蛋白濃度測定方法有很多種,各種蛋白質含量測定的研究也屢見報道。每種方法都有其優點和局限性,在蛋白質樣品中往往會含有一些化學試劑,有些化學試劑會干 擾蛋白濃度測定。因此,尋找合適的實驗方法以避免干擾對蛋白濃度測定的準確性至關重要。基于Lowry法在測定PEG_IL_6樣品時出現大量黃綠色沉 淀,尿素對BCA法測定蛋白濃度測定有嚴重干擾,影響結果準確性,我們試驗了外兩種方法,并進一步對方法進行了比較分析。1 材料Folin酚試劑、考馬斯亮藍G_250及4,4-二羧酸-2,2-二喹啉(BCA)均為Sigma公司產品;總蛋白(BSA)標準購自上海生物制品研究 所;變性液為大腸桿菌破碎后加入β一巰基乙醇處理的樣品;其它試劑均為國產分析純。2 方 法Lowry法操作參考文獻。磺基水楊酸沉淀法操作參考 文獻。Bradford法操作參考文獻,為方便試驗稍作改變,即取0~500 gg/mL的樣品100 L加Bradford試劑2 mL,室溫放置5......閱讀全文
實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測,對于不同的目的,應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性,所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大
實驗原理: 蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bra
一、 哪些藥物在什么情況下需要監測血藥濃度 處于有效范圍雖然很重要,但并不是所有的藥物在各種情況下都需要監測。有下列的情況進行監測是十分必要的: (一) 安全范圍窄、毒副作用強的藥物。 如地高辛的安全而有效的血清濃度范圍為0.9-1.8ng/ml,由于本品制劑生物利用度的差異及病人個體的差異,服常
一、 哪些藥物在什么情況下需要監測血藥濃度處于有效范圍雖然很重要,但并不是所有的藥物在各種情況下都需要監測。有下列的情況進行監測是十分必要的:(一) 安全范圍窄、毒副作用強的藥物。如地高辛的安全而有效的血清濃度范圍為0.9-1.8ng/ml,由于本品制劑生物利用度的差異及病人個體的差異,服常用劑量時
一、 哪些藥物在什么情況下需要監測血藥濃度處于有效范圍雖然很重要,但并不是所有的藥物在各種情況下都需要監測。有下列的情況進行監測是十分必要的:(一) 安全范圍窄、毒副作用強的藥物。如地高辛的安全而有效的血清濃度范圍為0.9-1.8ng/ml,由于本品制劑生物利用度的差異及病人個體的差異,服常用劑量時
一、 哪些藥物在什么情況下需要監測血藥濃度處于有效范圍雖然很重要,但并不是所有的藥物在各種情況下都需要監測。有下列的情況進行監測是十分必要的:(一) 安全范圍窄、毒副作用強的藥物。如地高辛的安全而有效的血清濃度范圍為0.9-1.8ng/ml,由于本品制劑生物利用度的差異及病人個體的差異,服常用劑量時
蛋白質是構成生物體細胞組織的重要成分。食物中的蛋白質是人體中氮的惟一來源, 具有糖類和脂肪不可替代的作用。蛋白質與營養代謝、細胞結構、酶、激素、病毒、免疫、物質運轉和遺傳等密切相關, 其分離與定性、定量分析是生物化學和其他生物學科、食品檢驗、臨床檢驗、診斷疾病、生物藥物分離提純和質量檢驗中最重要的工
關于包涵體的純化是一個令人頭疼的問題,包涵體的復性已經成為生物制藥的瓶頸,關于包涵體的處理一般包括這么幾步:菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復性以及純化,內容比較龐雜 一、菌體的裂解 1、怎樣裂解細菌? 細胞的破碎方法 1.高速組織搗碎
1.2.7重組融合蛋白的純化 PrP-pET-32a(+)轉化表達菌E.coli BL21(DE3),TB培養基中,25℃,AMP 200 ug/ml,搖床(250 r/min)培養至OD600約為1.5,更換等體積新鮮TB培養基,加入IPTG至終濃度1 mM,AMP 200 ug/ml,
一、前言目前用于測定受體配體間的親和力,也就是解離平衡常數的方法,主要有:熱力學測定方法動力學測定方法飽和濃度法 其中動力學測定方法和飽和濃度法較為通用:動力學測定方法(如Biacore)涉及到比較昂貴的儀器投入,飽和濃度測定法為國內絕大多數生物藥物企業常用的測定方法。ELISA用于親和力的測定是飽
8、包涵體復性液配方 對于包涵體復性,一般在尿素濃度4M左右時復性過程開始,到2M 左右時結束。對于鹽酸胍而言,可以從4M開始,到1.5M 時復性過程已經結束。TRIS系統和PBS系統都沒有明確的規定,這些需要你在實驗過程中不斷試驗,確定合適的緩沖系統;不過復性過程主要
史上最全的甲狀腺疾病實驗室檢查項目,您值得收藏!血清甲狀腺激素測定甲狀腺素(T4)全部由甲狀腺分泌,而三碘甲腺原氨酸(T3)僅有20%直接來自甲狀腺,其余約80%在外周組織中由T4經脫碘代謝轉化而來。T3是甲狀腺激素在組織實現生物作用的活性形式。正常情況下,循環中T4約99.98%與特異的血漿蛋白相
血清胱抑素C及其臨床應用: 胱抑素C(CystatinC,簡稱CysC)亦稱半胱氨酸蛋白酶抑制劑C,是一種由120個氨基酸組成,分子量為13kDa的低分子量、堿性非糖化蛋白質。CysC基因在包括腎、肝、胰、腸、胃、肺及胎盤等所有組織中持續地轉錄和表達。研究發現CysC是半胱氨酸蛋白酶抑制物家族的成
血清胱抑素C(半胱氨酸蛋白酶抑制劑C)研究及其臨床應用:胱抑素C(Cystatin C,簡稱CysC)亦稱半胱氨酸蛋白酶抑制劑C,是一種由120個氨基酸組成,分子量為13kDa的低分子量、堿性非糖化蛋白質。CysC基因在包括腎、肝、胰、腸、胃、肺及胎盤等所有組織中持續地轉錄和表達。研究發現CysC是
血清胱抑素C及其臨床應用:胱抑素C(CystatinC,簡稱CysC)亦稱半胱氨酸蛋白酶抑制劑C,是一種由120個氨基酸組成,分子量為13kDa的低分子量、堿性非糖化蛋白質。CysC基因在包括腎、肝、胰、腸、胃、肺及胎盤等所有組織中持續地轉錄和表達。研究發現CysC是半胱氨酸蛋白酶抑制物家族的成員之
一、血清甲狀腺激素測定(TT4、TT3、FT4、FT3)甲狀腺素(T4)全部由甲狀腺分泌,而三碘甲腺原氨酸(T3)僅有20%直接來自甲狀腺,其余約80%在外周組織中由T4經脫碘代謝轉化而來。T3是甲狀腺激素在組織實現生物作用的活性形式。正常情況下,循環中T4約99.98%與特異的血漿蛋白相結合,包括
ELISA原理 ELISA利用抗原抗體之間專一性結合之特性,對標本進行檢測;由于結合與固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性,因此設計 其結合 機制後,配合酵素顯色反應,即可顯示特定抗原或抗體是否存在,并可利用顯色之深淺進行定量分析。根據待測樣品與結合機制的不同,ELI
免疫印跡western實驗中內參基因的選擇和注意事項 Western Blot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言Western Blot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。 雖然,順利的時候Western blot做
Western Blot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言Western Blot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。雖然,順利的時候Western blot做起來很簡單,可不順的時候也很令人心煩――做不出結果啦、假陽性啦、
實驗原理:蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bradford法
Western Blot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言Western Blot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。雖然,順利的時候Western blot做起來很簡單,可不順的時候也很令人心煩――做不出結果啦、假陽性啦、結果出現
蛋白的復性是一個世界性的難題,沒有通用的方法,甚至沒有靠得住的規律,只能試。可以參考以下文章。該文出處已經忘了,如果有人知道原創作者或網上出處,請補充。包涵體表達的蛋白的復性包涵體表達的蛋白的復性包涵體:包涵體是指細菌表達的蛋白在細胞內凝集,形成無活性的固體顆粒。包涵體的組成與特性:一般含有50%以
簡述:傳統標準的BCA蛋白定量分析方法常規均使用試管或者微孔板進行檢測,通過對傳統方法進行改進,可使用BioTek公司的Take3TM 超微量多體積檢測板進行原位微量BCA法蛋白定量分析。待測蛋白樣品和BCA工作緩沖液按照順序直接加在Take3TM板的微量定量孔處、溫浴,使用EpochTM
蛋白純化經驗指南生物谷整理 http://www.bioon.com 原創:Chromatography weixingui@263.net, 推薦書籍:《蛋白純化與實驗鑒定指南》、《生物工程下游技術》、《酶工程》、《酶制劑工業》 1) 我現在手頭
分散介質中的帶電粒子在直流電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳(electrophoresis)。蛋白質為兩性電解質,在不同pH溶液中帶不同的電荷,從而在直流電場中能夠泳動,這就是蛋白質的電泳現象。1937年瑞典化學家Tiselius首先建立了蛋白質的界面電泳技術,并成功地將血清
隨著飼料行業的飛速發展,飼料原料及其飼料產品的價格也居高不下。而粗蛋白的檢測是評定飼料原料及其產品的重要指標之一,目前常用的為凱氏定氮法,即國家頒布的《飼料中粗蛋白的測定方 法》(GB1996-6432)。但是該方法也存在著測定過程較復雜、費時等缺陷,測定時除嚴格按照規定程序操作外,還需要一定的實驗
相關專題western blot實驗western blot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言Western Blot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。雖然,順利的時候western blot做起來很簡單,可不順的時候也很令人心煩
人類基因組計劃的成功實施,我們已初步掌握了自身的遺傳信息。但闡明人類基因組整體功能的功能基因組學仍任重而道遠。蛋白質作為生命活動的"執行者",自然成為生命科學研究的新"寵兒"。幾乎在所有生命科學領域內,科學研究工作者都需要對細胞、組織或完整生物體的蛋白進行定性描述或定量檢測。對一種細胞、組織或完
近20年來,獸藥(包括藥物添加劑)在畜牧業中的應用日益廣泛,但是獸藥的使用無疑會導致動物體內藥物的滯留或蓄積,并以殘留的方式進入人體及生態系統。獸藥殘留對人類及環境的危害主要是慢性、遠期和累積性的,如致癌、發育毒性、體內蓄積、免疫抑制、致敏和誘導耐藥菌株等。動物性食品中的獸藥殘留已成為公認的農業和環
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術: 一、原理 二、分類