水生所構建出能標示肝臟全程發育的轉基因魚
脊椎動物的器官形成是一個復雜而又難以看到的發育過程。然而，依賴于轉基因技術發展起來的細胞命運追蹤和組織特異呈像就像黑暗中的燈光，可以照亮器官發生難以觀察到的細節。就肝臟器官發育研究來說，本世紀以來雖已獲得過幾個標示肝臟發育的轉基因斑馬魚品系，但迄今還沒有報道過能標示肝臟全程發生特別是前期發育的轉基因魚。 最近，中國科學院水生生物研究所桂建芳研究員主持的實驗室在對銀鯽和石斑魚14kDa阿樸脂蛋白（Apo-14）進行了分子和表達特征研究的基礎上，進一步分析了Apo-14在斑馬魚胚胎發育中的時空表達圖式，分離出斑馬魚Apo-14的啟動子序列，構建出由Apo-14啟動子序列驅動綠色熒光蛋白報告基因表達的轉基因斑馬魚Tg(Apo14: GFP)，并觀察到其母源表達和受精后轉位。 用該轉基因魚雄魚與野生型雌魚交配，在其雜合胚胎中可以追蹤綠色熒光蛋白起始表達的細胞及其詳細的發育行為。有意思的是，當胚胎發育至10小時尾芽剛剛顯現時，Ap......閱讀全文
斑馬魚胚胎DNA的制備
材料和試劑1.????????蛋白酶K（羅氏03115836001）2.??????? 1M的Tris，pH值8.33.??????? 氯化鉀4.??????? 吐溫20（10％，EMD4 biosciences，655207）5.??????? NP40（10％，Merck，492018）設備1.
斑馬魚胚胎細胞的培養
成纖維細胞飼養層 原代培養 細胞系 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過用鏈酶蛋白酶除去絨毛膜、用添加成分的 FGF 培養液培養細胞和采用不同的胰蛋白酶消化
以斑馬魚胚胎為模型－研究胚胎發育早期的自我保護機制
當生物體遇到藥物或化學污染物入侵時，它會應激性地提高自身轉化及外排能力，從而盡快將外源物降解或排出體外，從而實現自我保護，這一作用也被稱作生物體的外源物抵御作用。由于該作用決定了藥物或污染物在體內的停留時間，從而影響了藥物藥效或化學污染物毒性的發生，因而受到藥物學及環境毒理學研究的廣泛關注。
轉基因斑馬魚的構建
實驗概要本實驗對斑馬魚導入含 EGFP的質粒，觀察其在動物體內的表達情況，在斑馬魚體內，綠色熒光蛋白從原腸胚到出苗期均能在熒光顯微鏡下觀察到綠色熒光。主要試劑EGFP、綠色熒光蛋白基因、pEGFP-N2載體、E.coli主要設備試管、試管架、可調式微量加樣器、電泳儀、電泳槽、染色缸、42℃恒溫水浴箱
斑馬魚之后，CRISPR再探哺乳動物胚胎發育史
Researchers have used gene-editing to track the cell-by-cell development of a mouse embryo.Credit: Agnieszka Jedrusik and Magdalena Zernicka-Goetz
水生所構建出能標示肝臟全程發育的轉基因魚
脊椎動物的器官形成是一個復雜而又難以看到的發育過程。然而，依賴于轉基因技術發展起來的細胞命運追蹤和組織特異呈像就像黑暗中的燈光，可以照亮器官發生難以觀察到的細節。就肝臟器官發育研究來說，本世紀以來雖已獲得過幾個標示肝臟發育的轉基因斑馬魚品系，但迄今還沒有報道過能標示肝臟全程發生特別是前期發育的轉
方案27.6－斑馬魚胚胎細胞的培養
成纖維細胞飼養層 原代培養 細胞系 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過用鏈酶蛋白酶除去絨毛膜、用添加成分的 FGF 培養液培養細胞和采用不同的胰蛋白酶消化
chiron在斑馬魚胚胎發育和適應性演化中的作用
自達爾文時代以來，生物學家一直關注一個重要問題——生物是如何從共同的祖先演化成為豐富多樣的物種的？新基因的產生是生物演化和物種多樣性形成的重要源泉。研究新基因的起源機制實質上是在探究生命演化的根源，但在分子水平上，新基因是如何被保留下來的、又是如何整合到已有的網絡通路中的、對生物的適應性演化做出
斑馬魚胚胎細胞的培養——原代培養
實驗方法原理收集胚胎，除去絨毛膜，用胰蛋白酶分散胚胎細胞，然后在胚胎成纖維細胞飼養層上培養從斑馬魚囊胚和原腸期胚獲得的原代細胞。實驗材料鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA胚胎成纖維細胞飼養層人重組白血病抑制因子試劑、試劑盒LDF基礎培養液LDF原代培養液LDF維持培
斑馬魚胚胎細胞的培養——細胞系
實驗材料鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTAZEM-2細胞（或等同物）試劑、試劑盒LDF基礎培養液LDF原代培養液LDF維持培養液D培養液Holtfreter緩沖液實驗步驟鱒魚胚胎提取物：(a)收集胚胎（受精后 28 天的 Shasta Rainbow 或其他鱒魚種系
斑馬魚的胚胎原位雜交試驗實錄
收集斑馬魚的胚胎，在Holfretor水中培養，到達所需要的發育時期時，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，二十四小時后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗，然后換成甲醇，在-20C 保存，待用（兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧水處理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養，可阻斷色素的形成）原位
斑馬魚
一、概述斑馬魚是生長在印度、巴基斯坦淡水河流中的一種硬骨魚（鯉魚），成年魚全身僅長4－5厘米，因全身橫向分布著一道一道褐色的斑馬線而得名。斑馬魚很容易在實驗室飼養，一般3個月就可以達到生殖成熟期，雌魚每次產卵200枚左右，一生可產卵數千枚，斑馬魚所產之卵經24小時即可胚胎發育成熟，仔魚期只有1個月。
Dev－Cell：轉基因斑馬魚的彩色皮膚
美國杜克大學的研究人員，利用基因工程改造的方法，造成單個的皮膚細胞可以產生70種不同顏色的熒光。該研究發表在最近的《Developmental Cell》上。 該團隊并非是為了好玩才做成這樣五彩斑斕的斑馬魚，實際上，他們希望通過顏色標記來研究斑馬魚皮膚的愈合。利用顏色來標記細胞，可以讓斑馬魚皮
Science：為何有些細胞永遠不會癌變
許多細胞都包含有癌癥相關的基因，但是它們卻永遠不會變成腫瘤，這到底是為什么呢？近期來自波士頓兒童醫院的研究人員利用一種熒光報告基因解析了為何細胞會被激活進入類似干細胞的基因表達模式，這種新型可視化技術為了解癌癥的起源提供了新工具。 發表期刊：這一研究成果公布在1月29日的Science雜志上。
Science：為何有些細胞永遠不會癌變
許多細胞都包含有癌癥相關的基因，但是它們卻永遠不會變成腫瘤，這到底是為什么呢？近期來自波士頓兒童醫院的研究人員利用一種熒光報告基因解析了為何細胞會被激活進入類似干細胞的基因表達模式，這種新型可視化技術為了解癌癥的起源提供了新工具。這一研究成果公布在1月29日的Science雜志上。 簡介與評論
健康所造血干/祖細胞生存和自我更新能力研究獲新成果
中國科學院上海生命科學研究院/上海交通大學醫學院健康科學研究所，中國科學院干細胞生物學重點實驗室發育與疾病研究組于近日在國際著名學術期刊Blood在線發表了最新研究成果Dominant-Negative C/ebpα and Polycomb Group Protein Bmi1
胚胎和成年斑馬魚眼情的組織學準備
INTRODUCTIONThis protocol describes the histological preparation of embryonic and adult zebrafish eyes. The methods described here can be easily adapt
組織靶向性胚胎嵌合體—斑馬魚囊胚細胞移植
真核生物的基因調控比原核生物復雜得多。這是因為這兩類生物在三個不同水平上存在著重大的差別：①在遺傳物質的分子水平上，真核細胞基因組的DNA含量和基因的總數都遠高于原核生物，而且 DNA不是染色體中的唯一成分，DNA和蛋白質以及少量的RNA構成以核小體為基本單位的染色質；②在細胞水平上，真核細胞的染色
斑馬魚胚胎細胞的培養——成纖維細胞飼養層
實驗方法原理通過用鏈酶蛋白酶除去絨毛膜、用添加成分的 FGF 培養液培養細胞和采用不同的胰蛋白酶消化篩選成纖維細胞，用原腸胚期斑馬龜的胚胎成纖維細胞制備飼養層 [ Sun et al., 1995a ]。實驗材料鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA受精后8h的胚胎FB
MSHOT體視熒光顯微鏡應用于斑馬魚觀察
斑馬魚體型小，易于養殖，體外受精和發育，且早期胚胎透明，易于觀察及操作，受精后24小時主要的組織器官原基已形成，是理想的實驗動物。MSHOT明美體視熒光顯微鏡應用于斑馬魚觀察。斑馬魚胚胎可以靠被動擴散供氧生存相當長時間，因而具有心血管發育缺陷的胚胎能夠在早期發育中存活。這些優點使斑馬魚成為研究脊椎動
Blood：斑馬魚造血干細胞發育新的調控機制
人和動物的血液形成是一個有序而復雜的動態過程，造血干細胞的發生、分化與成熟受多種調控因子的精細調控。造血干細胞的發育和分化缺陷可引起多種疾病，包括貧血、免疫異常以及白血病等。近年來國外一個課題組應用全外顯子組測序技術，發現一些剪接因子基因突變與骨髓增生異常綜合征(MDS)以及繼發性急性髓系白血病
應用CRISPRCas9實現斑馬魚組織特異性基因敲除
近日，來自美國哈佛大學的研究人員在國際學術期刊Development cell發表了他們的最新研究進展，他們利用基于CRISPR-Cas9技術開發的載體系統在斑馬魚上實現了組織特異性基因敲除，這對于以斑馬魚為主要研究工具的科學家們無疑是一個好消息。 斑馬魚具有養殖方便、繁殖周期短、產卵量大、胚
斑馬魚出生就識數！
意大利科學家發現，斑馬魚幼魚在孵化后96小時里可以識別不同數量的黑條，研究者表示這一發現表明數字能力可能在新生斑馬魚中是與生俱來的。相關研究3月24日發表于《通訊—生物學》。 過去的研究表明，人類新生兒和新孵化的孔雀魚、小雞（孵化時腦已經高度發育的物種）具有數學能力。但在此之前，人們對新生時處
斑馬魚基礎研究
近期，我們收到了很多小伙伴提交的文獻獎勵申請，其中，有2篇成功吸引了小編的注意，這2篇文章的內容都是斑馬魚研究相關的。我們都知道，斑馬魚是一種常見的模式生物，但是市面上針對斑馬魚的抗體卻非常少，我們不僅有一百多種斑馬魚抗體，而且還可以根據客戶需求來進行定制生產。下面來看看這2篇文章吧。01標題：Sa
斑馬魚顯微CT實驗
斑馬魚作為傳統的脊椎動物模型已經廣泛應用于人類疾病和胚胎發育過程的研究，斑馬魚全基因已經完全清楚，與人類基因組有85%同源性，這意味著在斑馬魚身上進行的實驗，其結果很多都適用于人類。斑馬魚與其他實驗常用動物相比，具有較高的繁殖率和生長速率，并且其胚胎發育過程是在體外進行的，科研人員通過顯微鏡直接觀察
同濟大學研究揭示胚胎早期核小體重排規律
在封面設計中，DNA纏繞在燈籠上象征著核小體，斑馬魚胚胎發育過程也以藝術的形式呈現。 2月25日，記者從同濟大學獲悉，該校生命科學與技術學院張勇課題組與劉小樂課題組，在國際上首次揭示了脊椎動物在胚胎早期發育過程中的核小體重排規律，并對核小體定位的表觀遺傳預編程作用進行了探討。相關成果已作為
解析Cu2+通過表觀調控影響斑馬魚肌原纖維分化機制
近日，華中農業大學水產學院魚類逆境發育遺傳學團隊通過研究，發現了Cu2+通過表觀調控影響斑馬魚肌原纖維分化機制。相關研究論文以 “Copper ions impair zebrafish skeletal myofibrillogenesis via epigenetic regulation”
水生所關于斑馬魚基因捕獲與插入突變的研究取得突破
脊椎動物后基因組時代的主要任務是解讀基因的功能，而基因捕獲和插入突變是揭示基因功能的重要手段。斑馬魚具有易于飼養、繁育周期短、產卵量大、體外受精與發育等優點，已成為發育和遺傳學研究的理想模式動物，但尚缺乏胚胎干細胞和基于胚胎干細胞的基因敲除技術。轉座子介導的基因捕獲和突變研究為大規模篩選斑馬魚突
水生所在魚類誘導型原始生殖細胞理論和技術方面獲進展
原始生殖細胞（primordial germ cell，PGC）是精子和卵子在胚胎期的祖先細胞（progenitor cell），是遺傳物質代際傳遞的細胞載體。因此，PGC是開展基因編輯和轉基因等遺傳操作的理想靶細胞。將遺傳操作后的PGC移植入內源PGC剔除的受體胚，利用受體高效產生遺傳操作的供
通過流式細胞儀研究斑馬魚胚胎中細胞周期分析
[精華提要]結合綠色熒光蛋白表達的細胞周期分析廣泛的用于研究綠色熒光蛋白標記的細胞的細胞周期分布。這個方案是一種用綠色熒光蛋白標記的斑馬魚胚胎來分析細胞周期的方法。材料與試劑1.??????? PBS（Invitrogen公司14040）2.??????? 胎牛血清3.??????? 乙醇4.???