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    DNA測序儀原理和方法

    DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括Sanger雙脫氧鏈終止法和Maxam-Gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今DNA序列分析的主流。美國PE ABI公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA測序儀,其中310型是臨床檢測實驗室中使用最多的一種型號。本實驗介紹的是ABI PRISM 310型DNA測序儀的測序原理和操作規程。【原理】ABI PRISM 310型基因分析儀(即DNA測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司專利的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法),因此通過單引物PCR測序反應,生成的PCR產物則是相差1個堿基的3''''末端為4種不同熒光染料的單鏈DNA混合物,使得四種熒光染料的測序PCR產物可在一根毛細管內電泳,從而避免了泳道間遷移率差異的影響,大大提高了測序的精確度。由于分子大小不同,在毛......閱讀全文

    DNA序列測定的技術和策略

    目前應用的兩種快速序列測定技術是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化學降解法。雖然其原理大相徑庭,但這兩種方法都是同樣生成互相獨立的若干組帶放射性標記的寡核苷酸,每組寡核苷酸都有固定的起點,但卻隨機終止于特定的一種或者多種殘基上。由于DNA上的每一個堿

    分子生物學常用實驗技術(page 3)

    分子雜交技術    互補的核苷酸序列通過Walson-Crick 堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA 分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DN

    三分鐘了解4代基因測序技術

      基因檢測技術是近年來伴隨“精準醫療”概念的提出而迅速發展起來的一門科學技術,它可以從基因組機制上闡釋遺傳學、發育生物學、進化生物學等學科的經典概念,在全基因組水平延伸了染色體高級構象、細胞異質性、功能模塊等新概念,為精準醫學開辟了應用性新領域。  近年來,隨著分子水平的基因檢測技術平臺不斷發展和

    關于三代基因測序,你所需要知道的都在這兒!

      一、導讀:  在大部分投資者對“二代測序”(NGS)還沒有搞清技術細節的情況下,“三代測序”(3GS)又火了。  6月17日,醫藥板塊中基因測序相關標的在“三代測序技術獲得重大突破”的新聞影響上出現明顯漲幅,我們也接到較多投資者對相關新聞的背景及觀點的詢問。為此,我們結合各方面資料歸納總結了三代

    DNA三代測序技術原理、平臺、特點介紹

    人類基因組計劃、基因芯片、個性化分子診斷、生物云計算……這些在21世紀第一個十年里吸引無數眼球的熱門詞匯,都和一個產業頗有淵源——DNA測序。生物技術和信息技術在這片創意新天地里水乳交融,如果用一句詩來形容坐擁兩大技術護航的DNA測序產業,那就是——天生麗質難自棄。隨著人類基因組計劃的完成,人類對自

    一文看全!史上59家測序儀公司的“爭霸戰”

      要談測序,首先要向華人生物學家、DNA測序技術的奠基人吳瑞先生致敬。大家大多都聽過桑格,但很少有人知道吳瑞。其實吳瑞早在1968年就發表第一篇論文測定了DNA的堿基組成,1970年的新文章既測定DNA堿基組成又測定出順序,是真正的DNA測序第一人。而在吳瑞先生工作的啟發下,Sanger深入研究,

    【回顧】一代、二代、三代測序技術

      第一代測序技術-Sanger鏈終止法  一代測序技術是20世紀70年代中期由Fred Sanger及其同事首先發明。其基本原理是,聚丙烯酰胺凝膠電泳能夠把長度只差一個核苷酸的單鏈DNA分子區分開來。一代測序實驗的起始材料是均一的單鏈DNA分子。第一步是短寡聚核苷酸在每個分子的相同位置上退火,然后

    法醫DNA檢測儀器及其發展動向分析

    摘    要:實踐證明,法醫DNA檢測技術和相關儀器在犯罪嫌疑人認定、親權鑒定和系列串并案偵破中發揮了顯著作用,是我國公安一線偵察破案和打擊犯罪的重要技術手段。以法醫DNA檢測技術為主線,對相關儀器的產生背景、發展歷程、工作原理、各類技術優劣,以及國內外研究現

    法醫DNA檢測技術的現狀及展望

    法醫DNA檢測技術的現狀及展望龐曉東 陳學亮 榮海博 俞麗娟 管樺 張濤公安部第一研究所DNA檢測技術的應用,為法醫學帶來了一場技術革命。通過對遺傳物質DNA的序列多態性及長度多態性的檢驗,即可實現個體識別及親權鑒定,該技術正在成為當前法醫物證鑒定最

    INC-Seq:提高納米孔測序準確性的新方法

      新加坡基因組研究院(GIS)的研究人員開發了一種方法,稱為INC-Seq,能夠提高牛津納米孔技術公司掌上測序儀MinIon的測序準確性。目前他們正努力改進該方法,將它應用到復雜樣本的16S測序、RNA測序以及基因組復雜區域測序等中。  研究人員在近日發表于《Giga Science》的文章中描述

    國外企業“妙招” 攻克長讀長測序技術中“DNA提取”的痛點?

      近年來,Pacific Biosciences、Oxford Nanopore Technologies、Bionano Genomics和10x Genomics等公司的長讀長測序和基因組圖譜技術越來越受歡迎。隨著相關技術的推廣應用,長讀長測序技術在快速、高效提取高質量高分子量DNA方面的痛點

    固態納米孔:下一代DNA測序技術原理、工藝與挑戰

      科學通報,中國科學C輯:生命科學,這兩份期刊均是由中國科學院和國家自然科學基金委員會共同主辦的,我國學術期刊中的知名品牌,被國內外各主要檢索系統收錄,如國內的《中國科學論文與引文數據庫》(CSTPCD)、《中國科學引文數據庫》(CSCD)等;美國的SCI、CA、EI,英國的SA,日本的《科技文獻

    基因測序“摩爾定律”初現,“三代測序”要革“二代”的命?

      在“二代測序”(NGS)尚未迎來投資熱潮的情況下,技術突破捷報連連的“三代測序”(3GS)又進入到了投資人的視野中。1986年,第一臺商用基因測序設備正式出現,到第二代測序設備出現,期間間隔了19年時間。而第二代設備問世,到第三代設備的誕生,僅僅用了5年,基因測序設備的更新換代速度正在不斷加快。

    融資頻頻 從華大智造大額融資解析國產測序市場

      短短一個月內,齊碳科技、華大智造、塞納生物先后宣布完成融資。國產基因測序儀再一次沖上了醫療健康領域的熱點話題。  多年來,測序儀行業一直處在少數幾家國外巨頭的壟斷之下。華大智造近兩年的頻繁動作雖然吹響了國產測序儀反攻的號角,但是從目前的市場占有率上看,想要最終實現進口替代,可能還需要些時間。  

    DNA測序概念再升級:新方法每秒識別660億堿基

      DNA測序經歷了Sanger測序、二代測序(高通量測序)及三代測序(納米孔測序),日前,美國國家標準與技術研究所(NIST)模擬了一個新型基因測序概念:通過將DNA分子從微小的、具有化學活性的石墨孔洞中拉動,通過測量石墨孔洞邊緣產生的電位變化來實現高速、高精度、高效率的DNA測序;研究人員表明,

    DNA測序原理和方法

    DNA測序原理和方法DNA序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括Sanger雙脫氧鏈終止法和Maxam-Gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今DNA序列分析的主流。美國PE ABI公司已生產出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA測序儀,其中310型是臨床檢測實

    一文讀懂分子診斷技術、PCR技術、基因測序技術

      分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常,以確定受檢者有無基因水平的異常變化,對疾病的預防、預測、診斷、治療和預后具有重要意義。通俗

    一文讀懂分子診斷常用技術

      分子診斷技術是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態和疾病作出診斷的技術。其基本原理是檢測DNA或RNA的結構是否變化、量的多少及表達功能是否異常,以確定受檢者有無基因水平的異常變化,對疾病的預防、預測、診斷、治療和預后具有重要意義。通俗

    《技術評論》選出2013年10大突破性技術(三)

      (六)產前DNA測序:成長的煩惱   自香港科學家盧煜明(音譯)在1997年發現孕婦血液中存在胎兒DNA這一現象至今,無創產前DNA測序以前所未有的速度從實驗室邁向市場。胎兒全基因組測序已經成為基因組革命的下一個前沿領域,隨著測序技術的發展,胎兒全基因組測序也不再只是一個技術問題,而成為一個重

    解讀《腫瘤個體化治療檢測技術指南》:9大檢測技術

      腫瘤的個體化治療基因檢測已在臨床廣泛應用,實現腫瘤個體化用藥基因檢測標準化和規范化,是一項意義重大的緊迫任務。  為進一步提高腫瘤個體化用藥基因檢測技術的規范化水平,7月31日,國家衛生計生委個體化醫學檢測技術專家委員會,在廣泛征求意見的基礎上,制訂了《腫瘤個體化治療檢測技術指南(試行)》。  

    常用的分子生物學基本技術(三)

    DNA序列分析(DNA sequencing) 應用各種突變檢測技術檢測到的基因突變,最后都需用序列分析才能確定突變類型及突變位置,其效率可以達到100%。現在的測序方法已與經典的方法有了很大的不同,其基本原理雖仍是雙脫氧終止法,但自動化程度大為提高,操作更簡便,測序時間也大大縮短。隨著PCR技術與

    常用的分子生物學基本技術

    核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的

    DNA測序基本原理及流程

    DNA測序基本原理及流程1977年,Sanger等人發展建立起來的一種DNA測序方法。基本原理:雙脫氧鏈末端終止法雙脫氧鏈末端終止法通過使用鏈終止劑—類似于正常dNTP的2’,3’-雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP),將延伸的DNA鏈特異性地終止。其反應體系也包括單鏈模板、引物、4種dNTP和DNA聚合

    北大7位學者歷時7年刷新DNA測序精度

       日前,北京大學黃巖誼教授帶領的團隊在《自然—生物技術》期刊上在線發表《基于信息理論來修正錯誤的高準確度熒光產生DNA測序方法》,這標志著我國學者已成功刷新DNA信息解讀的精確程度,從根本上提高了測序方法本身的精度,打破了國外在基因測序領域的技術壟斷,極大推動了我國生命科學與醫學的研究發展,同時

    北京大學7位學者歷時7年刷新DNA測序精度

      北京大學黃巖誼教授帶領的團隊在《Nature Biotechnology》期刊上在線發表《基于信息理論來修正錯誤的高準確度熒光產生DNA測序方法》,這標志著我國學者已成功刷新DNA信息解讀的精確程度,從根本上提高了測序方法本身的精度,打破了國外在基因測序領域的技術壟斷,極大推動了我國生命科學與醫

    DNA測序

                    自動測序法 雙脫氧鏈末端終止法 非同位素銀染 鳥槍法 Maxam-Gilbert化學修飾法

    九大測序平臺對比(六)

    8.PGM企業: Ion Torrent推出時間: 2010年主流型號: Ion Personal Genome Machine?(2010年)樣品要求: 5 μg DNA,起始DNA體積不超過130μL測序原理: 半導體芯片測序該測序儀使用了一種高密度半導體小孔芯片。該芯片置于一個離子敏感層和離子

    DNA測序——自動測序法

    DNA測序可用于:(1)測定未知序列;(2)確定重組DNA的方向與結構;(3)對突變進行定位和鑒定比較研究。實驗方法原理ABI  PRISM 310型基因分析儀(即DNA測序儀),采用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯酰胺平板電泳,應用該公司專利的四色熒光染料標記的ddNTP(標記終止物法),

    蛋白上游研究之Sanger測序技術的發展史

    DNA測序技術是分子生物學研究中最常用的技術,它的出現極大地推動了生物學的發展。成熟的DNA測序技術始于20世紀70年代中期。1977年Maxam和Gilbert報道了通過化學降解測定DNA序列的方法。同一時期,Sanger發明了雙脫氧鏈終止法。20世紀90年代初出現的熒光自動測序技術將DNA測序帶

    特異性位點的DNA甲基化的檢測方法

    相關專題1 甲基化敏感性限制性內切酶 (methylation-sensitive restriction Endonuclease,MS-RE)-PCR/Southern法這種方法利用甲基化敏感性限制性內切酶 對甲基化區的不切割的特性,將DNA消化為不同大小的片段后再進行分析。常使用的甲基化敏感的

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