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  • 液相色譜(HPLC)入門(三)

    高效液相色譜量級 [分析,制備和工程]我們已經討論了高效液相色譜如何提供分析數據,用于定性和定量樣品中的化合物。然而,高效液相色譜也可以用來純化和收集所需的每一個化合物,在流通池下游使用組分收集器。這個過程被稱為制備液相[如圖 K].在制備液相中,科學家可以收集每個流出色譜柱的組分[例如:在本例中,黃色,之后紅色,之后藍色]。圖 K: 高效液相色譜系統用于純化:制備色譜法餾分收集器在特定的時間段,選擇收集純化了的組分。收集瓶可移動,從而使每瓶只收集單個峰的組分。科學家確定純化的程度和數量的目標。結合樣品的復雜性,所需組分相對基質的性質和相濃度等考慮,這些目標,又決定了需要處理的樣品量和高效液相色譜系統的處理量。總的來說,隨著樣品量的增加,高效液相色譜柱尺寸將會加大,泵也會需要更高的體積流速。決定一個高效液相色譜系統的處理量稱為選擇高效液相色譜的量級。 表 A 列出各種高效液相色譜的量級及其色譜分離目標。通過特定地匹配......閱讀全文

    液相色譜(HPLC)入門(三)

    高效液相色譜量級 [分析,制備和工程]我們已經討論了高效液相色譜如何提供分析數據,用于定性和定量樣品中的化合物。然而,高效液相色譜也可以用來純化和收集所需的每一個化合物,在流通池下游使用組分收集器。這個過程被稱為制備液相[如圖 K].在制備液相中,科學家可以收集每個流出色譜柱的組分[例如:在本例中,

    液相色譜(HPLC)入門(四)

    高效液相色譜分離模式總的來說,化合物的三種主要的性質可以用來產生高效液相色譜分離。它們是:· 極性· 電荷· 分子大小首先,讓我們考慮極性和根據這一特性的兩種主要分離模式:正相和反相色譜。基于極性的分離一個分子的結構、活性和物化性質由組成它的原子和化學鍵決定。在一個分子內部,決定了其特殊性質和可預測

    液相色譜(HPLC)入門(五)

    正相高效液相色譜在植物提取物的分離過程中,茨維特成功運用極性固定相[玻璃柱中的粉筆末; 如圖A]和弱極性[非極性]流動相。這種經典的色譜模式被稱為正相。圖 S -1: 正相色譜法圖 S -1 代表三個染料混合物的正相色譜分離。極性的固定相最強地保留了極性的黃色染料。相對非極性的藍色染料在非極

    液相色譜(HPLC)入門(二)

    什么是色譜圖?色譜圖表示發生在高效液相色譜系統中的化學[色譜]分離。一系列從基線出現的峰以時間為坐標。每個峰代表對不同化合物的檢測器反應。色譜圖由計算機數據站描繪。[如圖 H].Figure H: How Peaks Are Created圖H中,黃色譜帶完全通過了檢測器流通池;產生的電信號被送到計

    液相色譜(HPLC)入門(一)

    什么是液相色譜?歷史概述和定義液相色譜的定義是二十世紀早期由俄羅斯植物學家 Mikhail S. 茨維特提出的。他最先嘗試在裝滿顆粒的柱子上使用溶劑來分離從植物中提取的化合物[樹葉色素]。茨維特用顆粒填滿開口的玻璃柱。他發現兩種特殊的材料,粉筆末(碳酸鈣)和氧化鋁很有用。他將樣品[混勻植物葉

    氣相色譜入門

    下載地址:氣相色譜入門 文件簡介: 本書所提供的信息將有助于您有效地使用氣相色譜儀(GC)1 什么是氣相色譜本章介紹氣相色譜的功能和用途以及色譜儀的基本結構2 進樣方式本章介紹氣相色譜最常用的幾種進樣方式3 組分分離樣品經過色譜柱而被分離成單個組分本章將告訴你如何進行分離和怎樣使用色譜柱4 組分

    液相色譜(HPLC)漏液怎么辦

      通常可以通過擰緊或更換管路接頭來解決漏液的問題。但值得注意的是過份擰緊會導致金屬接頭的漏液和塑料接頭的磨損。如果通過稍微擰緊接頭不能解決漏液的問題,就必須將接頭取下,檢查是否損壞(例如,卡套損壞、密封表面有雜質);損壞的接頭應該更換掉。   1. 接頭處漏液。   一般通過擰緊、清洗、更

    Thermo-Scientific-Syncronis-HPLC-液相色譜柱

      開發新方法時,色譜工作者最重要的目標之一就是實現一致的、可重現的分離。為此,就需要選擇重現性高的HPLC 色譜柱。   新一代Thermo Scientific Syncronis HPLC 色譜柱通過選用超純硅膠、自動裝填工藝、嚴格的檢測和控制程序幫助色譜工作者達到滿意的

    高效液相色譜(HPLC)常見問題

    1、HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法樣品量不足:解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多:調整衰減即可。檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。檢測池

    高壓液相色譜(HPLC)系統組成(二)

    四、檢測器?? ??檢測器是HPLC儀的三大關鍵部件之一。其作用是把洗脫液中組分的量轉變為電信號。HPLC的檢測器要求靈敏度高、噪音低(即對溫度、流量等外界變化不敏感)、線性范圍寬、重復性好和適用范圍廣。?1.分類?1)按原理可分為光學檢測器(如紫外、熒光、示差折光、蒸發光散射)、熱學檢測器(如吸附

    高壓液相色譜(HPLC)系統組成(一)

    ?HPLC系統一般由??輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置?等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、預柱或保護柱、柱溫控制器等,現代HPLC儀還有微機控制系統,進行自動化儀器控制和數據處理。制備型HPLC儀還備有自動餾分收集裝置

    高效液相色譜(HPLC)常見問題

    1、HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法?樣品量不足:解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多:調整衰減即可。檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。檢測

    HPLC入門問題FAQ

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    HPLC入門問題FAQ

    HPLC 篇?1 . HPLC 靈敏度不夠的主要原因及解決辦法?樣品量不足:解決辦法為增加樣品量?樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子?樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器?檢測器衰減太多:調整衰減即可。?檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數?檢測器池窗

    Agilent液相色譜化學工作站入門手冊

    ?內容提要: 本入門手冊詳細介紹了安捷倫液相色譜系統化學工作站的操作步驟。如果按照本書的章節順序進行操作,您將學會足以能分析自己樣品的化學工作站基本操作。使用本手冊單獨一部分還可以了解特定的操作,或當您要完成一項特定的分析操作時,可使用本手冊的相應部分作為操作提示。 1? 平衡系統 這一練習將

    高效液相色譜(HPLC)流動相的性質要求

    高效液相色譜(HPLC)流動相溶劑具有粘度低、與檢測器相容性好、產品易得、毒性低等特點。選擇填料(固定相)后,強溶劑對填料表面溶質的吸附降低,相應的容量因子K降低。然而,較弱的溶劑增加了溶質在填料表面的吸附,相應的容量因子k也增加了? 因此,k值是流動相組成的函數? 塔板數n通常與流動相的粘度成反比

    高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理

    盡管二維凝膠電泳(2-DE)是常用的對全蛋白組的分析方法,但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong等使用HPLC/質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC分離蛋白質,并用MALDI-

    高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理

    盡管二維凝膠電泳(2-DE)是常用的對全蛋白組的分析方法,但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong 等使用HPLC/ 質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC 分離蛋白質,并用MAL

    離子色譜與高效液相色譜(HPLC)有什么不同

    離子色譜和HPLC本質上是一樣的,結構幾乎一樣,只是離子色譜用于測試陰陽離子,液相色譜用于測試有機物,色譜分離系統有些差異,IC用離子交換柱,LC用吸附柱。

    離子色譜與高效液相色譜(HPLC)有什么不同

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    高效液相HPLC溶劑的選擇及使用(三)

    3、溶劑與檢測器的匹配 在使用紫外可見光檢測器時,需選用無紫外吸收特性的溶劑作流動相。樣品測定波長應當在溶劑紫外吸收波長上限以上,噪聲降至10-4?~?10-5AU,才能保證檢測的靈敏度,才能用于梯度洗脫。流動相溶劑在整個梯度范圍內互溶性要好,盡量減少溶劑折光指數對溶劑組成梯度的影響。溶劑

    簡介高效液相色譜(HPLC)流動相的性質要求

      (1)流動不會相應地改變填料的任何性質 低交聯度離子交換樹脂和排斥色譜填料有時會遇到一些有機相的膨脹或收縮,從而改變色譜柱填料床的性能。堿性流動相不能用于硅膠柱體系中,酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附柱體系中。  (3)必須與探測器配套。當使用紫外檢測器時,所用的流動相在檢測波長上不應吸收

    HPLC液相色譜柱柱壓升高原因

    HPLC液相色譜柱柱壓升高原因? ? 色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透性,延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱壓升高一般是由于柱床內產生了雜質,造成流體阻力加大所致。格萊普多年從事色譜行業,積累了一些經驗,您可按照以下建議,逐項排除原因:1、流動相的前處理?。

    液相色譜HPLC檢測器及檢測限

    在定義檢測器靈敏度時,只考慮了樣品響應信號的大小,并沒有考慮檢測器的噪聲。當檢測器噪聲與響應信號大小相近時,兩者就無法區分。而且對于某些檢測器,其輸出信號要經過放大后才能輸出到記錄儀。電子放大器幾乎可以把一個信號放大到任意倍數,這樣似乎可以任意提高檢測器的靈敏度。其實不然,因為在放大信號時也同時放大

    高效液相色譜(HPLC)柱子的清洗和再生

    1. 柱子的清洗 即使樣品和流動相已做過前處理,也仍難以完成避免柱子受到污染,因此必須對柱子行清洗。清洗應定期進行,如果在短期內分析許多樣品,則以每日清洗一次為宜,至少也應一周一次,防止有太多的雜質在柱上堆積。 反相柱的常規洗滌辦法是:分別取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱體積(既對于一根4

    高壓液相色譜HPLC發展概況、特點及分類

    一、液相色譜理論發展簡況色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobilephase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(stationaryphase)發生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。色譜法最早是由俄國

    土霉素的高效液相色譜HPLC檢測方案

    簡介:高效液相色譜HPLC檢測土霉素的方法,首頁要了解土霉素是什么和分子式等,然后通過制定高效液相色譜檢測方案,最后通過儀器與試劑等硬性條件進行土霉素檢測。【土霉素】土霉素:抗菌譜和應用與四環素相同。本品對腸道感染,立克次體病,包括流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、落基山熱、恙蟲病和Q熱,支原體屬感染

    高效液相色譜入門基礎知識之高壓輸液泵

      高壓輸液泵是液相色譜儀的關鍵部件,其作用是將流動相以穩定的流速或壓力輸送到色譜系統。對于帶在線脫氣裝置的色譜儀,流動相先經過脫氣裝置再輸送到色譜柱。輸液泵的穩定性直接關系到分析結果的重復性和準確性。? ? ?高效液相色譜儀的結構高效液相色譜儀由高壓輸液系統、進樣系統、分離系統、檢測系統、記錄系統

    高效液相色譜(High-Performance-Liauid-Chromatography,HPLC)

    Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色譜的設想,然而直到六十年代后期,由于各種技術的發展,高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜(HighSpeed Liquid Chromatography),高壓液相色譜(High Parss-ure Lipuid

    Alliance-HPLC高效液相色譜溶劑管理是如何的?

      Alliance HPLC高效液相色譜該單元的溶劑管理系統最多對四路色譜溶劑進行脫氣并以精確的比例混合,并無脈動地平穩輸送溶劑;   Alliance HPLC高效液相色譜有下述特征:   僅配備兩個入口閥的串行流路可降低復雜性,并大程度縮短故障停機時間   自動化溶劑壓縮性(無錯溶劑

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