蛋白質含量的測定—Folin-酚試劑法(Lowry法)和考馬斯亮藍法 1.學習Folin-酚法測定蛋白質含量的原理和方法。 2. 進一步掌握分光光度法——求標準曲線、準確測定未知樣品、正確使用儀器。 原理 蛋白質濃度可以從它們的物理化學性質,如折射率、比重、紫外吸收等測定而得知:或用化學方法,如定氮、雙縮脲反應、Folin-酚試劑反應等方法來求算。其中雙縮脲法和Folin-酚法是一般實驗室中經常使用的方法。它們操縱簡便、迅速,不需要復雜而昂貴的設備,又能適合一般實驗室的要求,若作一般的濃度測定較為適應。Folin-酚法靈敏度高,較雙縮脲法靈敏100倍。本實驗采用的是Folin-酚法。 Folin-酚法所用的試劑由兩部分組成。試劑甲相當于雙縮脲試劑,可與蛋白質中的肽鍵起顯色反應。試劑乙(磷鎢酸和磷鉬酸混合液)在堿性條件下極不穩......閱讀全文
實驗原理: 蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bra
蛋白質測定方法在生化研究中經常涉及到,它是很多實驗的基礎。因此,了解蛋白質測定方法相當重要。目前,常用的蛋白質測定方法有 以下五種方法:凱氏定氮法,雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)、紫外吸收法和考馬斯亮藍法(Bradford法)。在這 五種測定法中,考馬斯亮藍法(Br
實驗 植物體內可溶性蛋白質含量的測定植物體內的可溶性蛋白質大多數是參與各種代謝的酶類,測其含量是了解植物體總代謝的一個重要指標。在研究每一種酶的作用時,常以比活(酶活力單位/mg蛋白)表示酶活力大小及酶制劑純度。因此,測定植物體內可溶性蛋白質是研究酶活的一個重要項目。常用測定方法有Lowry法和考馬
蛋白質是構成生物體細胞組織的重要成分。食物中的蛋白質是人體中氮的惟一來源, 具有糖類和脂肪不可替代的作用。蛋白質與營養代謝、細胞結構、酶、激素、病毒、免疫、物質運轉和遺傳等密切相關, 其分離與定性、定量分析是生物化學和其他生物學科、食品檢驗、臨床檢驗、診斷疾病、生物藥物分離提純和質量檢驗中最重要的工
實驗原理:蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bradford法
蛋白定量--Lowry法[wkh] 2008-07-28 20:15:35 Folin—酚試劑法(Lowry法)(一)實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近
一、 實驗目的1、 了解測定蛋白質的常用方法2、 掌握蛋白質含量測定的經典Lowry – Folin法。二、 實驗原理在堿性溶液中,蛋白質中的肽鍵與銅鹽可產生雙縮脲反應,產生絡合物,此絡合物會將磷鉬酸-磷鎢酸試劑還原,產生深藍色復合物。在一定的條件下,藍色深淺與蛋白質的量成正比。在波長540nm處測
一、 實驗目的1、 了解測定蛋白質的常用方法2、 掌握蛋白質含量測定的經典Lowry – Folin法。二、 實驗原理在堿性溶液中,蛋白質中的肽鍵與銅鹽可產生雙縮脲反應,產生絡合物,此絡合物會將磷鉬酸-磷鎢酸試劑還原,產生深藍色復合物。在一定的條件下,藍色深淺與蛋白質的量成正比。在波長540nm處測
一、 實驗目的1、 了解測定蛋白質的常用方法2、 掌握蛋白質含量測定的經典Lowry – Folin法。二、 實驗原理在堿性溶液中,蛋白質中的肽鍵與銅鹽可產生雙縮脲反應,產生絡合物,此絡合物會將磷鉬酸-磷鎢酸試劑還原,產生深藍色復合物。在一定的條件下,藍色深淺與蛋白質的量成正比。在波長540nm處測
蛋白濃度測定方法有很多種,各種蛋白質含量測定的研究也屢見報道。每種方法都有其優點和局限性,在蛋白質樣品中往往會含有一些化學試劑,有些化學試劑會干 擾蛋白濃度測定。因此,尋找合適的實驗方法以避免干擾對蛋白濃度測定的準確性至關重要。基于Lowry法在測定PEG_IL_6樣品時出現大量黃綠色沉 淀,尿素對
蛋白質含量測定實驗可以用于:(1)測定蛋白質濃度;(2)檢測所提取的蛋白質含量。實驗方法原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即f
蛋白質測定儀可以對牛奶(包括純奶、核桃、燕麥、紅棗牛奶、牛初乳)、奶粉(包括牛初乳粉)、豆粉、豆奶粉和雞蛋等樣品中蛋白質含量的測定。適用于乳制品質監站、產品質 量監督檢驗所、農產品檢測中心、畜牧水產品檢測站、出入境檢驗檢疫局、工商、衛生等部門對牛奶、奶粉、豆粉、豆奶粉及雞蛋等樣品中蛋白質的快速定量檢
實驗概要運用LOWRY法測定蛋白質的含量。實驗原理Lowry法是雙縮脲法和福林酚法的結合與發展,其原理是:蛋白質溶液用堿性銅溶液處理,形成銅-蛋白質的絡合鹽,再加入酚試劑后,除使肽鏈中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等顯色外,還使雙縮脲法中肽鍵、堿性銅的顯色效果更強烈。因此,Lowry法的顯色效果比單獨使用
蛋白質是細胞中最重要的含氮生物大分子之一,承擔著各種生物功能。蛋白質的定量分析是蛋白質構造分析的基礎。目前常用的蛋白測量的方法主要有BCA法、考馬斯亮藍法(Bradford)和Lowry法等。BCA法 原理在堿性環境下蛋白質與Cu2+絡合并將Cu2+還原成Cu1+(biuret
(一)實驗原理雙縮脲法(Biuret法)和Folin―酚試劑法(Lowry法)的明顯缺點和許多限制,促使科學家們去尋找更好的蛋白質溶液測定的方法。1976年由Bradford建立的考馬斯亮蘭法(Bradford法),是根據蛋白質與染料相結合的原理設計的。這種蛋白質測定法具有超過其他幾種方法的突出優點
蛋白質測定方法一般來說,有以下五種:凱氏定氮法,雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)、紫外吸收法和考馬斯亮藍法(Bradford法)。表 五種蛋白質測定方法的比較 從以上表格中可以得出,不同的方法有不同的特點和優勢,如紫外吸收法測定時間快。但是綜合起來,最后一種考馬斯亮藍
【實驗原理】: Western Blot 印跡方法,又稱為免疫印記,是將獲得的蛋白質樣品通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,對不同分子量的蛋白質進行分離,并通過轉移電泳將凝膠上分離到的蛋白質轉印至固相支持物(NC膜或PVDF膜)上,用抗靶蛋白的非標記抗體(一抗)與轉印后膜上的靶蛋白進
蛋白質的定量,是生物化學中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有以下幾種方法:定氮法、紫外吸收法、Lowry法(Folin-酚試劑法)、Bradford法(考馬斯亮藍法)、BCA法等:定氮法比較繁復,但較準確,往往以定氮法測定的蛋白質作為其他方法的標準蛋白。 紫外吸收法簡便、靈敏、快速,不消耗樣
2.[操作步驟] 1. 將研磨管離心一分鐘(不低于12000×g)棄上清。 2. 加入裂解液(200-300ul)充分vortex. 3. 再加入樣品鼠腦組織(低于100mg)充分研磨。然后可以再加入裂解液至1ml.. 4. 將組織懸液離心5-10min(高于
一、 相關理論1、 血清(漿)蛋白質是血清(漿)固體成分中含量最多、組成復雜、功能廣泛的一類化和物。2、 血清(漿)蛋白質的分類:目前已研究的有300 余種,已分離提純的有100 余種,大部分在肝臟合成。1) 鹽析法可將血漿蛋白分為白蛋白(Albumin, Alb 或A)和球蛋白(Globulin,
實驗概要雙縮脲法(Biuret法)和Folin―酚試劑法(Lowry法)的明顯缺點和許多限制,促使科學家們去尋找更好的蛋白質溶液測定的方法。1976年由Bradford建立的考馬斯亮蘭法(Bradford法),是根據蛋白質與染料相結合的原理設計的。這種蛋白質測定法具有超過其他幾種方法的突出優點,因而
核酸蛋白檢測儀核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置,核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(根據需要選配)和電腦打印設備即構成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統。它是當今從事生命科學研究、藥物測定、化工、食品科學及醫學研究等行業的現代分析實驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析系統廣泛用于
核酸蛋白檢測儀核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置,核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(根據需要選配)和電腦打印設備即構成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統。它是當今從事生命科學研究、藥物測定、化工、食品科學及醫學研究等行業的現代分析實驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析
核酸蛋白檢測儀核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置,核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(根據需要選配)和電腦打印設備即構成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統。它是當今從事生命科學研究、藥物測定、化工、食品科學及醫學研究等行業的現代分析實驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析系統廣泛用于
目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法,雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍 使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法); 還有近來廣為應用的蛋白定量方法——BCA法。其中Bradford法和Lowry法靈敏度較高,
核酸蛋白檢測儀核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置,核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(根據需要選配)和電腦打印設備即構成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統。它是當今從事生命科學研究、藥物測定、化工、食品科學及醫學研究等行業的現代分析實驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析
核酸蛋白檢測儀核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置,核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(根據需要選配)和電腦打印設備即構成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統。它是當今從事生命科學研究、藥物測定、化工、食品科學及醫學研究等行業的現代分析實驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析系統廣泛用于
核酸蛋白檢測儀核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置,核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(根據需要選配)和電腦打印設備即構成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統。它是當今從事生命科學研究、藥物測定、化工、食品科學及醫學研究等行業的現代分析實驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析系統廣泛用于
目前常用比色法測定樣品蛋白的含量:Bradford法(考馬斯亮藍法)、Lowry法(Folin-酚試劑法)、 BCA法等。但各有優缺點,大家可以根據具體情況選取。按相應蛋白質定量試劑盒操作說明操作,測定樣品濃度。收集完蛋白樣品后,為確保每個蛋白樣品的上樣量一致,需要測定每個蛋白樣品的蛋白濃
一、Bradford法蛋白質與考馬斯亮蘭染料結合生成藍色物質,藍色物質的量與蛋白質濃度的高低成正比。生成的藍色物質在595nm處有最大光吸收,通過測定595nm的光吸收,來測定蛋白質濃度。實驗中一般利用牛血清白蛋白(BSA)來作標準曲線,此法的靈敏度為25~200ug/ml。甘油、吐溫(tween)