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    抗血清的制備(二)

    3、免疫途徑,劑量和免疫周期 抗原注射途徑可根據不同抗原及試驗要求,選用皮內、皮下、肌肉、靜脈或淋巴結內等不同途徑注入抗原進行免疫。一般常采用背部、足掌、淋巴結周圍、耳后等處皮內或皮下多點注射。初次免疫與第二次免疫的間隔時間多為2~4周。常規免疫方案為抗原加CFA皮下多點注射進行基礎免疫;再以免疫原加IFA作2~5次加強免疫,每次間隔2~3周,皮下或腹腔注射加強免疫。 1)常規(皮內多點注射)免疫: 1第一次免疫:劑量為每只兔子注射1.0 ml抗原乳劑(含抗原量1~2mg)。注射部位為兩只后腳掌的皮內各注射0.2 ml,其余0.6 ml分多點注入脊柱二側,頸部,腹股溝和腋窩等處淋巴結附近部位皮內,每點可注入0.05ml,分12點注入。 2第二次免疫:初次免疫后20天左右,劑量為1.0ml/只(1~2 mg/ml),加福氏不完全佐劑。注射部位在腹部皮......閱讀全文

    淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體制備技術3

    抗體的制備方法與原理一、抗血清的制備  有了質量好的抗原,還必須選擇適當的免疫途徑,才能產生質量好(特異性強和效價高)的抗體。  (一)用于免疫的動物  作免疫用的動物有哺乳類和禽類,主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等,實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據抗原的生物學特性和所

    抗體的制備方法與原理

    一、抗血清的制備  有了質量好的抗原,還必須選擇適當的免疫途徑,才能產生質量好(特異性強和效價高)的抗體。  (一)用于免疫的動物  作免疫用的動物有哺乳類和禽類,主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等,實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據抗原的生物學特性和所要獲得抗血清數量,如

    狂蛇風險堪憂:抗蛇毒血清短缺問題難解決

       午夜剛過,Abdulsalam Nasidi的電話就響了,打電話的正是尼日利亞衛生部部長。Nasidi曾在尼日利亞衛生部工作,電話那頭希望他能趕緊去貝努埃河谷,為許多奄奄一息的患者進行診治。那里忽然出現了很多病人,他們眼、口、鼻出血。聽到這些癥狀,Nasidi的腦海里涌現出的是埃博拉、拉沙熱、

    免疫酶細胞化學實驗技術-3

    一、對照實驗  1.吸收實驗  應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時,需用相應的抗原吸收抗血清后,再孵育標本,判斷結果的可信性(結果應為陰性)。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種(見本書第一章 ),對于不能形成沉淀,難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原,以固相吸收為佳

    抗傷寒沙門菌SOD血清的制備及其免疫保護作用的研究

    作者:徐軍發,唐湘涓        單位:廣東醫學院檢驗科關鍵詞:傷寒沙門菌;鼠傷寒沙門菌;Fe-SOD;抗血清;免疫保護作用【 摘要 】 目的 制備抗傷寒沙門菌Fe-SOD血清,研究其免疫保護作用,探討SOD與沙門菌毒力的關系。

    獨特型和抗獨特型(一)

      一、獨特型發現  本世紀中葉,人們發現將Ig注入同種或異種動物體內可誘導產生抗Ig的抗血清。隨后發現了在Ig分子上有兩類抗原決定簇,即同種型(isotype)和同種異型(allotype)。1955年Slater等在研究兔抗人骨髓瘤蛋白抗血清的特異性時,發現抗某一些骨髓瘤蛋白抗血清用無

    APOA APOB測定實驗

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    APOA APOB測定實驗

    實驗方法原理 火箭免疫電泳法是單向免疫擴散法的一種改進,通過應用直流電(穩壓穩流)使抗(APOA1和B)在含有特異性抗體的瓊脂糖凝膠中擴散,PH8.6時抗原向陽極移動,在泳動圖中與凝膠中的抗體反應,逐漸形成類似火箭的沉淀鋒,其鋒高(或鋒面積)與抗原濃度成正比,故可作抗原定量。實驗步驟 一、 實驗器材

    三種方法檢測孕婦血清IgG抗A(B)效價的結果比較

    用經典法/改良法和微柱凝膠法檢測孕婦血清IgG抗A(B)效價的結果比較:作者:張慶俠,郝建華,倪琳婷,程瓊,周天祥作者單位:深圳市第六人民醫院,廣東 深圳 518052【摘要】  目的:比較經典法、改良法和微柱凝膠法抗人球蛋白試驗檢測孕婦血清中IgG抗A(B)效價的差異。方法:用經典法、改

    ABO血型詳述

        ABO血型物質(凝集原)除存在于紅細胞膜上外,還出現于唾液、胃液、精液等分泌液中。血型物質的化學本質是指構成血型抗原的糖蛋白或糖脂,而血型的特異性主要取決于血型抗原糖鏈的組成(即血型抗原的決定簇在糖鏈上),稱之為凝集原。ABO的起源及發現    血液有

    免疫電鏡膠體金標記法操作大全

    金標法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質,使其與抗體相吸附,從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原 反應時,在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色,不需加外進行染色。在電鏡水平,金顆粒具有很高的電子密度,清晰可辨。因此,免疫

    三種方法檢測孕婦血清IgG抗A(B)效價的結果比較

    作者:張慶俠,郝建華,倪琳婷,程瓊,周天祥作者單位:深圳市第六人民醫院,廣東 深圳 518052【摘要】  目的:比較經典法、改良法和微柱凝膠法抗人球蛋白試驗檢測孕婦血清中IgG抗A(B)效價的差異。方法:用經典法、改良法和微柱凝膠法分別檢測136例孕婦血清中IgG抗A(B)效價 ,計算其

    人環磷酸鳥苷酶聯免疫試劑盒使用說明(二)

    特異性試劑的制備cGMP  AChE示蹤液100dtn cGMP  AChE示蹤液與6ml的緩沖液或500 dtn cGMP  AChE示蹤液與30ml的緩沖液配制的cGMP示蹤液應儲存在4℃下,4周內有效示蹤染料:加入染料可輔助目測觀察,在配制好的示蹤液中加入染料(6

    人CGMP ELISA Kit使用說明(二)

    特異性試劑的制備cGMP  AChE示蹤液100dtn cGMP  AChE示蹤液與6ml的緩沖液或500 dtn cGMP  AChE示蹤液與30ml的緩沖液配制的cGMP示蹤液應儲存在4℃下,4周內有效示蹤染料:加入染料可輔助目測觀察,在配制好的示蹤液中加入染料(6

    免疫電鏡膠體金標記法-2

    (4)膠體金與蛋白A的結合和純化,依上法測得所需的比例超過10%,即每30ml膠體中加入2mg蛋白A,5min后,加入0.3ml PEG作為穩定劑,然后以15000r/min離心45min(不同方法制備的金離心速度不同),略帶紅色的松散的復合物沉淀即為PAg復合物。小心棄去上清液,加入PBS沖洗

    植物病毒檢疫技術突破填補國內空白

    經過半年多的努力,中山檢驗檢疫局技術中心分子生物學實驗室27日傳出喜訊,該實驗室已經制備出我國最新頒布的檢疫性植物病毒李痘病毒、李屬壞死環斑病毒和侵染香蕉最為嚴重的病毒之一黃瓜花葉病毒的抗血清,價值超億元,該項技術填補了廣東檢驗檢疫系統在全國植物病毒方面無自制抗血清的空白。 據《南方都市報》報道,

    HLA抗原的檢測(一)

      (一)HLA-A、B、C抗原的檢測  HLA-A、B、C抗原可用血清學方法鑒定,故又稱SD抗原(serologically defined antigen),常采用微量淋巴細胞毒性試驗(microlymphocytotoxicity test),又稱補體依賴細胞毒試驗(comp

    DNA及寡核苷酸探針在原位雜交組織化學

    一、DNA探針的應用  雖然一般認為DNA探針敏感度不如cRNA探針,但在病毒的檢測等領域中DNA探針仍得到廣泛的應用。  在原位雜交細胞化學的操作步驟方面與cRNA探針基本相同,所不同的是:(1)雜交時需先在高溫80~95℃短時處理,使DNA探針及細胞內靶DNA變性,解離成單鏈,迅置于冰上冷卻。然

    抗血清制備法-生化檢驗

    抗血清制備法:抗血清指含有抗體的血清。傳統的抗血清制備方法是將某種抗原通過多次注入動物,數十天后或數月后,采集動物血,立即分離出血清。此抗血清在保存或應用前必須作效價和特異性鑒定及純化。(一)免疫動物的選擇免疫動物的選擇基本要求:1.抗原與免疫動物的種屬差異越遠越好。2.動物必須適齡、健壯、無感染、

    抗人球蛋白-間接抗人球蛋白試驗

    抗人球蛋白試驗-間接抗人球蛋白試驗:原理:抗人球蛋白試驗(antiglobulintest,AGT),又稱Coombs試驗,是檢查不完全抗體的一種很好方法。用人血清免疫家兔,產生抗人球蛋白抗體,即抗人球蛋白血清。將抗人球蛋白血清(AGS)加入已經致敏的紅細胞鹽水懸液中,紅細胞表面的抗體球蛋白(即使其

    連日洪災致蛇傷病人猛增 長沙抗蛇毒血清告急

      連日來,長沙市內醫院頻繁接診被蛇咬傷患者,部分醫院庫存的抗蛇毒血清告急。據了解,受全國多個地區進入汛期或發生水災的影響,被蛇咬傷的患者猛增,而目前國內僅一家公司生產抗蛇毒血清,導致抗蛇毒血清的供應緊缺。  抗蛇毒血清最近緊缺  目前,天氣日趨炎熱,蛇類在田間和草叢中

    沉淀反應實驗原理、材料和實驗方法(1)

    可溶性抗原(如血清中的蛋白,組織浸出液,細胞裂解液等)與其相應的抗體在溶液中或凝膠中結合,若比例合適,可形成肉眼可見的抗原-抗體復合物,這就是免疫沉淀反應。免疫沉淀反應可以在小玻璃管中或毛細玻璃管及凝膠平板中進行。在用凝膠平板做實驗時,常用瓊脂糖凝膠做介質,有的加電流,使反應更快更靈敏。一、環狀沉淀

    江蘇大學 檢驗醫學專業實驗-臨床免疫學檢驗

      抗血清的制備  【原理】:用抗原刺激機體可以產生抗體,抗原的性質、純度和活性影響其免疫動物后獲得的抗體的的特異性和效價。在體外有目的的制備抗原,經初次、再次免疫的過程可以獲得高質量的抗體。  【注意事項】  ①制備佐劑時,一定要順著同一方向用勁磨。  ②檢查油包水的方法:培養皿內加水,滴入混勻液

    合成生物學解決全球抗蛇毒血清短缺

      當醫療慈善機構無國界醫生在去年9月稱全球正面臨抗蛇毒血清短缺的公共衛生危機時,巴西生物化學家Paulo Lee Ho并未感到驚訝。他的整個職業生涯都是在圣保羅的布坦坦研究所尋找制造抗蛇毒血清的更佳途徑,從而治療銀環蛇的咬傷。  傳統方法依賴于天然銀環蛇毒液,但這是很難獲得的:蛇的每一咬只產生少量

    瓊脂擴散試驗(gel diffusion test)

    可溶性抗原與相應抗體在半固體瓊脂凝膠內擴散,二者相遇,在比例合適處形成白色沉淀。基本類型有單向擴散和雙向擴散兩種。 (一)雙向瓊脂擴散試驗(Double immunodiffusion test) 抗原和抗體加到瓊脂板上相對應的孔中,兩者各自向四周擴散,如兩者

    正粘病毒分離和鑒定

    正粘病毒診斷 根據流感的典型臨床癥狀及其高度的接觸傳染性、急性發作和迅速傳播等特點,常可作出初步診斷。但為了弄清是由哪一型或哪一亞型病毒引起的,則必須進行實驗診斷,即必須進行病毒分離和鑒定或作血清學檢查,才能獲得確診,尤其是在首次發現疫情的地區。 (1)病毒的分離和鑒定&n

    抗環瓜氨酸肽(CCP)抗體檢測的應用進展

    類風濕關節炎(rheumataid arthritis,RA)是一種以慢性關節炎為特征的系統性自身免疫性疾病,該病如不及時診斷治療,即可出現軟骨和骨的侵蝕性病變,造成關節結構破壞,最終發展成為關節畸形、強直,導致不同程度的殘疾,因此早期診斷至關重要。但是,目前的診斷均依據1987年美國風濕協會修訂的

    超敏反應的主要免疫學檢測

    四種類型超敏反應發生的機制不同,同一抗原也可在不同條件下引起不同類型的超敏反應。四種類型超敏反應的免疫檢測方法有所不同。Ⅰ型超敏反應主要檢測過敏原和測定血清特異性IgE.Ⅱ型超敏反應的檢測重點是抗血細胞抗體。Ⅲ型超敏反應主要檢測循環免疫復合物。Ⅳ型超敏反應可用皮膚試驗來檢測。  一、過敏原皮膚試驗 

    血清丙型肝炎病毒感染指標及序列變異的動態研究

      摘要 目的:探討動態觀測HCV感染指標及序列變異的意義。方法:ELISA方法檢測抗-HCV-IgG、IgM,RT-PCR方法檢測HCV rNA, PCR產物直接測序。結果:6例感染HCV的血透析患者抗-HCV-IgG的表現類型分為持續陰性及持續陽性兩種;抗-HCV-IgM有四種表現:一

    抗球蛋白實驗(直接Coombs實驗和間接Coombs實驗)

    機體受某些抗原刺激后,可產生不完全抗體,由于這種抗體體積較小、長度短,只能與顆粒抗原一方相結合(又稱單價抗體),因而不能出現肉眼可見的凝集反應。Coombs首先根據抗體存在于球蛋白,注入異種動物的球蛋白又是抗原的原理,將含有不完全抗體的血清球蛋白免疫異種動物,獲得抗球蛋白抗體,此種抗體可以起到橋梁作

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