品于等體積的2×上樣緩沖液混合,10000×g離心5min以除去蛋白質沉淀;2)用微量注射器將蛋白質樣品加入到上樣空底部,注意不要溢出來。注意:對于考馬斯亮藍染色液來說,每個泳道10-30ug的蛋白混合粗提物(我們俗稱粗抗原)或者5-10ug單一蛋白組分是較合理的上樣濃

    銀染法組織端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒產品使用說明

    主要用途YIJI銀染法組織端粒酶活性TRAP電泳分析試劑是一種旨在通過端粒酶體外合成端粒重復序列的引物延展方法,繼而進行多聚酶聯擴增反應,在非變性聚丙烯酰胺電泳上,通過經典的銀染技術,呈現六堿基相間的階梯圖像,以分析和評價活細胞端粒酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。廣

    蛋白質組學研究的完整解決方案

    人體內真正發揮作用的是蛋白質,蛋白質扮演著構筑生命大廈的“磚塊”角色,隨著破譯生命密碼的人類基因組計劃進入尾聲,一個以蛋白質和藥物基因學為研究重點的后基因組時代已經拉開序幕,蛋白質將是今后的重點研究方向之一。然而,蛋白質的分離和鑒定非常費時,目前測定蛋白質的技術遠遠落后于破譯基因組的工具,最好的實驗

    聚丙烯酰胺凝膠電泳儀分析技術

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    蛋白質組學研究系列儀器及軟件

    人體內真正發揮作用的是蛋白質,蛋白質扮演著構筑生命大廈的“磚塊”角色,隨著破譯生命密碼的人類基因組計劃進入尾聲,一個以蛋白質和藥物基因學為研究重點的后基因組時代已經拉開序幕,蛋白質將是今后的重點研究方向之一。然而,蛋白質的分離和鑒定非常費時,目前測定蛋白質的技術遠遠落后于破譯基因組的工具,最好的實驗

    聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離血清蛋白質(核黃素-TEMED聚...-1

    一、目的:1.學習聚丙烯酰胺凝膠電泳原理。2.掌握聚丙烯酰胺園盤電泳的操作技術。3.比較醋酸纖維薄膜電泳與本法分離血清蛋白質的效果。二、原理:(一)盤狀電泳原理盤狀電泳是在區帶電泳原理的基礎上,以孔徑大小不同的聚丙烯酰胺凝膠作為支持物,采用電泳基質的不連續體系(即凝膠層的不連續性、緩沖液離子成分的不

    動物細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒的使用方法

      動物細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產品說明書(中文版)   主要用途   動物細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑是一種旨在從動物細胞中分離出完整而純化的線粒體細胞器,并在蛋白酶抑制混合劑的幫助下,使已純化的線粒體膜結構破裂而獲得線粒體內活性蛋白酶系統的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、

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    法國sebia hydrasys全自動免疫電泳儀特點

      先進的電泳儀和電泳技術不斷發展,現已推出半干式無需緩沖液的水平電泳系統,是電泳歷史上又一新的里程碑,現已法國sebia hydrasys全自動免疫電泳儀為例作簡要介紹。一、基本結構1、穩壓電泳儀具有多種功能可進行含水瓊脂糖凝膠的各種電泳,蛋白質電泳過程中可分段聚焦,分辨力強,具有對電泳

    二十年磨一劍 打開DNA研究新天地 鄧子新院士訪談

    中國科學院院士、上海交通大學教授鄧子新說:“我們有一百個一千個理由可以放棄:拿不到研究基金、不被人認可……但我們從來沒有放棄過,一直做下來了。”   2007年8月,鄧子新應邀出席在英國紐卡斯爾召開的第十四屆國際放線菌生物學大會,并作了DNA大分子上一種新的硫修飾的研究報告。&nb

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    蛋白等電聚焦凝膠電泳技術

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    腫瘤瓊脂糖凝膠電泳標本的拍攝方法

    摘要:為保證腫瘤電泳標本的拍攝質量,就拍攝的條件與方法進行討論。關鍵詞:腫瘤;瓊脂糖凝膠電泳;標本攝影術;紫外光;紅濾色鏡;寬容度中圖分類號:R73 - 3 文獻標識碼:C 文章編號:1004 - 0242(2001) 06 - 0371 - 02在醫學腫瘤科學實驗中, 分子生物學、生物化學等一些科

    等電聚焦和二維凝膠電泳實驗

    對于復雜混合物,如全細胞裂解物或富集的亞細胞組分,通過兩步正交的分離 (orthogonalseperation),二維凝膠 (2D 膠)電泳可以很好地分離成幾百個至上千個單個蛋白質。第一次分離基于電荷,即使用變性等電聚焦電泳; 第二次分離基于表觀分子質量,即使用變性十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電

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