第八屆微全分析系統學術會議生物分離專場（上）
2013年5月17日，由中國化學會主辦、廈門大學承辦、復旦大學、浙江大學協辦的第八屆全國微全分析系統學術會議、第三屆全國微納尺度生物分離分析學術會議暨第五屆國際微化學與微系統學術會議在美麗的海濱城市廈門隆重召開。以下是生物分離專場精彩報告。北京大學 劉虎威教授 來自北京大學的劉虎威教授為我們帶來了題為《DART質譜在線耦合毛細管電泳及膠束電動毛細管色譜技術》的精彩報告，在報告中劉教授介紹了在工作中實現了電泳實時直接分析質譜(DART-MS)與毛細管電泳(CE)的耦合。從毛細管電泳(CE)洗脫的分析物DART和生產轉移到亞穩態氦通量直接電離MS的檢測，從而實現在線分離、同時檢測。 CE-DART-MS可以比傳統的CE-ESI-MS承受高濃度的洗滌劑和鹽，避免了收集毛細管電泳流出物和接口清洗的難題，它簡化了實驗程序，縮短分析時間。該毛細管區帶電泳技術性能已經得到成功驗證。毛細管區域凝膠電泳和膠......閱讀全文
毛細管電泳分離因素分離電壓
分離電壓在CE中，分離電壓也是控制電滲的一個重要參數。高電壓是實現CE快速、高效的前提，電壓升高，樣品的遷移加大，分析時間縮短，但毛細管中焦耳熱增大，基線穩定性降低，靈敏度降低；分離電壓越低，分離效果越好，分析時間延長，峰形變寬，導致分離效率降低。因此，相對較高的分離電壓會提高分離度和縮短分析時間，
毛細管電泳法的毛細管電泳的分離模式
毛細管區帶電泳（Capillary Zone Electrophoresis， CZE）最常見的模式，用以分析帶電溶質。樣品中各個組分因為遷移率不同而分成不同的區帶。為了降低電滲流和吸附現象，可將毛細管內壁做化學修飾。毛細管凝膠電泳（Capillary Gel Electrophoresis，CGE
毛細管電泳的分離原理
電泳和電滲流并存，在不考慮相互作用的前提下，粒子在毛細管內電介質中的遷移速率是兩種速率的矢量和，在典型的毛細管電泳分離中，溶質的分離基于溶質間電泳速率的差異。電滲流的速率絕對值一般大于粒子的電泳速率，并有效地成為毛細管電泳的驅動力。溶質從毛細管的正極端進樣，帶正電的粒子最先流出，中性粒子次之，帶負電
毛細管電泳的分離模式
?? (1)毛細管區帶電泳，用以分析帶電溶質（為了降低電滲流和吸附現象，可將毛細管內壁涂層）。 (2)毛細管凝膠電泳，在毛細管中裝入單體，引發聚合形成凝膠，主要用于測定蛋白質、DNA等大分子化合物。另有將聚合物溶液等具有篩分作用的物質，如葡聚糖、聚環氧乙烷，裝人毛細管中進行分析，稱毛細管無膠篩分電
毛細管電泳分離因素溫度
溫度溫度影響分離重現性和分離效率，控制溫度可以調控電滲流的大小。溫度升高，緩沖液粘度降低，管壁硅輕基解離能力增強，電滲速度變大，分析時間減短，分析效率提高。但溫度過高，會引起毛細管柱內徑向溫差增大，焦耳熱效應增強，柱效降低，分離效率也會降低。
毛細管電泳的分離模式
毛細管區帶電泳（Capillary Zone Electrophoresis， CZE）最常見的模式，用以分析帶電溶質。樣品中各個組分因為遷移率不同而分成不同的區帶。為了降低電滲流和吸附現象，可將毛細管內壁做化學修飾。毛細管凝膠電泳（Capillary Gel Electrophoresis，CGE
毛細管電泳影響分離因素
毛細管電泳影響分離因素 1.緩沖液 緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定，在相同的pH下，不同緩沖試劑的分離效果不盡相同，有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有：磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。 緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度，從而影響Zeta電勢，而Zeta電勢的變化又會影響到電
毛細管電泳的分離因素介紹
緩沖液緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定，在相同的pH下，不同緩沖試劑的分離效果不盡相同，有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有：磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度，從而影響Zeta電勢，而Zeta電勢的變化又會影響到電滲流。緩沖液濃度升高，離子強度增加，雙電層
高效毛細管電泳分離模式
分離類型八種分離類型,介紹常用的幾種;根據試樣性質不同,采用不同的分離類型;每種機理的選擇性不同;一,毛細管區帶電泳capillary zone electrophoresis ,CZE帶電粒子的遷移速度=電泳和電滲流速度的矢量和.正離子:兩種效應的運動方向一致,在負極最先流出;中性粒子:無電泳現象
毛細管電泳的分離分析方法
CE 是在傳統的電泳技術基礎上于本世紀60 年代末由Hjerten 發明的，其利用小的毛細管代替傳統的大電泳槽，使電泳效率提高了幾十倍。此技術從80 年代以來發展迅速，是生物化學分析工作者與生化學家分離、定性多肽與蛋白類物質的有利工具。CE 根據應用原理不同可分為以下幾種；毛細管區帶電泳Capi
毛細管電泳分離因素pH值
pH值緩沖體系pH的選擇依樣品的性質和分離效率而定，是決定分離成敗的一大關鍵。不同樣品需要不同的pH分離條件，控制緩沖體系的pH值，一般只能改變電滲流的大小。pH能影響樣品的解離能力，樣品在極性強的介質中離解度增大，電泳速度也隨之增大，從而影響分離選擇性和分離靈敏度。pH還會影響毛細管內壁硅醇基的質
毛細管電泳分離因素進樣
進樣CE的常規進樣方式有兩種：流體力學和電遷移進樣。電遷移進樣是在電場作用下，依靠樣品離子的電遷移和（或）電滲流將樣品注入，故會產生電歧視現象，會降低分析的準確性和可靠性，但此法尤其適用于粘度大的緩沖液和CGE情況。流體力學進樣是普適方法，可以通過虹吸、在進樣端加壓或檢測器端抽空等方法來實現，但選擇
毛細管電泳的分離模式介紹
毛細管區帶電泳（Capillary Zone Electrophoresis， CZE）最常見的模式，用以分析帶電溶質。樣品中各個組分因為遷移率不同而分成不同的區帶。為了降低電滲流和吸附現象，可將毛細管內壁做化學修飾。毛細管凝膠電泳（Capillary Gel Electrophoresis，CGE
毛細管電泳根據分離模式分類
毛細管電泳根據分離模式不同可以歸結出多種不同類型的毛細管電泳。毛細管電泳的多種分離模式，給樣品分離提供了不同的選擇機會，這對復雜樣品的分離分析是非常重要的。毛細管電泳類型類型縮寫說明1 單根毛細管毛細管區帶電泳CZE毛細管和電極槽灌有相同的緩沖液毛細管等速電泳CITP使用兩種不同的CZE 緩沖液毛細
毛細管電泳的分離模式介紹
(1)毛細管區帶電泳,用以分析帶電溶質。為了降低電滲流和吸附現象,可將毛細管內壁涂層。 (2)毛細管凝膠電泳,在毛細管中裝入單體,引發聚合形成凝膠,主要用于測定蛋白質、DNA等大分子化合物。另有將聚合物溶液等具有篩分作用的物質,如葡聚糖、聚環氧乙烷,裝入毛細管中進行分析,稱毛細管無膠篩分電泳,
毛細管電泳的分離因素介紹
溫度 溫度影響分離重現性和分離效率，控制溫度可以調控電滲流的大小。溫度升高，緩沖液粘度降低，管壁硅輕基解離能力增強，電滲速度變大，分析時間減短，分析效率提高。但溫度過高，會引起毛細管柱內徑向溫差增大，焦耳熱效應增強，柱效降低，分離效率也會降低。 添加劑 在電解質溶液中加入添加劑，例如中性鹽
毛細管電泳的分離電壓介紹
在CE中，分離電壓也是控制電滲的一個重要參數。高電壓是實現CE快速、高效的前提，電壓升高，樣品的遷移加大，分析時間縮短，但毛細管中焦耳熱增大，基線穩定性降低，靈敏度降低；分離電壓越低，分離效果越好，分析時間延長，峰形變寬，導致分離效率降低。因此，相對較高的分離電壓會提高分離度和縮短分析時間，但電
毛細管電泳芯片二維電泳分離
芯片二維電泳分離芯片毛細管電泳應用的成功促進了高速高效的芯片二維電泳技術的發展。對于多組分的復雜蛋白質樣品，采用傳統的一維分離方法通常無法滿足要求，需要采用二維分離技術來提高分離效率，增加峰容量。與傳統的毛細管電泳系統相比，在芯片上進行二維電泳分離，可以通過設計芯片通道結構實現通道的直接交叉或連通，
毛細管電泳分離條件選擇流程
分離條件的選擇是毛細管電泳中最重要但也是最難之處。不同的專業研究工作者可能會有各自不同的選擇策略和流程，我們提出如下九步選擇流程，僅供參考： 第一步，盡可能多地了解分離樣品的類型、來源、組成及其性質； 第二步，根據樣品的可能性質和來源，選擇分離模式，若無樣品信息可先選CZE； 第三步，根據樣品性質確
毛細管電泳色譜儀分離類型
毛細管電泳色譜儀分離類型有電泳型、色譜型、聯用型和其它型。一、電泳型：1、毛細管區帶電泳：毛細管內只填充pH緩沖液。2、毛細管凝膠電泳：毛細管內填充聚丙烯酰胺等凝膠。3、毛細管等電聚焦電泳：毛細管內填充pH梯度介質。4、毛細管等速電泳：通常采用不連續（自由溶液）電泳介質。二、色譜型：1、填充毛細管電
微量制備毛細管電泳實驗——多次分離
實驗材料多肽：ACTH 4-10試劑、試劑盒血管緊縮素I和血管緊縮素II0.05 mmol／L 和 0.25 mmol／L 磷酸鈉緩沖液(pH 2.30 存儲于 4℃)0.1 mol／L 氫氧化鈉儀器、耗材75 μm 內徑的融合硅毛細管柱CE 儀器錐形微量瓶實驗步驟1. 低壓下（0.5 lb/in2
毛細管電泳色譜儀分離系統
毛細管電泳色譜儀是以毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅動力，利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離，毛細管是分離的關鍵。一、毛細管材質：理想的毛細管必須是化學和電惰性，能透過紫外和可見光，有一定的韌性，富有彈性，易于彎曲，耐用而且便宜。目前使用的材質有聚四氟乙烯、玻璃和石英等，其中石英最
芯片毛細管電泳分離模式介紹
芯片毛細管電泳分離蛋白質主要采用區帶電泳、凝膠電泳、等電聚焦、膠束電動色譜及二維電泳等模式。
毛細管電泳芯片等電聚焦分離
芯片等電聚焦分離芯片等電聚焦分離蛋白質的原理與常規毛細管等電聚焦基本相同，都是依據蛋白質的等電點(pI)不同而進行分離。Hofmann等首次將毛細管等應用于蛋白質分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上，采用等電聚焦模式分離廠牛血清白蛋白和增強型綠色熒光蛋白(EGFP)。Das等。26 3
毛細管電泳根據分離通道形狀分類
按分離通道形狀分為圓形、扁形、方形毛細管電泳等。
毛細管電泳技術的分離因素
緩沖液緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定，在相同的pH下，不同緩沖試劑的分離效果不盡相同，有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有：磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度，從而影響Zeta電勢，而Zeta電勢的變化又會影響到電滲流。緩沖液濃度升高，離子強度增加，雙電層
毛細管電泳的分離模式的綜述
CE具有多種分離模式（多種分離介質和原理），故具有多種功能，因此其應用十分廣泛，通常能配成溶液或懸浮溶液的樣品（除揮發性和不溶物外）均能用CE進行分離和分析，小到無機離子，大到生物大分子和超分子，甚至整個細胞都可進行分離檢測。它廣泛應用于生命科學、醫藥科學、臨床醫學、分子生物學、法庭與偵破鑒定、
毛細管電泳各類物質的分離要點
1.陰離子及有機酸： ?此類物質沒有紫外吸收，要采用間接檢測法 ?間接紫外法一般以鉻酸鈉等物質作為背景吸收物 ?CTAB通常用作電滲流反向劑，以加速出峰，提高峰的尖銳度 ?要使用反向極性分離 2.陽離子及金屬離子的分離： ?此類物質沒有紫外吸收，要采用間接檢測法 ?間接紫外法一般以氨基吡啶等物質作為
高效毛細管電泳的分離原理總結
1 毛細管區帶電泳（Capillary Zone Electroporesis，CZE） 分離原理：毛細管區帶電泳出稱為自由溶液毛細管電泳，是毛細管電泳是最簡單的一種形式。其分離機理是基于各被物質的凈電荷與質量之間比值的差異，不同離子按照各自表面電荷密度的差異，以不同的速度在中解質中移動而
毛細管電泳分離因素添加劑
添加劑在電解質溶液中加入添加劑，例如中性鹽、兩性離子、表面毛細管活性劑以及有機溶劑等，會引起電滲流的顯著變化。表面活性劑常用作電滲流的改性劑，通過改變濃度來控制電滲流的大小和方向，但當表面活性劑的濃度高于臨界膠束濃度時，將形成膠束。加入有機溶劑會降低離子強度，Zeta電勢增大，溶液粘度降低，改變管壁